Dectin-1受體在真菌性角膜炎角膜上皮中的表達.pdf

1、目的:觀察樹突狀細胞相關(guān)性C-型凝集素-1(Dendritic cell-HSSOCiated C-typelectin-1.dectin-1)受體在真菌性角膜炎角膜上皮中的表達,并與正常角膜上皮中dectin-1受體的表達進行對比并分析其意義。
　　 方法:2010年7月至2011年12月于青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院就診并行穿透性角膜移植術(shù)的真菌性角膜炎患者20例(20眼)為實驗組,20例(20眼)健康供體角膜用于制作角膜植片后剩

2、余周邊角膜組織為對照組,刮取術(shù)中切取的實驗組病變角膜病灶周邊角膜上皮及對照組供體角膜周邊角膜上皮,應(yīng)用real-time RT-PCR技術(shù)檢測實驗組與對照組角膜上皮中dectin-1受體mRNA的表達。健康Wistar大鼠72只,雌雄不限,其中54只用于real-time RT-PCR實驗:A1組6只(6眼)為空白對照組、B1組24只(24眼)為損傷對照組、C1組24只(24眼)為真菌實驗組,空白對照組不予處理,真菌實驗組以右眼為實驗眼

3、,在刮除中央上皮的大鼠角膜滴入煙曲霉菌菌絲并覆蓋自制角膜接觸鏡,建立真菌模型,損傷對照組左眼為損傷對照眼,僅覆蓋角膜接觸鏡,造模后4h、8h、16h、24h處死大鼠,刮取角膜上皮;18只用于免疫組織化學(xué)實驗,隨機分為3組(各6眼):A2組空白對照組、B2組損傷對照組、C2組真菌實驗組,造模后24h處死大鼠,取眼球。檢測大鼠角膜上皮中dectin-1與toll樣受體-4(toll-like receptor4,TLR4)的表達。
　

4、　 結(jié)果:Dectin-1受體mRNA在正常人及真菌性角膜炎患者角膜上皮中均有表達。Dectin-1和TLR4受體在大鼠空白對照眼及損傷對照眼角膜上皮中表達,空白對照組與損傷對照組角膜上皮中dectin-1、TLR4受體表達差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=1.325,P=0.288;F=0.455,P=0.768),真菌實驗組角膜上皮中dectin-1和TLR4受體的表達較空白對照組升高(F=74.679,P=0.000;F=30.225,P=

5、0.000)。真菌實驗組角膜上皮中dectin-1受體mRNA的表達在刺激8h后開始升高(P=0.000),蛋白表達在刺激24h后升高(t=27.983,P=0.000);TLR4受體mRNA表達在刺激4h后開始升高(P=0.001),蛋白表達在刺激24小時后升高(t=30.650,P=0.000)。
　　 結(jié)論:Dectin-1受體在正常人及真菌性角膜炎患者的角膜上皮中表達。Dectin-1受體在大鼠正常角膜上皮中表達,煙曲霉