潛艇艙室不同狀態(tài)微生物氣溶膠的富集及調(diào)查分析.pdf

1、目的：建立適合潛艇艙室的微生物氣溶膠富集技術(shù)，跟蹤監(jiān)測潛艇在開放狀態(tài)及封閉狀態(tài)下作業(yè)艙室內(nèi)微生物氣溶膠濃度、菌譜組成及粒徑分布變化，評估其空氣污染程度及潛在的生物風(fēng)險。
　　方法：比較不同微生物氣溶膠采樣器（LWC-1和安德森）的富集效率，采用固體撞擊式采樣進(jìn)行微生物氣溶膠的富集；采用MALDI-TOF質(zhì)譜技術(shù)對潛艇艙室空氣中可培養(yǎng)微生物進(jìn)行鑒定；應(yīng)用實時熒光PCR方法對潛艇艙室空氣中非可培養(yǎng)微生物進(jìn)行檢測；評價標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《室內(nèi)空氣

2、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》（GB/T1883-2002)。
　　結(jié)果：與LWC-1型和安德森采樣器空氣微生物采樣器相比，安德森采樣器更適于作為本研究的微生物氣溶膠采集器，安德森采樣器的6級不同直徑范圍的孔道可以把空氣中的微生物粒子按照人體呼吸道結(jié)構(gòu)進(jìn)行分級，同時可以將粒徑作為重要參數(shù)之一與微生物氣溶膠濃度一起評價空氣微生物污染程度，同時可進(jìn)行非可培養(yǎng)微生物氣溶膠的富集鑒定；艙室內(nèi)的微生物氣溶膠，航行后濃度比航行前明顯升高（P＜0.05），不同艙室

3、以及不同級平皿上的菌落數(shù)均增加；長期封閉作業(yè)時，航行前可培養(yǎng)微生物為21個屬56個種，革蘭氏陽性球菌和革蘭氏陽性芽孢桿菌占總菌數(shù)為55.11%，革蘭氏陰性桿菌占總菌比例為4.23%，并且均為非發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌，航行后為37個屬80個種，革蘭陰性桿菌占總菌比例為29.75%，腸桿菌科占革蘭陰性菌的比例為24.4%，航行后革蘭陰性桿菌增加明顯，革蘭陽性球菌和革蘭陽性芽孢桿菌占總菌數(shù)25%，真菌類占總菌比例為24.75%，生物多樣性增加顯著

4、，絲狀真菌和革蘭陰性桿菌明顯增加；航行前后優(yōu)勢細(xì)菌種群發(fā)生明顯改變；FQ-PCR未檢到甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒、嗜肺軍團(tuán)菌、肺炎衣原體、肺炎支原體。
　　結(jié)論：選擇的安德森采樣器適于潛艇狹小空間的微生物氣溶膠富集及構(gòu)成分析，可以同時使用微生物氣溶膠的粒徑和濃度一同評價空氣微生物污染程度；航行前后潛艇艙室微生物氣溶膠的濃度及構(gòu)成復(fù)雜性明顯增加，不同艙室以及不同級平板的菌落數(shù)均增加，以條件致病菌增