生物藥物概論

1、第二章 生物藥物概論,,第二章 生物藥物概論,第一節(jié) 生物藥物的來源、特性、分類與制備第二節(jié) 人體來源的藥物第三節(jié) 動(dòng)物來源的藥物第四節(jié) 植物來源的藥物第五節(jié) 海洋生物藥物,第一節(jié) 生物藥物的來源、特性、分類與制備,蛋白質(zhì)、酶、核酸、激素、抗體、細(xì)胞因子等與代謝相關(guān)的物質(zhì)都可能成為藥物。一、 來源生物藥物的定義：是指運(yùn)用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細(xì)胞、體液等，綜合利用微生物學(xué)、化學(xué)、生

2、物化學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等學(xué)科的原理和方法制造的一類用于預(yù)防、治療和診斷的制品。,,生物藥物原料以天然的生物材料為主，包括人體、動(dòng)物、植物、微生物和各種海洋生物等。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，有目的人工制得的生物原料成為當(dāng)前生物制藥原料的重要來源，如用免疫法制得的動(dòng)物原料、用基因工程技術(shù)制得的微生物或其他細(xì)胞原料等。,二、生物藥物的特性,1、藥理學(xué)特性（1）治療的針對性強(qiáng) 治療的生理、生化機(jī)制合理，療效可靠。如細(xì)胞色素c為呼吸鏈的一個(gè)重要成員，

3、用它治療因組織缺氧所引起的一系列疾病，效果顯著。（2）藥理活性高 生物藥物是精制出來的高活性物質(zhì)，因此具有高效的藥理活性（3）毒副作用小，營養(yǎng)價(jià)值高（4）生物副作用常有發(fā)生 (5)用量少，價(jià)值高,,2、在生產(chǎn)、制備中的特殊性（1）原料中的有效物質(zhì)含量低：雜質(zhì)種類、含量高，提取、純化工藝復(fù)雜。（2）穩(wěn)定性差：活性部位與空間構(gòu)象的理化影響因素（3）易腐?。河捎谏锼幬镌隙际菭I養(yǎng)價(jià)值高的物質(zhì)，因此對活性及無菌操作等要求嚴(yán)格

4、,二、生物藥物的特性,（4）注射用藥有特殊要求：生物藥物由于易被胃腸道中的酶所分解，所以給藥途徑主要是注射用藥，因此對藥品制劑的均一性、安全性、穩(wěn)定性、有效性等都有嚴(yán)格要求。同時(shí)對其理化性質(zhì)、檢驗(yàn)方法、劑型、劑量、處方、貯存方式等亦有明確的要求。,二、生物藥物的特性,3、檢驗(yàn)上的特殊性由于生物藥物具有特殊的生理功能，因此生物藥物不僅要有理化檢驗(yàn)指標(biāo)，更要有生物活性檢驗(yàn)指標(biāo)。,三、生物藥物的分類,生物藥物的分類方法有以下三種：1、按藥

5、物的化學(xué)本質(zhì)和化學(xué)特性來分；2、按原料來源來分類；3、按生理功能和臨床用途來分類,1、按藥物的化學(xué)本質(zhì)和化學(xué)特性來分；,生物藥物的有效成分多數(shù)是比較清楚的，因此有利于比較一類藥物的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系、分離制備方法的特點(diǎn)和檢測方法的統(tǒng)一等。主要有：（1）氨基酸及其衍生物類藥物；（2）多肽和蛋白質(zhì)類藥物；（3）酶和輔酶類藥物：酶類按其功能分為消化酶類、消炎酶類、心腦血管疾病治療酶類、抗腫瘤酶類、氧化還原酶類等，一部分輔酶亦屬于核酸類

