組織學(xué)與胚胎學(xué)-緒論

1、,“將知識(shí)裝進(jìn)大腦，將垃圾打包帶走”,組織學(xué)與胚胎學(xué),基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院形態(tài)學(xué)教研室 程艷華,Histology and Embryology,,,第1章 緒 論,重點(diǎn)：組織學(xué)的定義 人體的基本組織 石蠟切片術(shù) HE染色,考試模式,實(shí)驗(yàn)考試：20分 期中考試：20分 100分期末考試：60分,,第1章 緒 論,一、組織學(xué)研究?jī)?nèi)容

2、組織學(xué)（histology）： ----研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué),機(jī)體—細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)方法—利用顯微鏡觀察組織切片,,構(gòu)成人體的基本組織有四大類(lèi),上皮組織,神經(jīng)組織,肌組織,結(jié)締組織,器官是由不同的組織發(fā)育分化而成,上皮組織,肌組織,結(jié)締組織,神經(jīng)組織,研究?jī)?nèi)容,細(xì) 胞,細(xì)胞膜,細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞核,,線粒體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體高爾基復(fù)合體溶酶體微體中心體細(xì)胞骨架,糖元脂滴色素,常染色質(zhì)異染色質(zhì),核

3、膜-核孔核仁核基質(zhì)染色質(zhì),細(xì)胞器細(xì)胞基質(zhì)包涵物,,,,,,核被膜染色質(zhì)核 仁核基質(zhì),,細(xì) 胞 核,,,核外膜 核周隙核內(nèi)膜核孔核質(zhì)側(cè)—核纖層（支架）,,,,核液核骨架,細(xì)絲顆粒相隨染色質(zhì),常染色質(zhì)—功能活躍異染色質(zhì)—功能靜止,遺傳物質(zhì)DNA和組蛋白在細(xì)胞間期的形態(tài),,胚胎學(xué)（ Embryology）是研究生物個(gè)體發(fā)生、發(fā)

4、育、發(fā)展及其機(jī)理的科學(xué)。,,,,二、組織學(xué)常用研究技術(shù),（一）一般光學(xué)顯微鏡技術(shù)（簡(jiǎn)稱(chēng)光鏡 light microscopy, LM ） 分辨率為0.2 µ m 可將組織放大1500倍左右。,顯微鏡的構(gòu)造,目鏡,物鏡,載物臺(tái),粗細(xì)調(diào)節(jié)螺旋,光源,聚光器,鏡臂,鏡座,,顯微鏡鏡下觀察組織，必須制作成組織標(biāo)本,石蠟切片：取材?固定?脫水透明?浸蠟包埋?切片? 染色? 封片,最常用的染色方法是：蘇木精-伊

5、紅染色（ HE染色）,蘇木精（hematoxylin)： 堿性染料，能將細(xì)胞核染成藍(lán)紫色。 伊紅(eosin)： 酸性染料，能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色。,組織結(jié)構(gòu)的嗜色性,嗜堿性：對(duì)于堿性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì)。 可被蘇木精染成藍(lán)紫色。嗜酸性：對(duì)于酸性染料親和力強(qiáng)的性質(zhì)。 可被伊紅染成紅色。中 性：對(duì)于兩種燃料親和力

6、 都不強(qiáng)的性質(zhì)。 HE染色著色淡。,HE染色,★其他染色：,硝酸銀染色：組織經(jīng)硝酸銀處理，呈棕黑色，主要用于神經(jīng)組織和內(nèi)分泌細(xì)胞研究重鉻酸鹽染色法,異染性 ： 肥大細(xì)胞中的顆粒經(jīng)甲苯胺藍(lán)等藍(lán)色染料染色 后，呈紫紅色，稱(chēng)為異染性。,其他常用的制片方法 冰凍切片涂片、鋪片 磨片其它光學(xué)顯微鏡技術(shù):熒光顯微鏡相差顯微鏡暗視野顯微鏡激光掃描共聚焦顯微鏡,,

