核醫(yī)學(xué)放射自顯影術(shù)arg

1、一、發(fā)展史 1867年 Nieple de st victer發(fā)展鈾鹽能使膠片感光，但引出錯(cuò)誤的結(jié)論 1896年 H.Becqueral證實(shí)上述是輻射引起。 1898年 Bq.和居里夫婦 發(fā)現(xiàn)210po，226Ra 1924年 Lacassagae 首次研究鈾在生物體內(nèi)分布 1939—1945 各種記錄粒子徑跡的專用乳膠 1946年 Belanger和lebland—更好

2、的液體乳膠，ARG分辨力大為提高。 1950年 Pelc揭膜乳膠 1956年超微結(jié)構(gòu)及電鏡ARG,ARG的特點(diǎn)：定位準(zhǔn)確 敏感度高 可定量測(cè)量，還可做形態(tài)定量分析 不需復(fù)雜設(shè)備，應(yīng)用廣泛。,ARG的一般過(guò)程： 引入示蹤劑→制備標(biāo)本→制備ARG→曝光→照像處理→標(biāo)本染色→分析,二、感光材料,組成：銀鹽+明膠：分類： 原子核乳膠：核乳膠，干板

3、，揭膜 氚片 X片 電影正片及幻燈片,各類材料的性質(zhì)和應(yīng)用1、乳膠及制品a、液體核乳膠：粘稠、10℃以下呈膠凍狀， 40℃溫溶，極限50℃，出廠本底3個(gè)銀粒 /1000μm應(yīng)用：核4——所有帶電粒子 核2——a粒子 HW3—4——電鏡ARGb、干板：宏觀及光鏡ARGc、揭膜乳膠

4、：光鏡定量ARG,d、國(guó)外產(chǎn)品： 美 Eastman—Kodak NTE 英 Kodak 英 Ilford L-4 比利時(shí) Gevaert Nuc-307 銀粒 0.07-0.4 Exp-6M 按敏感度分為： 0型：a粒子 2型：3H, 125I 5型：用于低電離作用的β粒子徑跡ARG,2、電影正片

5、 or 幻燈片： 粒徑1μm，單面涂乳膠，厚15μm，外加保護(hù)層，除3H以外的各種核素宏觀ARG3、X 光片：粒徑2.5μm，敏感性強(qiáng)，但分辨力低，宏觀ARG，低能核素不適應(yīng)。4、氚片：進(jìn)口 LKB產(chǎn)品，國(guó)產(chǎn)也有了，粒徑1μm，暗室安全光相當(dāng)耐受，宏觀3H ARG5、彩色乳膠片干板：彩顯ARG,三、ARG原理,原理：造成核乳膠的點(diǎn)陣發(fā)生缺陷（形狀不一、顆粒不完整、缺一個(gè)或一對(duì)離子等）也叫“敏化中心”。,當(dāng)射

6、線作用乳膠時(shí)，電離的電子向“敏化中心”移動(dòng)，……..較多時(shí)或形成靜電膜，吸引Ag+移動(dòng)。雖量少1/100億，但有巨大催化作用，能使溴化銀結(jié)晶還原成金屬銀粒。當(dāng)顯影時(shí)兩者被顯出的速度不同，很容易區(qū)分。,1、潛影形成：2、潛影消退：3、顯影及顯影劑： 最常用的顯影劑： D-196和D-19 1）米吐?tīng)枺蛩峒谆鶎?duì)氨基苯酸）主份，強(qiáng)還原劑2）亞硫酸鈉：保護(hù)劑，能中和還原劑的氧化物，延長(zhǎng)顯影效力，還可溶解部分銀粒，減少

7、其相互結(jié)合而導(dǎo)致粒變粗 3）海德?tīng)枺ㄒ员蕉樱簭?qiáng)還原劑，但與米吐?tīng)柌煌?。但與米吐?tīng)柌煌?。它還原力低，影像出現(xiàn)緩慢，可使影像密度增加,4）碳酸鈉：促進(jìn)劑，增加顯影5）溴化鉀：抑制劑，抑制未感光的銀鹽，防止溴折出而增加灰霧，從而增加顯象的反差，使力象更清晰影響顯影的因素：（1）顯影時(shí)間（2）顯影溫度（3）顯影液的攪動(dòng)（4）顯影液的效力,4、定影：海波（硫代硫酸鈉）溶去未形成潛影的銀晶體亞硫酸鈉：保護(hù)

