氟鈴脲降解菌的分離鑒定、降解特性及降解氟鈴脲的酰胺酶基因(amiH)的克隆和表達(dá).pdf

1、氟鈴脲是美國(guó)陶氏益農(nóng)公司1987年開發(fā)生產(chǎn)的一種高效、廣譜、低毒的苯甲酰脲類殺蟲劑，幾丁質(zhì)合成抑制劑，通過抑制幾丁質(zhì)的合成殺死害蟲。它是國(guó)家石化局和農(nóng)業(yè)部制定的中國(guó)農(nóng)藥工業(yè)“十五”發(fā)展規(guī)劃要求中的高毒有機(jī)磷農(nóng)藥的替代品種之一。被廣泛用于蔬菜、棉花和果樹的害蟲防治，及真菌引起的植物病害。但是氟鈴脲在作物上的不正確使用也會(huì)引起藥害、對(duì)魚類和家蠶毒性大。
　　 目前的研究主要集中在氟鈴脲的藥效、殺蟲效果、農(nóng)藥殘留與毒性，以及在土壤中的

2、降解動(dòng)態(tài)。對(duì)于分離到的純種微生物對(duì)氟鈴脲的降解鮮有報(bào)道，沒有對(duì)其代謝途徑與酶進(jìn)行研究。
　　 從農(nóng)藥廠廢水處理池的活性污泥中分離到1株能降解氟鈴脲的菌株，命名為FLN-7，GenBank序列號(hào)為(EU725799)。根據(jù)表型特征、生理生化特性及16S rRNA序列同源性分析，將FLN-7歸類為副球菌屬(Paracoccus sp.)，研究結(jié)果表明該菌能在含氟鈴脲(50 mg·L-1)的基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基中降解氟鈴脲，7d降解率達(dá)8

3、9％。研究了它的生長(zhǎng)特性、對(duì)氟鈴脲的降解特性。通過高效液相色譜與質(zhì)譜推斷出氟鈴脲在Paracoccus sp.FLN-7體內(nèi)代謝過程的起始反應(yīng)是斷裂其結(jié)構(gòu)核心的一個(gè)酰胺鍵。
　　 通過構(gòu)建基因組DNA文庫(kù)，成功地從氟鈴脲降解菌株P(guān)aracoccus sp.FLN-7中克隆到一個(gè)酰胺酶基因，命名為amiH。該基因含1395個(gè)堿基，編碼465個(gè)氨基酸，G+Cmol％含量為67.81％，通過Omiga分析AmiH是分子量為49.6kD