7、（二）電鏡技術(shù)（electron microscope EM，簡(jiǎn)稱(chēng)電鏡 ） 以電子束代替光源，以磁場(chǎng)代替透鏡，進(jìn)行聚集和放大，最后將物體的影象投射到熒光屏或照相底片上。 分辨率為0.2nm 可將物體放大幾千到幾十萬(wàn)倍。,透射電鏡術(shù) （transmission electron microscopy, TEM） 觀察組織細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡術(shù) （sc

8、anning electron microscopy, SEM） 觀察組織細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu)冰凍蝕刻 （freeze etching method） 觀察細(xì)胞斷裂表面的形態(tài)結(jié)構(gòu)分析電鏡 X-射線顯微分析術(shù)（analytical electron micro-scope）

9、 研究細(xì)胞、組織內(nèi)元素種類(lèi)分布和含量,TEM，漿細(xì)胞,SEM ，纖毛,SEM ，微絨毛,1.電子密度高（electron dense） 電子束投射到密度大的樣品，電子散射多，投射到熒光屏上的電子少而呈暗像，電鏡照片上則呈黑色，稱(chēng)電子密度高。2.電子密度低（electron lucent） 反之，稱(chēng)電子密度低。,透射電子顯微鏡,（三）、組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù),

10、☆糖類(lèi)顯示法——PAS反應(yīng)：過(guò)碘酸—Schiff反應(yīng)，簡(jiǎn)稱(chēng)PAS反應(yīng)（periodic acid Schiff reaction） 檢測(cè)組織活細(xì)胞中有無(wú)多糖存在。原理： ☆酶類(lèi)顯示法 ☆脂類(lèi)顯示法 ☆核酸顯示法,PAS反應(yīng)，小腸上皮杯狀細(xì)胞的粘原顆粒,,,（四）、免疫組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù) 利用抗原（antigen, Ag），抗體（antibody）特異

11、 結(jié)合的原理，用已知抗體檢測(cè)未知抗原的一種方法。,,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記,熒光素標(biāo)記,（五）、原位雜交技術(shù)（in situ hybridization）,特異性核酸組織化學(xué)術(shù)檢測(cè)基因（DNA片段）的有無(wú)、及在轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)基因的活性(mRNA)。原理：用帶標(biāo)記物的已知堿基順序的核酸探針與細(xì)胞內(nèi)待測(cè)核酸按堿基配對(duì)原則進(jìn)行特異性原位結(jié)合（雜交），并通過(guò)對(duì)標(biāo)記物的顯示而獲知待測(cè)核酸的有無(wú)及相對(duì)量常用標(biāo)記物有放射性核素和地高辛,（六）、細(xì)胞

12、培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)中的組織工程耳,（七）、共焦激光掃描顯微鏡（八） 、放射自顯影術(shù)（autoradiography）（九） 、圖像分析術(shù)（image analysis）: 又稱(chēng)體視學(xué)（十） 、組織工程術(shù)（tissue engineering）,三、組織胚胎學(xué)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中的地位,組織學(xué)=顯微解剖學(xué) ? 大體 to 微細(xì)不同組織的功能 ? 生理學(xué)（physiology）正常與異常 ? 病理學(xué)(pat

13、hology)臨床課的基礎(chǔ)For a good doctor needed in future,四、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法,1.盡可能多地觀察切片、插圖、圖譜、網(wǎng)上圖庫(kù)等。注意觀察角度、倍率、染色方法 2.深入思考，注意三個(gè)關(guān)系 平面與立體 多角度直觀與合理想象 靜態(tài)與動(dòng)態(tài) 隨機(jī)能狀態(tài)而變化 結(jié)構(gòu)與功能 辯證統(tǒng)一3.綜合與比較（ 善于總結(jié)，掌握規(guī)律）,注意平面與立體的關(guān)系,,,1