8、劑，能與酸形成亞硫酸氫根離子，從而抑制海波被酸分解。醋酸：停顯劑：終止顯影液繼續(xù)使用。鉀礬：堅(jiān)膜劑，防止乳膠在定影和水洗過(guò)程中因膨脹而造成脫落，防止操作中的擦傷or劃痕。5、水洗及干燥：洗去雜質(zhì)等，防止析出硫磺，它與空氣中水份氧化為硫酸，影象變黃。干燥：人工電吹風(fēng)，or自然干燥，防空氣灰法沾染。,四、射線與乳膠的相互作用1、α粒子：質(zhì)量大，高LET，穿透力弱，但電離密度大，直線傳播，粒子徑跡粗短而致密，不需靈敏度高的乳膠2

9、、β粒子：質(zhì)量輕，射程較α粒子長(zhǎng)些，穿行路徑易改變，不一定是直線傳播，徑跡為不規(guī)則曲線，射程僅為乳膠表面的幾個(gè)顆粒層。3、γ射線：是一種電磁輻射，本身不帶電，不會(huì)引起電離，但它能與核or核外電子碰撞損失能量而產(chǎn)生次級(jí)帶電粒子；它穿透力強(qiáng)，在靶物質(zhì)中損失的能量少，故很難留下清晰的徑跡，但對(duì)低能γ線可形成小點(diǎn)狀徑跡。它產(chǎn)生的次級(jí)帶電離子常使乳膠本底增加。,4、EC、IT：在電子俘獲和內(nèi)轉(zhuǎn)換的衰變中產(chǎn)生的γ、X線不被乳膠記錄，但俄歇電子和內(nèi)

10、轉(zhuǎn)換電子與β粒子的性質(zhì)相同，可使乳膠感光。純?chǔ)滤プ兊暮怂兀?H、14C、45Ca、35S、32P βr——：131I EC——：125I IT——：99mTc 徑跡ARG：乳膠厚度超過(guò)射線粒子的射程，記錄到的是粒子的全部徑跡，物理學(xué)研究范疇。 銀粒密度ARG：薄的乳膠層，只要求留下徑跡超始部分的銀粒。ARG常用核素，能量及射程P270表

11、14—6（參考書(shū) 夏宗勤主編實(shí)驗(yàn)核醫(yī)學(xué)與核藥學(xué)）,五、ARG的分辨力、效率、本底及示蹤1、分辨力：定義，區(qū)別示蹤物在組織中準(zhǔn)確位置的能力。 區(qū)分兩個(gè)鄰近結(jié)構(gòu)（放射源）表示方法：半距離HD 半半徑 HR 它是反映影象散射情況的常用指標(biāo)。應(yīng)注意：HD、HR指反映顆粒的散射情況，并不說(shuō)明ARG所能分辨的最小距離或源的大小。HD、HR越小，分辨力越高3H 光鏡ARG HD在0.3——0.4μm

12、 電鏡ARG HD在80——180nm,影響分辨力的因素：a、銀粒的大小b、乳膠厚度c、標(biāo)本與乳膠間距d、射線能量e、曝光時(shí)間f、顯影時(shí)間g、標(biāo)本厚度h、本底,2、效率：定義：曝光t內(nèi)，示蹤劑每100次衰變所造成的顯影銀顆粒數(shù)目。 表示方法：百分比/100μm2 影響效率的因素a、LET