6、藥物。（4）核酸及其降解物和衍生物類藥物；,,（5）糖類藥物：以粘多糖為主；（6）脂類藥物：主要有脂肪和脂肪酸類、磷脂類、膽酸類、固醇類、卟啉類等；（7）細(xì)胞生長因子類；（8）生物制品類：從微生物、原蟲、動(dòng)物或人體材料直接制備或用現(xiàn)代生物技術(shù)、化學(xué)方法制成作為預(yù)防、治療、診斷特定傳染病或其他疾病的制劑，統(tǒng)稱為生物制品,2、按原料的來源分類,按原料來源分類，有利于對不同原料進(jìn)行綜合利用、開發(fā)研究。對于生物技術(shù)藥物來說，不同原料來源

7、的生物藥物對生物技術(shù)的要求有所不同。分類如下：（1）人體組織來源的生物藥物：主要有人血液制品類、人胎盤制品類、人尿制品類；（2）動(dòng)物組織來源的生物藥物：動(dòng)物的臟器、其他小動(dòng)物制得的藥物如蛇毒、蜂毒等。（3）植物組織來源的生物藥物：中草藥、有效成分；（4）微生物來源的藥物：抗生素、酶、氨基酸、維生素等；（5）海洋生物來源的藥物；,3、按生理功能和用途分類,生物藥物廣泛用作醫(yī)療用品，在醫(yī)學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、保健醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域都發(fā)揮著重要作用

8、，大致分四類：（1）治療藥物：對疑難雜癥如腫瘤、愛滋病、免疫性疾病、內(nèi)分泌障礙等具有特殊的作用；（2）預(yù)防藥物：對傳染病的預(yù)防；（3）診斷藥物：免疫診斷試劑、單克隆抗體診斷試劑、酶診斷試劑、放射性診斷藥物和基因診斷藥物等；某些生物活性物質(zhì)亦是檢測疾病的指標(biāo)，如谷草轉(zhuǎn)氨酶等；（4）其它生物醫(yī)藥用品：生物藥物在其他方面應(yīng)用也很廣泛：如生化試劑、保健品、化妝品、食品、醫(yī)用材料等。,四、生物藥物的制備,生物藥物的提取與分離方法因?yàn)樵牧?/p>

9、、藥物的種類和性質(zhì)不同而有很大差異。這里作簡要介紹：1、生物藥物原料的選擇、預(yù)處理與保存方法；2、生物藥物的提??；3、蛋白質(zhì)類藥物的分離純化方法；4、核酸類藥物的分離純化；5、糖類藥物的分離純化方法,,6、脂類藥物的分離純化方法；7、氨基酸類藥物的分離純化方法,1、生物藥物原料的選擇、預(yù)處理與保存方法,（1）原料選擇 選擇原則主要為：有效成分含量高、原料來源豐富，易得；原料中雜質(zhì)含量少；原料成本低等；另外植物原料采收具有季節(jié)

10、性、微生物原料要注意微生物生長的對數(shù)期、動(dòng)物原料有的要注意動(dòng)物的年齡與性別。（2）原料的預(yù)處理與保存：動(dòng)物原料采集后要立即處理，去除結(jié)締組織、脂肪組織等，并迅速冷凍貯存。植物原料確定后，要擇時(shí)采集并就地去除不用的的部分，有用部分保鮮處理，收集微生物時(shí)要及時(shí)將菌細(xì)胞與培養(yǎng)液分開，進(jìn)行保鮮處理。,,原料的保存方法主要有：（1）冷凍法，該法適用于所有生物原料。常用-40℃速凍。（2）有機(jī)溶劑脫水法。常用的有機(jī)溶劑是丙酮。該法適用于原料少而價(jià)

11、值高、有機(jī)溶劑對活性物質(zhì)沒有破壞作用的原料，如腦垂體等。（3）防腐劑保鮮。常用乙醇、苯酚等。該法適用于液體原料，如發(fā)酵液、提取液等。,2、生物藥物的提取,（1）生物組織和細(xì)胞的破碎 常用的破碎方法一是磨切法，使用的設(shè)備有組織搗碎機(jī)、膠體磨、勻漿器、勻質(zhì)機(jī)、球磨機(jī)、乳缽等；二是壓力法，有加壓和減壓兩種；三是反復(fù)凍融法，該方法設(shè)備簡便，活性保持好，用時(shí)較長；四是超聲波振蕩破碎法，該法破碎效果較好，對活性有損失；五是自溶法或酶解法，用得較少。

