精密度評估指南

1、精密度評估指南,zhengjinlai@sina.com鄭金來,前言,精密度是衡量體外診斷試劑批內和批間變異的重要指標，通常包括批內和批間不精密度。精密度評估資料是評價擬上市產品有效性的重要依據，產品注冊所需的重要申報資料之一 。,定義,批內精密度是眾多種類精密度中最基本的一個，它是在嚴格的相似條件下，所得到的最佳的精密度。批間精密度指在同一實驗室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號試劑，在一段時間

2、內(一般為一個月或20個工作日)對同一測試樣品（常用質控品）測量結果的精密度。？？？？？？,精密度評估的基本原則,操作者必須熟悉方法和/或儀器工作原理，了解并掌握儀器的操作步驟和各項注意事項，能在評估階段維持儀器的可靠和穩(wěn)定。用于評估試驗的樣品一般常采用臨床實驗室收集的穩(wěn)定和冷凍貯存的血清(漿)庫；當實驗室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時，也可考慮使用穩(wěn)定的、以蛋白質為基質的商品物質，如校準品或質控品,精密度評估的基本原則,評估精密度時

3、，應至少評估二個濃度水平樣本的精密度。當二個濃度的精密度有顯著差異時，建議增加為三個濃度。所選樣本濃度應在測量范圍內有醫(yī)學意義，即至少有一個濃度在醫(yī)學決定水平(medical decision levels)左右。不要為了得到較小的精密度，都選用較高值的樣品，甚至超出測量范圍。也不應選用靠近最低檢出限的樣品，此時所得的精密度往往偏大。,精密度評估的基本原則,相當多的檢驗項目低值常無實際臨床意義，但有少數檢驗項目，其低值也有臨床價

4、值，此時就需要評估有判斷價值的低值精密度，適用時，可進行功能靈敏度的評估。如沒有醫(yī)學決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選一個濃度。此外，再根據檢驗項目的性質在線性區(qū)間內選擇另一個值。如與廠商或文獻報導的精密度進行比較，所選濃度應與被比較精密度的濃度相接近。否則，有可能得出不恰當的結論。,只評估批內不精密度,試劑和校準品：應使用同一種類、同一批號的試劑和校準物,如可能,只進行一次校準。使用不同批號試劑和多次校準都會增加檢驗結果的變異程度

5、,只評估批內不精密度,評估方法：在以上條件滿足的情況下，在一批內對樣本進行重復測定，至少進行20次重復測定,只評估批內不精密度,質量控制：檢驗時應同時至少測一個質控品。當質控品結果超出規(guī)定的失控限，不論實驗結果是否滿意都應棄去不用，重新進行試驗以取得20個實驗數據。要保存所有的質控數據和失控處理記錄,只評估批內不精密度,數據收集：在進行數據分析前，檢查數據中有無由于偶然差錯引起的離群值(outliers)，可用下述離群值的標準；

6、從已收集的20數據計算出總均值和標準差，任何結果和總均值的差值超過4個標準差時，可認為是離群值。為了能收集到至少20個有效數據。除補充由于質控失控而增加的測試外，還應再增加由于離群值不用于精密度的計算所需增加的檢驗次數。,只評估批內不精密度,數據收集：在進行這種批內精密度評估實驗時，一次只能有一個離群值，當離群值超過1個時，應懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時，應不用此次試驗數據。檢查問題和解決問題后重新開始新的評估實驗

7、,只評估批內不精密度,數據的記錄：將所收集到的數據記錄在表中,只評估批內不精密度,批內精密度估計值的計算求出均值： =∑Xi/n使用下列公式計算出批內標準差估計值的標準差精密度？標準差與均值的關系,只評估批內不精密度,批內精密度估計值的計算批內精密度估計值的95%可信限查統(tǒng)計表得出自由度20的上限公差因數為1.25，相應下限公差因數為0.75，得出批內精密度的95%可信區(qū)間為：（批內精密度×0.75）-（批內精密度&

8、#215;1.25）,同時評價批內和批間不精密度,評估方法：每天做2個批次的測試，每批測試時，對同一樣品作雙份測量，共做20天。評估結束時共有40對，即80個測試結果。從40批次測量中雙份結果的差值求出批內精密度。從所有80個數據計算出批間精密度,同時評價批內和批間不精密度,評估方法：在實施此項評估工作時，必須由同一個或一組操作者在同一臺儀器上進行，應該使用相同的校準品、相同種類和批號的試劑。所用時間不得少于20個工作日，這樣

