組織學與胚胎學-緒論

1、,“將知識裝進大腦，將垃圾打包帶走”,組織學與胚胎學,基礎醫(yī)學院形態(tài)學教研室 程艷華,Histology and Embryology,,,第1章 緒 論,重點：組織學的定義 人體的基本組織 石蠟切片術 HE染色,考試模式,實驗考試：20分 期中考試：20分 100分期末考試：60分,,第1章 緒 論,一、組織學研究內(nèi)容

2、組織學（histology）： ----研究機體微細結構及其相關功能的科學,機體—細胞、組織、器官、系統(tǒng)方法—利用顯微鏡觀察組織切片,,構成人體的基本組織有四大類,上皮組織,神經(jīng)組織,肌組織,結締組織,器官是由不同的組織發(fā)育分化而成,上皮組織,肌組織,結締組織,神經(jīng)組織,研究內(nèi)容,細 胞,細胞膜,細胞質(zhì),細胞核,,線粒體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體高爾基復合體溶酶體微體中心體細胞骨架,糖元脂滴色素,常染色質(zhì)異染色質(zhì),核

3、膜-核孔核仁核基質(zhì)染色質(zhì),細胞器細胞基質(zhì)包涵物,,,,,,核被膜染色質(zhì)核 仁核基質(zhì),,細 胞 核,,,核外膜 核周隙核內(nèi)膜核孔核質(zhì)側(cè)—核纖層（支架）,,,,核液核骨架,細絲顆粒相隨染色質(zhì),常染色質(zhì)—功能活躍異染色質(zhì)—功能靜止,遺傳物質(zhì)DNA和組蛋白在細胞間期的形態(tài),,胚胎學（ Embryology）是研究生物個體發(fā)生、發(fā)

4、育、發(fā)展及其機理的科學。,,,,二、組織學常用研究技術,（一）一般光學顯微鏡技術（簡稱光鏡 light microscopy, LM ） 分辨率為0.2 µ m 可將組織放大1500倍左右。,顯微鏡的構造,目鏡,物鏡,載物臺,粗細調(diào)節(jié)螺旋,光源,聚光器,鏡臂,鏡座,,顯微鏡鏡下觀察組織，必須制作成組織標本,石蠟切片：取材?固定?脫水透明?浸蠟包埋?切片? 染色? 封片,最常用的染色方法是：蘇木精-伊

5、紅染色（ HE染色）,蘇木精（hematoxylin)： 堿性染料，能將細胞核染成藍紫色。 伊紅(eosin)： 酸性染料，能將細胞質(zhì)染成紅色。,組織結構的嗜色性,嗜堿性：對于堿性染料親和力強的性質(zhì)。 可被蘇木精染成藍紫色。嗜酸性：對于酸性染料親和力強的性質(zhì)。 可被伊紅染成紅色。中 性：對于兩種燃料親和力

6、 都不強的性質(zhì)。 HE染色著色淡。,HE染色,★其他染色：,硝酸銀染色：組織經(jīng)硝酸銀處理，呈棕黑色，主要用于神經(jīng)組織和內(nèi)分泌細胞研究重鉻酸鹽染色法,異染性 ： 肥大細胞中的顆粒經(jīng)甲苯胺藍等藍色染料染色 后，呈紫紅色，稱為異染性。,其他常用的制片方法 冰凍切片涂片、鋪片 磨片其它光學顯微鏡技術:熒光顯微鏡相差顯微鏡暗視野顯微鏡激光掃描共聚焦顯微鏡,,

7、（二）電鏡技術（electron microscope EM，簡稱電鏡 ） 以電子束代替光源，以磁場代替透鏡，進行聚集和放大，最后將物體的影象投射到熒光屏或照相底片上。 分辨率為0.2nm 可將物體放大幾千到幾十萬倍。,透射電鏡術 （transmission electron microscopy, TEM） 觀察組織細胞的內(nèi)部結構掃描電鏡術 （sc

8、anning electron microscopy, SEM） 觀察組織細胞表面的立體結構冰凍蝕刻 （freeze etching method） 觀察細胞斷裂表面的形態(tài)結構分析電鏡 X-射線顯微分析術（analytical electron micro-scope）

9、 研究細胞、組織內(nèi)元素種類分布和含量,TEM，漿細胞,SEM ，纖毛,SEM ，微絨毛,1.電子密度高（electron dense） 電子束投射到密度大的樣品，電子散射多，投射到熒光屏上的電子少而呈暗像，電鏡照片上則呈黑色，稱電子密度高。2.電子密度低（electron lucent） 反之，稱電子密度低。,透射電子顯微鏡,（三）、組織化學和細胞化學技術,

10、☆糖類顯示法——PAS反應：過碘酸—Schiff反應，簡稱PAS反應（periodic acid Schiff reaction） 檢測組織活細胞中有無多糖存在。原理： ☆酶類顯示法 ☆脂類顯示法 ☆核酸顯示法,PAS反應，小腸上皮杯狀細胞的粘原顆粒,,,（四）、免疫組織化學和細胞化學技術 利用抗原（antigen, Ag），抗體（antibody）特異

11、 結合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。,,辣根過氧化物酶標記,熒光素標記,（五）、原位雜交技術（in situ hybridization）,特異性核酸組織化學術檢測基因（DNA片段）的有無、及在轉(zhuǎn)錄水平檢測基因的活性(mRNA)。原理：用帶標記物的已知堿基順序的核酸探針與細胞內(nèi)待測核酸按堿基配對原則進行特異性原位結合（雜交），并通過對標記物的顯示而獲知待測核酸的有無及相對量常用標記物有放射性核素和地高辛,（六）、細胞

12、培養(yǎng),實驗中的組織工程耳,（七）、共焦激光掃描顯微鏡（八） 、放射自顯影術（autoradiography）（九） 、圖像分析術（image analysis）: 又稱體視學（十） 、組織工程術（tissue engineering）,三、組織胚胎學在基礎醫(yī)學中的地位,組織學=顯微解剖學 ? 大體 to 微細不同組織的功能 ? 生理學（physiology）正常與異常 ? 病理學(pat

13、hology)臨床課的基礎For a good doctor needed in future,四、組織學的學習方法,1.盡可能多地觀察切片、插圖、圖譜、網(wǎng)上圖庫等。注意觀察角度、倍率、染色方法 2.深入思考，注意三個關系 平面與立體 多角度直觀與合理想象 靜態(tài)與動態(tài) 隨機能狀態(tài)而變化 結構與功能 辯證統(tǒng)一3.綜合與比較（ 善于總結，掌握規(guī)律）,注意平面與立體的關系,,,1