分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全常識(shí)

1、實(shí)驗(yàn)室安全管理,內(nèi)容介紹,,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí)1.1 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火1.2 化學(xué)試劑的安全使用1.3 微生物的危害及處理1.4 紫外線輻射的危害及防護(hù),,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.1 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火,連線：儀器連線必須使用帶有接地的三根線的護(hù)套線，不可使用普通的塑料絞線。電話線可用普通的塑料絞線。嚴(yán)禁私拉亂扯。接地：儀器應(yīng)有良好的接地，提高儀器的穩(wěn)定性及安全系數(shù)。 維修：儀器出現(xiàn)故障時(shí)，應(yīng)切

2、斷電源，立即向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告。維修儀器時(shí)必須切斷電源，方可拆機(jī)修理。墻電：不得私自對(duì)墻電進(jìn)行維修、改造，該工作由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人進(jìn)行計(jì)劃，由相關(guān)專業(yè)人員進(jìn)行維修、改造。檢查：如遇線路老化或損壞應(yīng)及時(shí)地更換。觸電：斷電或絕緣脫離 ? 急救電燈：進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，有需要時(shí)打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)、排氣扇；離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)若無(wú)人請(qǐng)關(guān)閉電燈及排氣扇。空調(diào)：進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，有需要時(shí)可打開(kāi)空調(diào)，溫度不得低于27℃；每天下班時(shí)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人將關(guān)閉空調(diào)。若在非上班時(shí)間內(nèi)打

3、開(kāi)空調(diào)，離開(kāi)時(shí)請(qǐng)關(guān)閉！,電！,,,危險(xiǎn),節(jié)約,,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.1 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火,氣！,搬運(yùn)：搬運(yùn)或轉(zhuǎn)動(dòng)鋼瓶時(shí)，不得用手執(zhí)著開(kāi)關(guān)閥移動(dòng)。使用：按氣瓶的類別選用減壓器，安裝時(shí)螺扣應(yīng)擰緊，并檢漏。 開(kāi)啟鋼瓶：逆時(shí)針?lè)较驗(yàn)殚_(kāi)；先開(kāi)總閥，后開(kāi)減壓閥。 關(guān)閉鋼瓶：順時(shí)針?lè)较驗(yàn)殛P(guān)；先關(guān)總閥，后關(guān)減壓閥。 氣嘴保護(hù)：用死扳手夾緊氣嘴后再開(kāi)總閥。安全：

4、氣瓶?jī)?nèi)的氣體不可用盡。 惰性氣體：應(yīng)剩余0.05MPa以上壓力的氣體。 可燃?xì)怏w：應(yīng)剩余0.2Mpa以上壓力的氣體。 氫 氣：應(yīng)剩余2.0MPa以上壓力的氣體。存放：分類分處存放 直立放置時(shí)要穩(wěn)妥；氣瓶要遠(yuǎn)離熱源；避免曝曬和強(qiáng)烈振動(dòng)； 一般實(shí)驗(yàn)室內(nèi)存放氣瓶量不得超過(guò)兩瓶。

5、 氫氣瓶和氧氣瓶不能同存一處。,,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.1 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火,水！,上 水：水龍頭或水管漏水時(shí)，應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，以便及時(shí)維修。下 水：水池內(nèi)不得倒入培養(yǎng)基、瓊脂糖膠等凝膠物質(zhì)；清洗廢液缸時(shí)請(qǐng)注意將其中的固體物質(zhì)倒入到垃圾桶后才能沖洗，特別是tip和eppendorf管。下水道排水不暢時(shí)，應(yīng)及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，以便及時(shí)疏通。 冷卻水：輸水管必須使用橡膠管，不得使用乳膠管；上

6、水管與水龍頭的連接處及上水管、下水管與儀器或冷凝管的連接處必須用管箍夾緊；下水管必須插入水池的下水管中。純凈水：應(yīng)按照“操作規(guī)程”進(jìn)行操作；取水時(shí)應(yīng)注意及時(shí)地關(guān)閉取水開(kāi)關(guān)，防止溢流。,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.1 實(shí)驗(yàn)室電、氣、水、火,火,報(bào)警：119（說(shuō)明火源、火情、單位名稱、地理位置，或明顯標(biāo)志）? 措施：早發(fā)現(xiàn)、早處理、早報(bào)告? 滅火： ? 學(xué)會(huì)使用滅火器（一拔、二握、三瞄、四掃） ? 沉著、冷靜

