蛋白質(zhì)濃度測(cè)定——考馬斯亮藍(lán)染色法(實(shí)驗(yàn)報(bào)告)

1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告——蛋白質(zhì)濃度測(cè)定:考馬斯亮藍(lán)染色法1蛋白質(zhì)濃度測(cè)定蛋白質(zhì)濃度測(cè)定——考馬斯亮藍(lán)染色法考馬斯亮藍(lán)染色法（實(shí)驗(yàn)報(bào)告）（實(shí)驗(yàn)報(bào)告）實(shí)驗(yàn)日期：2015年4月28日實(shí)驗(yàn)溫度：室溫實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)：生物化學(xué)與遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室指導(dǎo)老師：班級(jí)：2013級(jí)生物技術(shù)1班姓名：學(xué)號(hào)：I.實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的原理和方法；2.熟悉蛋白質(zhì)含量測(cè)定的影響因素。II.實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理考馬斯亮藍(lán)是根據(jù)蛋白質(zhì)與染料相結(jié)合的原理設(shè)計(jì)的，

2、這是一種迅速、可靠的通過(guò)染色法測(cè)定溶液中蛋白質(zhì)濃度的方法?？捡R斯亮藍(lán)G250在酸性游離狀態(tài)下呈棕紅色，最大吸收波長(zhǎng)465nm，與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)樗{(lán)色，最大吸收波長(zhǎng)595nm，在一定的蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)吸光度與蛋白質(zhì)含量成正比。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G250結(jié)合，反應(yīng)2min即可到達(dá)平衡，復(fù)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。蛋白質(zhì)—考馬斯亮藍(lán)G250復(fù)合物吸光系數(shù)，使得在測(cè)定蛋白質(zhì)濃度時(shí)靈敏度很高，可測(cè)微克級(jí)蛋白質(zhì)含量。III.實(shí)驗(yàn)試劑與儀器實(shí)驗(yàn)試劑

3、與儀器1.實(shí)驗(yàn)試劑生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告——蛋白質(zhì)濃度測(cè)定:考馬斯亮藍(lán)染色法3標(biāo)準(zhǔn)蛋白μg數(shù)020406080100A59500.5170.8050.9411.1571.1921.4651.4402.樣品測(cè)定中試管2支分別加未知濃度蛋白質(zhì)（或人正常血漿）0.4mL，各加5.0mL考馬斯亮藍(lán)試劑搖勻，室溫放置5min，以“0”號(hào)管為空白比色，以所測(cè)A595于標(biāo)準(zhǔn)曲線查蛋白質(zhì)含量。V.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析結(jié)果分析：實(shí)驗(yàn)未能達(dá)到預(yù)期的一條直線，