12、,,（2）提取 生物組織與細(xì)胞破碎后要立即進(jìn)行提取。提取時(shí)，首先要根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì)，選擇提取試劑。提取試劑主要有：水、緩沖溶液、鹽溶液、乙醇、其他有機(jī)溶劑（如氯仿、丙酮等）。其次是考慮提取溶劑的用量及提取次數(shù)、提取時(shí)間。三是注意提取的溫度、pH、變性劑等因素。,3、蛋白質(zhì)類藥物的分離純化方法,所說的蛋白質(zhì)類藥物包括蛋白質(zhì)、多肽和酶類等藥物。分離純化方法主要有：（1）沉淀法 蛋白質(zhì)、酶的初步純化往往用沉淀法。其原理是使蛋白質(zhì)膠體顆粒破

13、碎，從而沉淀蛋白質(zhì)。常用的有鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、等電點(diǎn)沉淀法、與靶物質(zhì)結(jié)合沉淀法（如抗原—抗體）等。（2）按分子大小分離的方法 有超濾法和透析法（即膜分離法）、凝膠層析法、超速離心法等。其中膜分離法可用于生物大分子的濃縮、分級和脫鹽。,3、蛋白質(zhì)類藥物的分離純化方法,（3）按分子所帶電荷進(jìn)行分離的方法 氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶均為兩性電解質(zhì)。根據(jù)它們的等電點(diǎn)不同，調(diào)節(jié)pH值進(jìn)行交換、電泳、等電聚焦法等。（4）親和層析法 大部分生

14、物活性物質(zhì)都有其作用的靶物質(zhì)，如酶與底物（或抑制劑）、抗原與抗體、激素與受體等。,4、核酸類藥物的分離純化方法,核酸類藥物生產(chǎn)方法主要有提取法和發(fā)酵法。提取法生產(chǎn)DNA和RNA的主要技術(shù)是，先提取核酸和蛋白質(zhì)復(fù)合物，再解離核酸與蛋白質(zhì)，然后分離RNA與DNA。發(fā)酵法主要用于生產(chǎn)單核苷酸。,5、糖類藥物的分離純化方法,（1）提取方法非降解法適用于從含一種粘多糖的動(dòng)物組織中提取粘多糖，提取采用的溶劑是水或鹽溶液。降解法適用于從組織中提取

15、結(jié)合比較牢固的粘多糖。如從軟骨中分離提取硫酸軟骨素，就是用堿處理進(jìn)行降解。又如用酶處理法可提取與蛋白質(zhì)結(jié)合的多糖,,（2）分離方法常用的分離方法是沉淀法和離子交換層析法。乙醇沉淀法是從提取液中沉淀多糖最簡易方法，也適用于分級分離。4~5倍體積的乙醇可以使任何結(jié)締組織中的粘多糖完全沉淀。用季銨化合物也可沉淀粘多糖。粘多糖的聚陰離子能與某些陽離子表面活性劑結(jié)合成不溶于水的鹽，如CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)等離子交換層析法。粘多糖的

16、聚陰離子能夠很快地被陰離子交換劑吸附和分離，如Dowex I-X2離子交換樹脂、DEAE-離子交換纖維素等。洗脫可用NaCl溶液進(jìn)行梯度洗脫。,6、脂類藥物的分離純化方法,（1）提取方法： 脂類自然狀態(tài)下是以結(jié)合形式存在的。非極性脂是與其他脂質(zhì)分子或蛋白分子的疏水區(qū)相結(jié)合的。提取脂質(zhì)藥物就是要選擇適當(dāng)?shù)娜軇﹣砥茐倪@種結(jié)合鍵，將脂質(zhì)溶解出來。常用的溶劑有組合溶劑，醇是其中的主要成分，此外還有氯仿、甲醇、水等。,,（2）純化方法沉淀法：由