9、所測到的精密度能更好地反映出該臨床實驗室定量測量方法在一段時間內的理想或最適的穩(wěn)定性。 在每一批次測量中，必須同時測量質控品，以保證結果是可靠的，數據能夠采用。,同時評價批內和批間不精密度,評估方法：也可以一日進行一個批次測量，一個批次中對同一樣品重復測量4次，共測20個工作日，由80個數據求出批內和批間精密度；如果取得穩(wěn)定樣品有困難，也可改為測5日，每日2個批次，每個批次測一個樣本8次。仍有80個數據。從10個批次中每一樣品8次

10、差異算出批內精密度。從所有80個結果計算出批間精密度。,同時評價批內和批間不精密度,數據的收集要收集到足夠有效數據(至少為80個數據)。除補充由于質控失控而增加的測試外，應在進行數據分析前，檢查數據中有無由于偶然差錯引起的離群值(outlier)，可用下述剔除值的標準。,同時評價批內和批間不精密度,數據的收集從實施段已收集的40對均值的數據計算出總均值和標準差，出現下列任何一種情況都可認為是離群值：任何一對均值和總均值的差超過4

11、倍標準差任何一對中二個結果的絕對差值超過4倍標準差離群值不用于精密度的計算。在剔除后應再增加檢驗次數，以保證至少有40批次，80個數據進行計算。,同時評價批內和批間不精密度,數據的收集從實施段已收集的40對均值的數據計算出總均值和標準差，出現下列任何一種情況都可認為是離群值：任何一對均值和總均值的差超過4倍標準差任何一對中二個結果的絕對差值超過4倍標準差離群值不用于精密度的計算。在剔除后應再增加檢驗次數，以保證至少有40批次

12、，80個數據進行計算,同時評價批內和批間不精密度,數據的收集任何一次實驗的剔除值不能超過總測量數的2.5%。當超過時，應懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時應不用此次試驗數據，重新開始新的試驗。,同時評價批內和批間不精密度,數據的記錄,同時評價批內和批間不精密度,批內精密度的計算批內精密度Sr I=檢驗日數,同時評價批內和批間不精密度,批間精密度的計算,同時評價批內和批間不精密度,批間精密度的計算求均值：從上表得出

13、：批間精密度：從上表得出：n=檢驗總數,同時評價批內和批間不精密度,批間精密度估計值的置信區(qū)間由于檢驗次數不可能無限增加，當按規(guī)定方案，多次重復測量，就是在很好控制條件下，也很難得到相同的值，換言之，通過這樣實驗的數值只是精密度的估計值，圍繞“真值”而變動。變動的范圍大小和檢驗次數密切相關。人們往往在給出精密度值外，還給出其95%的置信區(qū)間。,同時評價批內和批間不精密度,批間精密度估計值的置信區(qū)間置信區(qū)間與所測次數相關，次數

14、愈多，可信限愈小可以查出與檢次數相關自由度的0.95因數，乘以標準差值就可得出95%可信限的上、下值。實際工作中，可查出95%可信限的上值的公差因數（tolerance factor），由此計算出95%可信限。實驗室在報告精密度同時，可給出95%置信區(qū)間。,與其它來源的精密度的比較,臨床實驗室在測定方法的精密度后，應評價得到的精密度是否滿意，最簡單辦法就是與生產企業(yè)（文獻）所提供的精密度進行比較，判斷是否存在差異。如果臨床實驗室所

15、測的精密度小于生產企業(yè)（文獻）的精密度，說明臨床實驗室所得到的精密度是合適的。如果臨床實驗室測得的精密度大于生產企業(yè)（文獻）的值，可利用F-檢驗法（F-test），即方差比值檢驗（variance ratio test）對實驗室測得的結果和生產企業(yè)提供的結果進行比較計算 。,與其它來源的精密度的比較,與生產企業(yè)（文獻）聲明批間標準差的比較表,與其它來源的精密度的比較,標準差大小常與濃度有關，比較時，必須檢查二者濃度是否接近一致，如差異

16、較大不應進行比較。如接近一致，按下列公式計算出F值，以批間精密度為例。F=Srr2/σrr2計算出的F值和根據二組自由度從下表中查到的F值(p=0.05)進行比較，如計算F值小于查表得出F值，雖然實驗室得到的標準差大于聲稱值，但在統(tǒng)計學上無差異。反之，說明實驗室得到的標準差沒有達到方法應達到的水平,與其它來源的精密度的比較,精密度的報告形式,在報告測量精密度時，應同時說明下列各點批內標準差及其95%置信區(qū)間；批內變異系數;批間