腸道微生態(tài)研究進(jìn)展b2014

1、,,2024/3/12,1,腸道微生態(tài)研究新進(jìn)展 鎮(zhèn)海龍賽醫(yī)院,2024/3/12,2,人體實(shí)為由自體細(xì)胞與微生物細(xì)胞共同組成的超級(jí)生物體，其中腸道內(nèi)微生物數(shù)量與種類(lèi)最為龐大，約為l014個(gè)、上千種，以細(xì)菌為主。即使目前生物科學(xué)技術(shù)日益趨于完善，但仍有超過(guò)70％的腸道微生物不能被分類(lèi)。,2024/3/12,3,,應(yīng)用腸道菌群的宏基因組測(cè)序技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)，人類(lèi)腸道微生物包含300萬(wàn)個(gè)基因，是人類(lèi)基因的150倍。但是，目前對(duì)

2、作為一個(gè)整體的宏基因組腸道微生物組的了解甚少，現(xiàn)在，已知人體腸道微生物基因不到1%。,2024/3/12,4,,人類(lèi)腸道微生物群落被認(rèn)為是人類(lèi)的“第二指紋”及“第二基因組”,2024/3/12,5,,2007年(《DNA Research))雜志)： 服部教授對(duì)腸內(nèi)細(xì)菌種類(lèi)和基因進(jìn)行調(diào)查。發(fā)現(xiàn)人與人之間的腸內(nèi)細(xì)菌群并不相似?！?5億人，每個(gè)人都有自己特有的腸內(nèi)細(xì)菌群，即使是同卵的雙胞胎，腸內(nèi)細(xì)菌群也不相同”,2024/3

3、/12,6,,腸道菌群，尤其是結(jié)腸菌群，是微生物密度最高的菌落。已報(bào)道的腸道細(xì)菌包括200多種菌屬，共800余菌種，菌株種類(lèi)則達(dá)7000余種仍有超過(guò)70％的腸道微生物不能被分類(lèi)，且超過(guò)9O 無(wú)法通過(guò)培養(yǎng)方法鑒定。,2024/3/12,7,,,2024/3/12,8,,腸道菌群作為機(jī)體的體外器官，其最顯著特征是他構(gòu)成的穩(wěn)定性，通過(guò)影響食物代謝和消化道功能與結(jié)構(gòu)，同時(shí)產(chǎn)生大量的生物活性代謝分子而發(fā)揮激素樣效應(yīng)，從而參與宿主的物質(zhì)代謝，促進(jìn)宿

4、主營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收，在維持腸道正常生理功能、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫以及拮抗微生物的定植方面發(fā)揮了重要作用。,2024/3/12,9,,美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生院自2007年l2月開(kāi)始進(jìn)行人體代謝組計(jì)劃(Human Microbiome Project)，目標(biāo)之一就是要完全了解腸內(nèi)細(xì)菌的特性。,2024/3/12,10,,2008年歐盟人類(lèi)腸道元基因組計(jì)劃的啟動(dòng)。該領(lǐng)域研究受到空前的重視。,2024/3/12,11,,進(jìn)入21世紀(jì)后，相關(guān)項(xiàng)目數(shù)量位居前列的單位

5、包括浙江大學(xué)、南京軍區(qū)南京總醫(yī)院、上海交通大學(xué)。,2024/3/12,12,,南京軍區(qū)總醫(yī)院黎介壽院士團(tuán)隊(duì)對(duì)腸道菌群與腸粘膜屏障、腸道菌群與小腸移植等的關(guān)系進(jìn)行了深入研究。,2024/3/12,13,,浙江大學(xué)李蘭娟院士團(tuán)隊(duì)在腸道微生態(tài)與慢性肝病的關(guān)系方面做了大量工作，發(fā)現(xiàn)肝硬化糞便菌群與正常人群比較有明顯變化并與預(yù)后有關(guān)。,2024/3/12,14,,李蘭娟院士團(tuán)隊(duì)今年發(fā)表文章：應(yīng)用宏基因組學(xué)的研究方法， 開(kāi)展了肝硬化腸道菌群的深度測(cè)

6、序及關(guān)聯(lián)分析研究。 建立了世界上首個(gè)肝病腸道菌群基因集，其中36.1％的基因?yàn)槭状伟l(fā)現(xiàn)。,,上海交通大學(xué)趙立平團(tuán)隊(duì)，研究方向集中于腸道菌群、宿主遺傳背景、飲食等因素相互作用與肥胖、胰島素抵抗等代謝綜合征不同表型、腸道炎癥／腫瘤的關(guān)系，發(fā)表了創(chuàng)新性的成果。,2024/3/12,16,細(xì)菌鑒定,一：傳統(tǒng)測(cè)定法在腸道菌群的測(cè)定中，傳統(tǒng)的分離檢測(cè)方法目前仍被廣泛地采用。主要步驟是采集病人的糞便或腸內(nèi)容物，然后進(jìn)行微生物培養(yǎng)計(jì)數(shù)