17、于不同脂質(zhì)在丙酮中溶解度不同，故常用它進(jìn)行沉淀；吸附層析法：常用吸附劑有硅膠、氧化鋁等。它是通過極性和離子力等把各種化合物結(jié)合到固體吸附劑上。洗脫一般用極性逐漸增大的洗脫液來進(jìn)行，非極性的先流出；離子交換層析法：脂質(zhì)分子的存在有非解離、兩性離子和酸式解離三種狀態(tài)，根據(jù)它們在一定pH條件下解離情況，選擇適當(dāng)?shù)碾x子交換劑可將它們提純，如TEAE-纖維素(三乙氨基乙基纖維素 ) 對分離脂肪酸和膽汁酸等特別有效。,7、氨基酸類藥物的分離純化

18、方法,(1) 氨基酸的生產(chǎn)方法蛋白質(zhì)水解法：酸水解、堿水解和酶水解三種。用鹽酸水解為常用方法，其優(yōu)點(diǎn)是水解迅速完全，產(chǎn)物全部是L-型氨基酸，缺點(diǎn)是色氨酸全部被破壞，絲氨酸等部分被破壞；堿水解較容易產(chǎn)生消旋作用，較少應(yīng)用。酶水解法水解不夠完全。發(fā)酵法：發(fā)酵法主要是選育特異產(chǎn)生某種氨基酸的菌株，經(jīng)過發(fā)酵后，從培養(yǎng)液中提純氨基酸。,,化學(xué)合成與酶促合成法：化學(xué)合成法一般得到的是DL-型氨基酸，尚需要對異構(gòu)體拆分；酶促合成法也是酶工程在醫(yī)藥

19、工業(yè)上應(yīng)用的一個(gè)內(nèi)容，優(yōu)點(diǎn)是技術(shù)工藝簡單，轉(zhuǎn)化率高，副產(chǎn)物少，容易提純等。,（2）氨基酸的分離方法,常用的氨基酸分離提純方法有沉淀法、吸附法和離子交換法。沉淀法；根據(jù)形成沉淀的原理不同分為兩種：一種是依據(jù)不同氨基酸在水中或其他溶劑中的溶解度差異進(jìn)行分離。另一是用特殊試劑沉淀某種氨基酸，如用鄰二甲苯-4-磺酸與亮氨酸形成不溶性鹽沉淀，再用氨水分解，使亮氨酸游離出來。吸附法；這是利用吸附劑根據(jù)氨基酸吸附力的差異進(jìn)行氨基酸分離的方法。苯丙

20、氨酸、酪氨酸、色氨酸的分離就是利用活性碳對其吸附的原理,,離子交換法：氨基酸是兩性電解質(zhì)，在一定pH條件下，不同氨基酸帶電性質(zhì)及解離狀態(tài)是不同的，因此在離子交換劑上被吸附的強(qiáng)度不同。常用的離子交換劑為強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂，洗脫主要用pH梯度洗脫。,第二節(jié) 人體來源的藥物,一、人體來源藥物的特點(diǎn)與研究意義二、人體來源藥物的種類與用途三、人體來源藥物的制備實(shí)例四、人體藥物的研究前景,一、人體來源藥物的特點(diǎn)與研究意義,1、人體來源的生物

21、藥物特點(diǎn)（1）安全性好：需要保證來源于健康人（2）效價(jià)高，療效可靠；因?yàn)榧兌雀撸?）穩(wěn)定性好：可以加工成凍干試劑，10℃以下可保存2年以上，利于運(yùn)輸、貯存和使用2、研究意義（1）資源的有限性：人體來源是有限的（2）意義：從藥學(xué)角度研究清楚人體來源的結(jié)構(gòu)和功能，對于使用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)藥物具有重大意義，如胰島素的生產(chǎn)。,二、人體來源藥物的種類與用途,1、人血液制品：全血制品、血液成分制品、血漿成分制品和體液細(xì)胞內(nèi)成分制品等。血