7、 ? 易燃固體、易燃?xì)怏w、易燃液體和帶電物體著火時(shí)，可用 干粉滅火器滅火 ； ? 導(dǎo)線或電器著火時(shí)，應(yīng)先斷電，再用干粉滅火器滅火。 切不可用泡沫滅火器，此滅火器導(dǎo)電。 ? 衣服著火時(shí)，應(yīng)盡快地脫掉衣服，并用水滅火?；蚓偷貪L動(dòng)， 切忌外跑。 防火：火災(zāi)不能預(yù)期、不能杜絕、只能預(yù)防 ? 消除火

8、災(zāi)隱患（電、火、氣、試劑） ? 備逃生四件寶（滅火器、繩、手電筒、防毒面具）,禁止吸煙！,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.2 化學(xué)試劑的安全使用,? 標(biāo) 識(shí)：自配試劑應(yīng)貼標(biāo)簽，并注明化合物名稱、濃 度、配制日期，以及配制人姓名。,總原則：藥品狀態(tài)定口徑，瓶塞取決酸堿性；受熱見(jiàn)光易分解，存放低溫棕色瓶；特殊試劑特殊放，互不反應(yīng)要記清。,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.2 化學(xué)試劑的安全使用

9、,易燃易爆 化學(xué)試劑：一般將閃點(diǎn)在25℃以下的化學(xué)試劑列入易燃化學(xué)試劑，它們多是極易揮發(fā)的液體，遇明火即可燃燒。有毒 化學(xué)試劑：以較小劑量進(jìn)入人體而導(dǎo)致疾病或死亡的才被劃為有毒物質(zhì)。腐蝕性 化學(xué)試劑：化學(xué)試劑碰到皮膚、粘膜、眼、呼吸器官都有及時(shí)清洗，如各種酸和堿、溴、苯酚等。強(qiáng)氧化性 化學(xué)試劑：包括過(guò)氧化物和含有強(qiáng)氧化能力的含氧酸及其鹽，如硝酸銨、高氯酸及其鹽、重鉻酸及其鹽等。放射性 化學(xué)試劑：同位素示蹤技術(shù)的發(fā)展，廣泛應(yīng)用于生

10、物化學(xué)與分子生物學(xué)。由于其特殊性，該種試劑不得帶入公共實(shí)驗(yàn)室，在各自實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行專項(xiàng)管理或者由學(xué)院進(jìn)行統(tǒng)一管理。不相容 化學(xué)試劑：一些化學(xué)試劑在儲(chǔ)存和操作過(guò)程中不能與其他物質(zhì)接觸，否則就發(fā)生爆炸，這些化學(xué)試劑稱為不相容化學(xué)試劑。如：疊氮化物通常用作溶液中的抗菌劑，由于輕微碰撞就可能造成疊氮化銅的爆炸，因此不能與銅接觸（如污水管及管道設(shè)施）。,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.2 化學(xué)試劑的安全使用,EB,EB是一種強(qiáng)誘變劑（可能造成遺傳性危害

11、），直接接觸有中等毒性。EB可以通過(guò)皮膚吸收，因此應(yīng)當(dāng)避免一切與EB的直接接觸。EB對(duì)皮膚，眼睛，口腔和上呼吸道系統(tǒng)有刺激性作用。應(yīng)將EB安全密封，并密閉存放于干燥避光處。,提取組織和細(xì)胞RNA的一種重要試劑，在提取RNA時(shí)一定要在通風(fēng)櫥進(jìn)行。如皮膚接觸Trizol，請(qǐng)立即用大量去垢劑和水沖洗，廢液埋入地下。,Trizol,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.2 化學(xué)試劑的安全使用,RNA酶的強(qiáng)抑制劑，一種潛在的致癌物質(zhì)。操作時(shí)戴口罩，在通風(fēng)櫥

12、中進(jìn)行。沾到手上立即沖洗，廢液通過(guò)廢液道排泄。,DEPC(Diethylprocarbonate)(二乙基焦碳酸酯),常用于DNA和RNA提取，對(duì)皮膚、眼睛、黏膜和呼吸道有強(qiáng)烈的刺激作用和腐蝕性，易損害肝和腎。操作時(shí)戴手套在通風(fēng)櫥里進(jìn)行，廢液收集后埋入地下。,CHCl3（Chloroform，氯仿）,Acrylamide（丙烯酰胺）,DNA測(cè)序、SSR及蛋白質(zhì)分離等技術(shù)中作電泳支持物，具神經(jīng)毒性，聚合后毒性消失。操作時(shí)戴手套在通風(fēng)櫥