7、或涂片觀察。,2024/3/12,17,,2024/3/12,18,,2024/3/12,19,,二：分子生物學(xué)測(cè)定法，近年來(lái)分子生物學(xué)技術(shù)運(yùn)用于菌群的測(cè)定剛剛興起，該方法的應(yīng)用主要得益于兩項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)的發(fā)明，一是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，即Real time PCR；另一個(gè)是變性梯度凝膠電泳(DGGE)技術(shù)。,2024/3/12,20,,用于菌株鑒定的16SrRNA分析。但較之傳統(tǒng)方法，其操作復(fù)雜，所需的實(shí)驗(yàn)條件高，目前臨床的應(yīng)用較少，

8、主要用于科研性檢測(cè)。但隨著技術(shù)的發(fā)展，分子生物學(xué)測(cè)定法將會(huì)在臨床檢測(cè)中逐漸應(yīng)用。,2024/3/12,21,,目前，存在于腸道的正常菌群包括類(lèi)桿菌、乳桿菌、大腸埃希菌和腸球菌等，尚有少數(shù)過(guò)路菌，如金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、副大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、白色念珠菌等。,2024/3/12,22,乳酸桿菌,2024/3/12,23,雙岐桿菌,2024/3/12,24,腸道微生態(tài)平衡被打破,2024/3/12,25,,,2

9、024/3/12,26,由于對(duì)人體微生態(tài)平衡的重要性認(rèn)識(shí)不足，臨床上濫用、泛用抗菌藥物而誘發(fā)的微生態(tài)失調(diào)現(xiàn)象屢見(jiàn)不鮮，如假膜性腸炎、敗血癥、醫(yī)院獲得性肺炎等，對(duì)病人、醫(yī)院和社會(huì)均造成不同程度的損害或負(fù)擔(dān)。,,抗生素和各種醫(yī)療操作是一把“雙刃劍”，如果應(yīng)用得當(dāng)，可抑制致病菌繁殖，有效控制細(xì)菌感染性疾病，治愈疾病。但是，如果過(guò)度使用或?yàn)E用，則可能“濫殺無(wú)辜”，破壞微生態(tài)平衡，引起微生態(tài)失調(diào)。,2024/3/12,27,2024/3/12,2

10、8,腸道微生態(tài)失衡分類(lèi),正常微生物群之間、正常微生物群與其宿主之間的微生態(tài)平衡，在外環(huán)境影響下，由生理性組合轉(zhuǎn)變?yōu)椴±硇越M合的狀態(tài)，稱(chēng)為微生態(tài)失調(diào)。,微生態(tài)失調(diào)可分為： ● 菌群失調(diào)（比例失調(diào)） ● 定位轉(zhuǎn)移 ● 自身感染,,腸道菌群失調(diào)與下列腸外疾病有關(guān)；1 肺部過(guò)敏反應(yīng)2 造血功能異常3 代謝性疾病4 慢性疲勞綜合征與抑郁焦慮癥5 肝性腦病6多器官功能衰竭7與心血管系統(tǒng)疾病8腫瘤9衰老,20

11、24/3/12,29,治療,一：益生菌與益生元二：抗生素三：腸粘膜營(yíng)養(yǎng)劑/粘膜保護(hù)劑/腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)技術(shù)四：糞菌移植(fecal microbiota transplantation，F(xiàn)MT)作為一種歷史悠久且可以重建腸道菌群的療法重新被臨床所關(guān)注,,糞菌移植是嚴(yán)重腸道菌群失調(diào)、嚴(yán)重便秘、難治性IBD、復(fù)發(fā)性難辨梭狀芽胞桿菌感染的新型治療措施，隨著糞菌移植在消化道疾病、能量代謝、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、自身免疫性疾病中的應(yīng)用和發(fā)展，其臨床適應(yīng)證將

12、獲進(jìn)一步界定，糞菌移植的標(biāo)準(zhǔn)化操作將推動(dòng)其發(fā)展和應(yīng)用。,,我們自己的一些工作,2024/3/12,33,,服藥時(shí)間、年齡與SIBO相關(guān)性分析 服藥時(shí)間 SIBO（＋） ％ 年齡（歲） SIBO（＋） ％

13、 2－4周 11 40.7 <50 13 48.1 4－8周 26 76.5 51－60 17 73.9 8

14、周以上 15 71.4 61以上 22 68.8趨勢(shì)卡方 X2=5.453, P=0.02 X2=2.465, P=0.116

15、 待發(fā)表,2024/3/12,34,,SIBO 影響因素Logistc回歸分析 B S

16、.E Wald df Sig Exp(B) 服藥時(shí)間 .667 .340 3.846 1 0.50 1.949年齡

17、 .304 .329 .857 1 .355 1.356性別 .044 .503 .007 1 .931 1.044學(xué)歷 .045 .509 .008 1 .930 1.046

18、職業(yè) –.126 .434 .085 1 .771 .881 待發(fā)表,2024/3/12,35,,SIBO 組選擇性去污后療效比較

19、 臨床癥狀評(píng)估積分均數(shù) 治療前 N 治療后 N t值 P

20、 腹痛 4.38 37 2.11 37 13.567 1.0×10－15腹脹 4.64 45 2.51 45 13.443 2.6×10－18