22、液成分制品包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板和血漿。這類成分主要通過離心、過濾技術(shù)獲得。(1) 紅細(xì)胞制劑：凡在需要提高血液攜氧能力和補(bǔ)充血紅蛋白，而又不需要補(bǔ)充維持血容量的場合，均可輸用“壓積紅細(xì)胞”等紅細(xì)胞制劑。壓積紅細(xì)胞、少含白細(xì)胞的壓積紅細(xì)胞、冰凍貯藏紅細(xì)胞。,,（2）白細(xì)胞濃縮液：輸注白細(xì)胞療法，一般在腫瘤病人經(jīng)細(xì)胞藥物治療后，處于骨髓細(xì)胞抑制期間遭受感染且各種抗菌素治療無效情況下采用，療效顯著。白細(xì)胞（粒細(xì)胞）成分需用單采粒細(xì)胞

23、技術(shù)自供血者血循環(huán)中采集。用過濾法或離心法得到的細(xì)胞存活率均較低。改進(jìn)的連續(xù)離心法可將粒細(xì)胞得率提高一倍。注意輸注HLA組織抗原相溶的白細(xì)胞，離體白細(xì)胞的保存問題，白細(xì)胞是IFN?的重要原料（一般是將抗凝后的全血離心，然后取出白細(xì)胞層）。,,（3）血小板制劑：血小板的分離和使用在國外已經(jīng)比較普遍，中國尚未推廣使用。血小板制劑的適應(yīng)病癥為白血病、淋巴瘤及其他腫瘤因治療而導(dǎo)致的骨髓抑制癥狀。需要注意的是人體輸注血小板往往會(huì)產(chǎn)生抗體，還會(huì)引起

24、短期的粒細(xì)胞減少。采用單人的血小板，最好應(yīng)用HLA相容的單人血小板輸注，可延緩、減少這種破壞作用。,,（4）新鮮冰凍血漿（FFP）：新鮮冰凍血漿可有效地保存血漿中各種生物活性成分的功能。FFP產(chǎn)品規(guī)定自采血到血漿冰凍的時(shí)間不超過8小時(shí)，在-30℃以下保存。FFP可在許多臨床疾病中使用，包括先天性或獲得性凝血因子缺乏癥、免疫球蛋白缺乏癥等。,2、血漿的綜合利用,血漿情況表2-1,,,,,項(xiàng)目,含量（%）,血漿占人體體重的量,血漿占全血的量

25、,血漿中水分占血漿的量,血漿中蛋白質(zhì)占血漿的量,白蛋白+IgG占血漿總蛋白的量,其它百余種微量蛋白成分占血漿總蛋白的量,IgA+IgM+Fg+Tr+?1AT+Hpx+ ?1AG占血漿總蛋白的量,8,50,92,65,6~7,25,10,由表2-1可見，血漿蛋白成分中主要是Alb和IgG，含量中等（指含量在100~1000mg/dl）的成分有IgA、IgM、纖維蛋白原（Fg）、補(bǔ)體C3、轉(zhuǎn)鐵蛋白（Tr）、巨球蛋白（?2M）、觸珠蛋白（Hp

26、）、 ?1抗胰蛋白酶（ ?1AT），血色素結(jié)合蛋白（HpX）和?1-AGP等十種。此外還有百余種小量和微量的蛋白質(zhì)和多肽成分。下面分別論述具有不同生理功能的幾個(gè)主要成分。,,,（1）轉(zhuǎn)輸?shù)鞍最?；這是一類對能在血液循環(huán)中對機(jī)體的營養(yǎng)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物、激素、藥物等進(jìn)行轉(zhuǎn)輸?shù)难獫{蛋白。白蛋白、前白蛋白、類脂蛋白、觸珠蛋白、血紅蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、銅藍(lán)蛋白、轉(zhuǎn)鈷胺蛋白、GC蛋白。（2）免疫球蛋白（3）凝血系統(tǒng)蛋白：包括與凝血有關(guān)的蛋白質(zhì)、酶或因子

