MIP-2在棘阿米巴性角膜炎中的表達(dá).pdf

1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文MIP2在棘阿米巴性角膜炎中的表達(dá)姓名：車成業(yè)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)（角膜病、白內(nèi)障）指導(dǎo)教師：趙桂秋20080601青島人學(xué)碩：Ij學(xué)位論文MIP2在棘阿米巴性角膜炎中的表達(dá)中文摘要目的：建立有效的棘阿米巴角膜炎動(dòng)物模型，檢測(cè)棘阿米巴角膜炎中巨噬細(xì)胞炎癥蛋白一2(MIP一2)的表達(dá)并探討MIP一2在棘阿米巴角膜炎發(fā)病機(jī)制中的作用，觀察干擾MIP2對(duì)棘阿米巴角膜炎的影響。方法：l、健康加卡利亞倉(cāng)鼠80只隨機(jī)分

2、為4組，每組20只。刮除倉(cāng)鼠右眼角膜中央?yún)^(qū)50％的二皮，對(duì)照組覆蓋無(wú)菌角膜接觸鏡并滴入PBS液，接觸鏡組覆蓋有阿米巴黏附的接觸鏡并滴入PBS液，懸液組覆蓋無(wú)菌角膜接觸鏡并滴入阿米巴懸液，混合組覆蓋有阿米巴黏附的接觸鏡并滴入阿米巴懸液，在模型建立48、72小時(shí)后進(jìn)行研究觀察。2、健康加卡利亞倉(cāng)鼠80只隨機(jī)分為4組，每組20只。空白對(duì)照組不予任何處理；條件對(duì)照組刮除倉(cāng)鼠右眼角膜中央?yún)^(qū)50％的上皮，覆蓋無(wú)菌角膜接觸鏡并滴入PBS液；實(shí)驗(yàn)一、二

3、組刮除右眼上皮后覆蓋有阿米巴黏附的接觸鏡并滴入阿米巴懸液。分別于接種后1d、2d、3d、5d、7d用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)方法(RT—PCR)檢測(cè)各組中MIP一2的表達(dá)(空白對(duì)照組、條件對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)一組取右眼角膜，實(shí)驗(yàn)二組取左眼角膜)，并對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)角膜組織行HE染色及光鏡觀察。3、健康加卡利亞倉(cāng)鼠80只隨機(jī)分為4組，每組20只。刮除所有倉(cāng)鼠右眼角膜中央?yún)^(qū)50％的上皮，覆蓋有阿米巴黏附的接觸鏡并滴入阿米巴懸液?？瞻讓?duì)照組不予任何處理；

4、條件對(duì)照組在模型制成48小時(shí)角膜內(nèi)注射PBS液；實(shí)驗(yàn)一組注射TNFa；實(shí)驗(yàn)二組注射rMIP一2。分別于接種后3d、5d、7d、12d、18d用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測(cè)各組中l(wèi)IlIP一2的表達(dá)，并對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)角膜組織行HE染色及光鏡觀察。結(jié)果：l、混合組方法能成功地建立穩(wěn)定的加卡利亞倉(cāng)鼠棘阿米巴角膜炎動(dòng)物模型，并經(jīng)角膜刮片用10％氫氧化鉀封片鏡檢、角膜組織原蟲(chóng)培養(yǎng)和病理切片染色檢查證實(shí)。2、空白對(duì)照組、條件對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)二組各個(gè)觀