13、內(nèi)進(jìn)行，聚合后的聚丙烯酰胺凝膠沒(méi)有毒性，可隨普通垃圾一起扔掉，千萬(wàn)不要倒入下水道.。,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.2 化學(xué)試劑的安全使用,DMSO（二甲亞砜）,是一種既溶于水又溶于有機(jī)溶劑的非質(zhì)子極性溶劑，常用作細(xì)胞的凍存液和配制AS。皮膚沾上之后用大量的水洗及1%~5%稀氨水洗滌。,有毒，易損害眼睛。質(zhì)粒提取時(shí)作裂解液破壞細(xì)胞膜和Southern雜交時(shí)的洗膜液中的去垢劑。戴合適的手套和安全護(hù)目鏡，不要吸入其粉末。,十二烷基硫酸鈉(SD

14、S),強(qiáng)神經(jīng)毒性，防止誤吸，操作時(shí)快速，存放時(shí)密封。,TEMED,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.2 化學(xué)試劑的安全使用,很強(qiáng)的還原劑，散發(fā)難聞的氣味?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收而危害健康。當(dāng)使用固體或高濃度儲(chǔ)存液時(shí)，戴手套和護(hù)目鏡，在通風(fēng)櫥中操作。,DTT 二硫蘇糖醇,一種高強(qiáng)度毒性的膽堿酯酶抑制劑。它對(duì)呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收而致命。戴合適的手套和安全眼鏡，始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里使用。在接觸到的情況下，

15、要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚，已污染的工作服作為有害廢物處理。,PMSF 苯甲基磺酰氟,引起嚴(yán)重的眼睛刺激和灼傷?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收而受害。戴合適的手套和護(hù)目鏡。,Triton X-100,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.2 化學(xué)試劑的安全使用,對(duì)黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性。吸入可致命。操作時(shí)戴合適的手套、安全眼鏡和防護(hù)服。始終在通風(fēng)櫥里操作，操作完后徹底洗手。,過(guò)硫酸銨 (NH4)2S2O8,毒性非常大。它阻斷細(xì)胞

16、色素電子運(yùn)送系統(tǒng)。含有疊氮鈉的溶液要標(biāo)記清楚?？梢蛭?、咽下或皮膚吸收而損害健康。戴合適的手套和安全護(hù)目鏡，操作時(shí)要格外小心。,疊氮鈉（NaN3）,染料咽下可致命或引起眼睛失明，通過(guò)吸入和皮膚吸收是有毒的。其可能的危險(xiǎn)是不可逆的效應(yīng)。戴合適的手套和安全護(hù)目鏡。在化學(xué)通風(fēng)櫥里操作，不要吸入其粉末。,吉姆薩（Giemsa）,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.3 微生物的危害及處理,,生物安全,,重點(diǎn)任務(wù)：實(shí)驗(yàn)室感染的控制、實(shí)驗(yàn)室對(duì)周圍環(huán)境影響的控

17、制以及實(shí)驗(yàn)室和感染性實(shí)驗(yàn)材料的管理控制。,1.3 微生物的危害及處理,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),重組核酸技術(shù)和生物安全,方法 121℃ 15-40min：適用于所有污染物的滅菌紫外線照射滅菌 ：空氣、物體表面，無(wú)菌室或污染區(qū)域照射，至少30min乙醇，次氯酸鈉 消毒,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),,1.4 紫外線輻射的危害和防護(hù),紫外輻射是指波長(zhǎng)范圍在100nm—400nm的光輻射，一般把100nm—280nm稱作UVC，把280nm

18、—315nm稱作UVB，把315nm—400nm稱作UVA。其中我們觀察膠體用的最多的就是280nm—315nm的紫外線。 紫外線的有害效應(yīng)主要是由于紫外線對(duì)脫氧核糖核酸（DNA）的作用造成的。最有害的效應(yīng)是細(xì)胞致死，其它的效應(yīng)則包括致突、致癌、干擾DNA、核糖核酸（RNA）和蛋白質(zhì)的合成、細(xì)胞分裂的延遲、以及在通透性和能動(dòng)性上的變化等。1.紫外光對(duì)眼睛的損傷 白內(nèi)障被認(rèn)為過(guò)量紫外光輻射的主要原因，經(jīng)紫外光照射后，射