27、等；第二類是與溶纖有關(guān)的酶，如纖溶酶原，被尿激酶活化后成為具有酶活性的纖溶酶，具有溶栓作用。蛋白C為新近發(fā)現(xiàn)的抗凝系統(tǒng)中的一種主要蛋白。它可被凝血酶激活，活化后的蛋白C能作用于活化的因子V和VIII，起到抗凝作用，該類蛋白大部分為微量或超微量。,,（4）補(bǔ)體系統(tǒng)蛋白：補(bǔ)體系統(tǒng)是機(jī)體主要防御體系之一，在許多生物學(xué)反應(yīng)中，如吞噬、調(diào)理、趨化和細(xì)胞溶解等，均起重要作用。另一方面補(bǔ)體在自身免疫性疾病及循環(huán)免疫復(fù)合物性疾病中，起著損傷機(jī)體的作用。

28、（5）蛋白酶抑制物類：主要有?1-抗胰蛋白酶、 ?1抗糜蛋白酶（ ?1X）、 ?間胰酶抑制物、抗凝血酶III等。,3、人體液細(xì)胞中的活性物質(zhì),人體液細(xì)胞包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血小板、成纖維細(xì)胞等，細(xì)胞內(nèi)的生物活性物質(zhì)具有極重要的生理功能。用人體液細(xì)胞生產(chǎn)的活性物質(zhì)主要有干擾素?、白細(xì)胞介素-2、超氧化物歧化酶等少數(shù)幾個(gè)品種。對于體液細(xì)胞中生長因子等的研究的主要意義在于搞清楚結(jié)構(gòu)和功能，以便用于生物技術(shù)進(jìn)行生產(chǎn)。體液細(xì)胞的直接使

29、用是其主要用途。,4、人類來源的其它原料的利用,（1）人胎盤的應(yīng)用：可得到人胎盤丙種球蛋白、人胎盤白蛋白、人胎盤RNA酶抑制劑等，也可從胎盤中提取絨膜促性激素（HCG）和絨膜促乳激素（HCS）等。（2）人尿的綜合利用：從健康男性尿液中可以制備尿激酶、激肽釋放酶、尿抑胃素、蛋白酶抑制劑、睡眠因子、集落刺激因子（CSF）和表皮生長因子（EGF）等。從妊娠婦女與絕經(jīng)期婦女的尿中，可制備HCG等。,5、細(xì)胞因子,（1）特點(diǎn)和生理作用：細(xì)胞因子

30、系在體內(nèi)或體外對效應(yīng)細(xì)胞的生長、增殖和分化起調(diào)控作用的一類物質(zhì)。許多生長因子在靶細(xì)胞上有特異性受體，這類因子包括細(xì)胞生長因子和細(xì)胞生長抑制因子。在臨床上，細(xì)胞因子可促進(jìn)受損組織的恢復(fù)，但對正常組織無作用。（2）主要種類：已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子在100種以上，大部分是從動(dòng)物原料中制得。,6、人體激素,激素主要有蛋白激素、多肽激素、氨基酸衍生物激素和脂類激素。激素分子很少是大分子蛋白質(zhì)，因此很少有免疫反應(yīng)。如今激素的生產(chǎn)是以動(dòng)物原料提取為主，

31、近年來，用半合成法和基因工程法來生產(chǎn)激素發(fā)展很快，用這些方法生產(chǎn)人胰島素已取得成功。,三 、人體來源藥物的制備實(shí)例,1、人血漿白蛋白制備工藝要點(diǎn)：絡(luò)合（利凡諾（雷佛奴爾;利凡諾;乳酸依沙吖啶沉淀））：血漿在攪拌下用NaHCO3調(diào)節(jié)pH至8.6，加入等體積的2%利凡諾溶液，充分?jǐn)嚢韬箪o置2~4h，分離上清與絡(luò)合物沉淀。解離：在沉淀中加滅菌蒸餾水。用0.5mol/LHCl調(diào)節(jié)pH至弱酸性，加NaCl至0.15%~0.2%，攪拌下解離。加