13、 f、 曝光時(shí)間b、標(biāo)本厚度 g、 源乳距c、乳膠厚度 h、顯影條件d、 銀粒大小 i、曝光時(shí)間太長(zhǎng)時(shí)e、乳膠敏感度,3、本底：沒(méi)有放射性時(shí)的銀顆粒本底增高的因素：a、紅燈過(guò)亮b、外環(huán)境輻射c、顯影時(shí)間過(guò)長(zhǎng)d、乳膠受到壓力或張力的作用e、標(biāo)本中有還原物f、乳膠保存過(guò)久,4、示蹤劑用量與曝光時(shí)間 一般原則：輻射強(qiáng)時(shí)，曝光時(shí)間可縮短，而射線弱時(shí)，

14、曝光時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)。影響因素：a、核素的性質(zhì)b、核素引入的途徑c、示蹤劑劑型d、核素在體內(nèi)的分布和蓄積狀況e、標(biāo)本制備時(shí)間長(zhǎng)時(shí)，核素易丟失f、 感光材料的靈敏度目前最常用的是：實(shí)驗(yàn)確定曝光法。,六、ARG的各種方法,1、宏觀ARG： 接觸法：適于磨片，動(dòng)物整體切片植物片2、光鏡ARG：用于非擴(kuò)散性示蹤劑（石蠟切片） 浸膜法：從乳膠中提出來(lái) 裱貼法：在溫水中撈起標(biāo)本和干板 揭膜

15、乳膠法：在溫水中撈起標(biāo)本和揭膜 用于擴(kuò)散性示蹤劑（冰凍切片）： 融表法：冷沾取切片 絞鏈接觸法：復(fù)雜,3、電鏡ARG：亞細(xì)胞水平，分辨力極高，要求標(biāo)本和乳膠層極薄，Ilford L4或HW—4乳膠常用，顆粒φ140nm，示蹤劑用量是光鏡的10倍。 ①浸膜法： ②金屬環(huán)法：4、細(xì)胞涂片ARG： a、血涂片ARG b、骨髓涂

16、片ARG,ARG圖像閱讀分析,圖像中銀粒沉著處，反映標(biāo)本中核素的存在部位，也表示標(biāo)記物定位。一、宏觀ARG：可直接看or放大鏡，黑度表示放素所在部位，越黑說(shuō)明放射性越強(qiáng)，含某物標(biāo)記物越多，如要精確定位，必須與原標(biāo)本重合在一起觀察。二、微觀ARG：a、銀粒與組織結(jié)構(gòu)的關(guān)系用微調(diào)來(lái)確定。b、銀粒與其它顆粒的區(qū)別，用改變焦點(diǎn)來(lái)觀察它們的大小，顏色和外形。c、 區(qū)別標(biāo)本內(nèi)與標(biāo)本外乳膠中的銀粒d、定量以銀粒計(jì)數(shù)表示。,定量分析法：預(yù)先

17、制作一套已知活度梯度的放射源標(biāo)準(zhǔn)系列片，與待測(cè)標(biāo)本在同一張乳膠上曝，顯，定。圖像用黑度計(jì)or光密度計(jì)讀數(shù)，以標(biāo)準(zhǔn)梯度活度為縱坐標(biāo)，光密度值為橫坐標(biāo)，繪一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可定量。 還有如下定量法： 視測(cè)顆粒計(jì)數(shù)：顆粒數(shù)/cm 顯微光度計(jì)測(cè)定： 電視掃描裝置（三）亞微觀ARG：電鏡ARG，它圖象中銀粒呈扭曲的絲團(tuán)狀，故易辨認(rèn)。,八、熒光增敏微觀ARG

18、適于顯影不太清楚or放射性較弱的組織AGR。特點(diǎn)：在乳膠中加入了閃爍劑。九、雙標(biāo)記ARG當(dāng)需要研究機(jī)體同時(shí)攝入的多種放素?fù)饺爰?xì)胞的區(qū)別時(shí)，必須用雙標(biāo)記。依據(jù)：選用兩種不同的輻射類型不同能量不同半衰期不同分布定位,①選用α、β輻射體，α粒子密度大，呈直線形徑跡，β密度小，單個(gè)銀顆粒。②能量不同：兩次涂乳膠法得到ARG影像加以區(qū)別。 3H、14C 第一次乳膠，反映3H、14C之和第二次乳膠