api菌種鑒定系統(tǒng)介紹

1、API菌種鑒定系統(tǒng)介紹,API鑒定系統(tǒng)是由法國生物-梅里埃公司生 產的細菌數值分類分析鑒定系統(tǒng)?？设b定的細 菌大于800種。 API系統(tǒng)用于細菌鑒定的產品有15種, 別 有相應的數據庫。,A P I 鑒定系統(tǒng)的組成,A P I 鑒定系統(tǒng)的主要部分是 API試劑條、輔助試劑及結果判讀系統(tǒng)組成,鑒定主要依據API試劑條的生化反應結果，將一種細菌與其它細菌相鑒別,并用% id (鑒定百分率) 表示每種細菌的可能性

2、。,1.發(fā)酵或同化抑制試驗: 是根據待測菌是否受到反應杯中特異抑制物的抑制而不能產生分解代謝或不能生長來判斷。,2.酶試驗: 根據待測菌含有相應的酶就可分解底物, 再通過顯色反應來判斷。如堿性磷酸酶、氧化酶、B- 半乳糖苷酶、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶、色氨酸脫羧酶、吲哚產生等。,3.其它生化反應: 如硝酸鹽還原酶、七葉苷、明膠、硝酸鹽還原等。,4.發(fā)酵試驗: 為碳水化合物與酸的分解代謝試驗, 結果是通過PH 的變化引起酸堿指示劑顏色的

3、改變來判斷。如葡萄糖、乳糖、甘露糖、蔗糖、甘露醇、肌醇、山梨醇等。,5.同化試驗: 根據待測菌能否利用反應杯中的單一碳水化合物作為碳源而得以生長來判斷。如葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、甘露醇、N - 乙酰葡糖銨、葵酸、乙二酸、蘋果酸等。,常見的生化反應,API試劑條,API試劑條由透明的PVC材料制成, 不同的試劑條有不同數量 的反應杯, 每個反應杯內包被有相應的干燥生化基質,在A P I 鑒定系統(tǒng)中有15 個鑒定系列, 20 余個品

4、種, 對于不同的細菌，分別使用不同的試劑條,某些試驗在孵育完成后需添加試劑才能進行判斷。如吲哚試驗需添加IND 或James 試劑, V P 試驗需添加V P1、V P2 試劑, 硝酸鹽還原試驗需添加N IT1、N IT 2 試劑、色氨酸脫羧酶試驗需添TDA 試劑等,輔助試劑,結果判讀系統(tǒng),A P I LAB Plus 分析軟件,原理：生化結果組合跟資料庫內的典型條目作比較，經計算後得出： 鑒定百比率（%Id）

5、＝機會率 與數據庫中各個項的接近程度來確認未知菌是否屬于某一個分類單位(科,屬,種) T值（T index）=變異程度 待檢菌的分類單位被確定以后，T 值表示其生化反應結果與該菌最典型生化譜的接近程度,鑒定前常規(guī)的分離培養(yǎng)是必不可少的。 分離培養(yǎng)后挑選可疑菌落進行預試驗, 如革蘭氏 染色、鏡檢、氧化酶實驗、觸酶試驗等。 預試驗起定向的作用, 根據定向的結果

6、選用不同的A P I 試劑條。,鑒定前的準備,桿菌,球菌,接觸,接觸,革蘭氏,革蘭氏,桿菌,球菌,氧化,氧化,革蘭氏,革蘭氏,革蘭氏染色(compare with selective medium &morphology),數 碼 鑒 定,,將每3個生化反應分成一組,每組中陽性結果分別標記為1、2、4 將每組數值相加,得到一組編碼,結果判讀,,極好的鑒定 % id >99.9

7、 T >0.75 非常好的鑒定 % id >99 T >0.5 好的鑒定 % id >90 T >0.25 可接受的結果 % id >80 T >0 不可接受的結果 % id <80,每一個鑒定結果都會附有相應的評語- 鑒定結果的可信性,,彎