19、線大部分被角膜上皮細(xì)胞核蛋白吸收，導(dǎo)致細(xì)胞核膨脹，碎裂和細(xì)胞死亡，以至損傷眼角膜和晶狀體，導(dǎo)致渾濁?？偟恼f(shuō)來(lái)，紫外光輻射增加，人類的白內(nèi)障患者增加。,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),,1.4 紫外線輻射的危害和防護(hù),2、紫外光對(duì)人皮膚的損傷 紫外光的影響有積累作用，它的主要機(jī)理：蛋白質(zhì)受紫外光照射后，形成光解產(chǎn)物，此外，其溶解度和粘度，對(duì)熱變性的敏感性及熒光等物理化學(xué)和光學(xué)性質(zhì)均有顯著的改變。紫外光對(duì)皮膚的作用分為急性作用和慢性

20、作用。急性作用表現(xiàn)為紅斑效應(yīng)其癥狀為水腫脫皮，全身癥狀有寒戰(zhàn)，發(fā)燒，惡心，罕見(jiàn)循環(huán)衰竭。慢性作用如致皮膚老化，色素沉著，加速老化，甚至引起腫瘤。輕者皮膚出現(xiàn)水腫性紅斑，重者會(huì)出現(xiàn)水皰或大皰，還可伴有休克，發(fā)熱，畏寒，惡心，心悸和頭昏等癥狀。3、紫外光對(duì)其他部位的損傷 紫外光輻射對(duì)免疫系統(tǒng)的影響，免疫系統(tǒng)的一些成分存在于皮膚中，皮膚暴露在紫外光下，使得免疫系統(tǒng)受紫外光輻射，使其功能受到干擾。研究表明，紫外光輻射的免疫抑

21、制作用可導(dǎo)致皮膚癌，同時(shí)引起一些傳染病和其他一些疾病。,分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)安全常識(shí),1.4 紫外線輻射的危害和防護(hù),在實(shí)驗(yàn)室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀、凝膠成像系統(tǒng)。只能通過(guò)吸收有害波長(zhǎng)的濾片或安全玻璃片才能觀察。在紫外光下操作時(shí)要戴合適的預(yù)防性手套。應(yīng)佩戴具有紫外線防護(hù)功能的護(hù)目鏡和/或防護(hù)面罩，并遮蔽暴露的皮膚。 紫外照射消毒后由于空氣中臭氧富集，不宜立即開(kāi)始工作，應(yīng)在停止紫外照射30 min后開(kāi)始工作，

22、有條件的實(shí)驗(yàn)室，可安裝無(wú)臭氧紫外燈。 超凈工作臺(tái)中進(jìn)行紫外照射消毒后，也應(yīng)用強(qiáng)風(fēng)進(jìn)行吹掃后再進(jìn)行工作，以免臭氧危害身體健康。,膠房EB清除方案,ＥB除污劑：4.2克亞硝酸鈉（NaNO2和20毫升 的次磷酸 (H3PO2)(50％)，加入300毫升水。用紙巾蘸取去污劑擦洗被污染的區(qū)域，再用紙巾加自來(lái)水清洗5次，每次實(shí)用的紙巾都必須是干凈未污染的。,實(shí)驗(yàn)室安全守則,不要在實(shí)驗(yàn)室吃東西、喝水和抽煙不要穿漏腳趾的鞋或短褲

23、在實(shí)驗(yàn)過(guò)程穿實(shí)驗(yàn)服不在試驗(yàn)區(qū)域以外的區(qū)域穿實(shí)驗(yàn)服事先了解你所接觸的每個(gè)藥品的組分,實(shí)驗(yàn)室工作禮節(jié),公用試劑剩下或快用完時(shí)，多配置或訂購(gòu)備用不要移動(dòng)物品或儀器在試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)的位置不要到處亂放東西、實(shí)驗(yàn)完畢臺(tái)面收拾干凈沒(méi)有許可不要使用別人的專用試劑或緩沖液設(shè)備的破損及時(shí)報(bào)告或提出警告請(qǐng)問(wèn)，而不是命令；他人是合作伙伴實(shí)驗(yàn)室資源外借務(wù)必通過(guò)老板?。。。?！,,建議膠房UV護(hù)目鏡購(gòu)置畢業(yè)生請(qǐng)開(kāi)始整理自己的重要質(zhì)粒、菌種、重