真菌性角膜炎的菌種鑒定.pdf

1、本文探討PCR結(jié)合DNA測(cè)序技術(shù)檢測(cè)真菌性角膜炎的臨床應(yīng)用價(jià)值。 方法：應(yīng)用半巢式PCR擴(kuò)增ITS2/5.8SrDNA區(qū)域來檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)真菌菌株和15例臨床疑診真菌性角膜炎患者角膜刮片中的真菌DNA。結(jié)果與涂片鏡檢和真菌培養(yǎng)的診斷陽(yáng)性率相比較。另外，在第一輪擴(kuò)增中，同時(shí)檢測(cè)標(biāo)本中的真菌和細(xì)菌DNA，以確定是否合并細(xì)菌感染。結(jié)果：應(yīng)用半巢式PCR技術(shù)所有標(biāo)準(zhǔn)真菌和12例臨床疑診真菌性角膜炎的角膜刮片中真菌檢測(cè)均呈陽(yáng)性，但是標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌和正

2、常人角膜組織真菌檢測(cè)均陰性，擴(kuò)增片段長(zhǎng)約290bp，半巢式PCR擴(kuò)增共耗時(shí)5小時(shí)。DNA測(cè)序確定菌種。敏感性為75﹪，真菌培養(yǎng)敏感性為86.6﹪；鏡檢敏感性為40﹪。通過孢子稀釋法檢測(cè)，MPCR和半巢式PCR的檢測(cè)靈敏度分別為5個(gè)和1個(gè)茄病鐮刀菌孢子。DNA測(cè)序后確定了菌種。 結(jié)論：擴(kuò)增ITS2/5.8SrDNA的半巢式PCR及DNA序列分析技術(shù)是一種快速、敏感、特異、可靠的診斷真菌性角膜炎的實(shí)驗(yàn)室方法，為后續(xù)的臨床治療打下了良