32、熱去雜蛋白：充分解離后，65℃恒溫1h，離心分離出上清液。熱處理（60 ℃，10h）：滅活病毒檢驗(yàn)方法：凍干品為白色疏松物體。白蛋白含量占95 %以上，水分<1%，水溶后pH為6.6~7.2，硫酸銨殘留量<0.01%，細(xì)菌學(xué)和熱源質(zhì)檢測合格。,,2、尿激酶的制備工藝要點(diǎn)：男性尿，8h內(nèi) 處理。調(diào)尿液pH6.5以下，電導(dǎo)20~30M/?，細(xì)菌數(shù)1000個(gè)/ml以下。硅藻土吸附：1%硅藻土，5 ℃下吸附1h洗脫：以5

33、℃冷水洗滌后，以0.02%氨水內(nèi)含0.1mol/l NaCl的溶液洗脫，洗脫液由清轉(zhuǎn)渾時(shí)開始收集。除熱源、色素：上述收集液用飽和NaH2PO4調(diào)pH8.0，加NaCl調(diào)電導(dǎo)至22M/?，通過DEAE-SephadexA50 （葡聚糖凝膠 ）層析柱，收集流出活性部分,CM-C濃縮：上述收集液用1mol/L HAc調(diào)pH至4.2，用蒸餾水調(diào)電導(dǎo)至16~17M/?，通過CM-C柱。然后用10倍體積的pH4.2的HAc-NaAc緩沖液洗滌，然

34、后以0.1%氨水0.1mol/L NaCl溶液洗脫尿激酶。收集活性組分，雜質(zhì)被吸附。產(chǎn)品質(zhì)量：無色澄清液或白色凍干粉末。酶活力>15000IU/mg蛋白質(zhì),四、人體來源藥物的研究前景,1、可進(jìn)一步開發(fā)新產(chǎn)品：血液、胎盤等2、用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)人類活性物質(zhì),第三節(jié) 動(dòng)物來源的藥物,一、動(dòng)物來源藥物的特點(diǎn)二、動(dòng)物來源藥物的種類與用途三、動(dòng)物來源藥物的制備實(shí)例四、前景,一、動(dòng)物來源藥物的特點(diǎn),具有生物藥物的共同特點(diǎn)，來源豐富

35、種屬間差異的考慮,二、動(dòng)物來源藥物的種類與用途,1、動(dòng)物多肽與蛋白質(zhì)類藥物多肽類主要有：多肽激素如垂體激素（促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH、促黑激素MSH、催產(chǎn)素OT、加壓素AVP等）、下丘腦激素、甲狀腺激素、胰島素、胃腸道激素胸腺激素等；多肽類細(xì)胞因子蛋白類藥物有：蛋白質(zhì)激素、血漿蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)類細(xì)胞因子、粘蛋白、膠原蛋白以及其他如硫酸魚精蛋白、胰蛋白酶抑制劑等。,二、動(dòng)物來源藥物的種類與用途,2、動(dòng)物酶與輔酶類藥物有促消化酶類、消

36、炎酶類、治療心腦血管疾病的相關(guān)酶（纖溶酶、尿激酶、蚓激酶、鏈激酶、凝血酶等）、抗腫瘤的酶（L-門冬酰胺酶等）、與氧化還原電子傳遞有關(guān)的治療酶（細(xì)胞色素C、超氧化物歧化酶等）除輔酶Q10、輔酶A外，大部分輔酶由發(fā)酵法得到。,二、動(dòng)物來源藥物的種類與用途,3、動(dòng)物核酸類藥物（1） 組成與作用核酸由核苷酸組成，核苷酸由堿基、戊糖和磷酸三部分組成。戊糖與堿基組成的單元叫核苷。核酸類藥物主要有：核酸、核苷酸、核苷、堿基及其衍生物。在癌癥、肝

