關于殼寡糖對鐵皮石斛原球莖生長及多糖含量的影響的畢業(yè)論文

1、1殼寡糖對鐵皮石斛原球莖生長及多糖含量的影響殼寡糖對鐵皮石斛原球莖生長及多糖含量的影響生物與化學工程系生物與化學工程系生物技術(shù)專業(yè)生物技術(shù)專業(yè)學號學號指導教師指導教師【摘要】以鐵皮石斛原球莖為原材料，通過在含不同濃度殼寡糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，研究殼寡糖對鐵皮石斛的以鐵皮石斛原球莖為原材料，通過在含不同濃度殼寡糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，研究殼寡糖對鐵皮石斛的原球莖增殖及其多糖含量的影響。結(jié)果表明在較低的殼寡糖濃度下，殼寡糖促進鐵皮石斛多糖的含量的

2、積累，則高濃原球莖增殖及其多糖含量的影響。結(jié)果表明在較低的殼寡糖濃度下，殼寡糖促進鐵皮石斛多糖的含量的積累，則高濃度則抑制其多糖的增加。實驗中，鐵皮石斛的生長量隨著殼寡糖濃度的升高而減少，在度則抑制其多糖的增加。實驗中，鐵皮石斛的生長量隨著殼寡糖濃度的升高而減少，在0.1mgL0.1mgL的殼寡糖濃度下，其的殼寡糖濃度下，其多糖含量最高達多糖含量最高達30.84%30.84%，超過，超過0.1mgL0.1mgL則多糖含量減少。則多糖含量

3、減少?！娟P鍵詞關鍵詞】鐵皮石斛；原球莖；殼寡糖；苯酚鐵皮石斛；原球莖；殼寡糖；苯酚硫酸法；多糖含量硫酸法；多糖含量鐵皮石斛DendrobiumcidumWall.exLindl為蘭科石斛屬植物，具有滋陰清熱、生津益胃、潤肺止咳等功能，用于陰傷津虧，口干煩渴，食少干嘔，病后虛熱，目暗不明，是我國重要的出口藥材之一。鐵皮石斛主要成份是多糖，還含有少量的單糖，生物堿，氨基酸，酚類，揮發(fā)油等[12]。由于目前資源，價格昂貴，有許多的人已經(jīng)開始了

4、人工繁殖。歷史上，已經(jīng)有許多人對鐵皮石斛多糖含量進行過測定，如黃民權(quán)從愈傷組織中提取多糖[3]。鐵皮石斛有三種多糖，它們?yōu)橐活怬一乙酰葡萄甘露聚糖鐵皮石斛多糖的藥理作用廣泛，主要有增強免疫力、抗腫瘤、降血糖等作用[4]。殼寡糖用大、生物活性高的低分子量產(chǎn)品，較殼聚糖具有更高的溶解度、更容易被生物體吸收等功能[5]。殼寡糖可作為植物生長調(diào)節(jié)劑，增強植物對病蟲害的防御能力[6]，促進次生代謝產(chǎn)物的積累具有殺菌菌活性（抗菌、抑菌）[7]，提高

5、殺蟲活性與趨避活性[8]等。本研究主要探討在鐵皮石斛原球莖組培過程中殼寡糖對原球莖生長以及多糖含量的影響，為石斛生物制藥生產(chǎn)和積累次生代謝產(chǎn)物的配方優(yōu)化提供依據(jù)。1材料與儀器1.1材料鐵皮石斛原球莖：由組培室提供培養(yǎng)；殼寡糖：購于浙江金殼生物化學有限公司，產(chǎn)品批號為D120510097，分子量為100萬；6BA、NAA：國藥集團化學試劑有限公司；石油醚、無水乙醇、丙酮、乙醇（95％、80％）、0.1％活性炭、苯酚、鋁片、NaHCO3、葡

6、萄糖、濃硫酸1.2儀器無菌培養(yǎng)室，超凈工作臺，高壓滅菌鍋，培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)皿，解剖刀及鑷子，濾紙，容量瓶，移液管，燒杯，量筒，電子天平，剪刀，棉線，報紙、索式提取器、蒸餾裝置(蒸餾瓶、溫度計、冷凝管、接收器）、容量瓶、移液管、漏斗、濾紙、水浴鍋；紫外可見分光光度計：福州精科儀器公司（日本島津）UV17502、方法2.1鐵皮石斛的培養(yǎng)接種前，先將培養(yǎng)瓶稱重，記錄其重量。后將鐵皮石斛原球莖分別接入含不同濃度殼寡糖的培養(yǎng)基中（表1），每個培養(yǎng)基接

7、3~4個小原球莖，接20瓶。接種后，將培養(yǎng)瓶再次稱量，算出接入鐵皮石斛的接種量。40天后，取出鐵皮石斛再次稱量，比較不同濃度的殼寡糖對鐵皮石斛原球莖生長的影響。3多糖含量％=（Cs.D.fw）100式中Cs為供試品溶液葡萄糖濃度(mg／mL)，D為供試品溶液的稀釋因素，f為換算因素，w為供試品重量(mg)。3結(jié)果與分析3.1不同濃度殼寡糖對鐵皮石斛生長的影響表2不同濃度殼寡糖對中鐵皮石斛生長的影響編號殼寡糖濃度(mgL)平均增長倍數(shù)健壯

8、度顏色增殖效果1234500.11.0101006.1247B6.7010A5.9324C2.3197D2.1479E深綠伴淺綠深綠伴淺綠淺綠淺綠淺綠注：“”表明程度。培養(yǎng)40天后，測定其增長倍數(shù)，用LSD法測定定差異顯著性（p=0.05）。字母相同者表示差異不顯著，字母不相同者差異顯著，以下表格相同。經(jīng)表1中不同濃度殼寡糖培養(yǎng)的鐵皮石斛，如下圖所示：圖1殼寡糖濃度由小到大所對應的鐵皮石斛的生長情況由以上數(shù)據(jù)可得，隨著殼寡糖少量的加入，