37、炎、抗放射性、心臟病方面有重要作用。（2）種類與用途,二、動(dòng)物來源藥物的種類與用途,4、動(dòng)物糖類藥物以粘多糖類為主，廣義的粘多糖包括粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等。粘多糖有中性和酸性粘多糖，主要分布于在動(dòng)物的骨、軟骨、皮、角、血管、腸、滑膜液、腦、角膜、肺、肝、心、尿等原料中。幾種重要的粘多糖：甲殼質(zhì)、硫酸軟骨素、肝素及透明質(zhì)酸。動(dòng)物粘多糖主要分離步驟大致是：原料處理、提取（降解和非降解法），去除粘多糖，脫色、脫蛋白等，純化，用

38、乙醇沉淀，季銨鹽絡(luò)合沉淀，離子交換、分子篩、親和層析等。,二、動(dòng)物來源藥物的種類與用途,5、動(dòng)物脂類藥物（1）種類及分布主要包括脂肪酸及其衍生物、磷脂類、膽酸類、卟啉及其衍生物等。（2）制備方法提取法、水解法、生物轉(zhuǎn)化法化學(xué)合成或半合成法,二、動(dòng)物來源藥物的種類與用途,6、動(dòng)物細(xì)胞因子,三、動(dòng)物來源藥物的制備實(shí)例,1、胰島素的制備2、超氧化物歧化酶（SOD）的制備3、用肝臟生產(chǎn)RNA4、提取法制備腺苷三磷酸（ATP）5

39、、肝素鈉的制備6、前列腺素E2（PGE2）的制備7、表皮細(xì)胞生長因子（EGF）的制備,四、動(dòng)物來源藥物的研究前景,1、動(dòng)物資源中活性成分的深入研究與擴(kuò)大開發(fā)2、現(xiàn)代生物技術(shù)在動(dòng)物研究中的應(yīng)用：抗體工程、基因工程、細(xì)胞工程、酶工程、發(fā)酵工程等3、動(dòng)物藥物的分子改造、化學(xué)合成與新藥設(shè)計(jì),第四節(jié) 植物來源的藥物,一、植物來源藥物的特點(diǎn)二、植物來源藥物的種類與用途三、植物來源藥物的制備實(shí)例四、前景,一、植物來源藥物的特點(diǎn),種類多

40、結(jié)構(gòu)復(fù)雜小分子大分子,二、植物來源藥物的種類與用途,1、植物中的天然有機(jī)化合物：糖和糖苷類、苯丙素類、醌類、黃酮類、鞣質(zhì)、萜類、甾體、生物堿2、植物蛋白類、多肽、酶類生理活性物質(zhì)的種類和作用：由于免疫方面的原因，這類藥物多用于口服和外用。3、植物糖類藥物：單糖類、聚糖類、糖的衍生物。4、植物脂類藥物：脂肪和脂肪酸類、磷脂類、固醇類。,三、植物來源藥物的制備實(shí)例,1、植物超氧化物歧化酶（SOD）的制備2、肌糖或肌醇的制備3、

41、植物不飽和脂肪酸的制備,四、植物藥物來源藥物的研究前景,1、植物細(xì)胞培養(yǎng)研究2、植物組織培養(yǎng)3、天然藥用植物中有效成分的分離、純化，結(jié)構(gòu)和功能的確定。,第五節(jié) 海洋生物藥物,一、海洋生物藥物的研究進(jìn)展二、海洋生物及海洋生物藥物的種類和用途：海藻、腔腸動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物、軟體動(dòng)物、棘皮動(dòng)物、魚類、爬行動(dòng)物三、海洋生物藥物的制備實(shí)例：黃?？麖?qiáng)心肽A制備、甲殼質(zhì)的制備四、海洋生物藥物的研究進(jìn)展：對當(dāng)前比較常見疾病的預(yù)防和治療，開發(fā)新的海