分子生物學實驗室安全常識

1、實驗室安全管理,內(nèi)容介紹,,分子生物學實驗安全常識1.1 實驗室電、氣、水、火1.2 化學試劑的安全使用1.3 微生物的危害及處理1.4 紫外線輻射的危害及防護,,分子生物學實驗安全常識,1.1 實驗室電、氣、水、火,連線：儀器連線必須使用帶有接地的三根線的護套線，不可使用普通的塑料絞線。電話線可用普通的塑料絞線。嚴禁私拉亂扯。接地：儀器應有良好的接地，提高儀器的穩(wěn)定性及安全系數(shù)。 維修：儀器出現(xiàn)故障時，應切

2、斷電源，立即向?qū)嶒炇邑撠熑藞蟾妗＞S修儀器時必須切斷電源，方可拆機修理。墻電：不得私自對墻電進行維修、改造，該工作由實驗室負責人進行計劃，由相關專業(yè)人員進行維修、改造。檢查：如遇線路老化或損壞應及時地更換。觸電：斷電或絕緣脫離 ? 急救電燈：進入實驗室，有需要時打開電源開關、排氣扇；離開實驗室時若無人請關閉電燈及排氣扇?？照{(diào)：進入實驗室，有需要時可打開空調(diào)，溫度不得低于27℃；每天下班時實驗室負責人將關閉空調(diào)。若在非上班時間內(nèi)打

3、開空調(diào)，離開時請關閉！,電！,,,危險,節(jié)約,,分子生物學實驗安全常識,1.1 實驗室電、氣、水、火,氣！,搬運：搬運或轉(zhuǎn)動鋼瓶時，不得用手執(zhí)著開關閥移動。使用：按氣瓶的類別選用減壓器，安裝時螺扣應擰緊，并檢漏。 開啟鋼瓶：逆時針方向為開；先開總閥，后開減壓閥。 關閉鋼瓶：順時針方向為關；先關總閥，后關減壓閥。 氣嘴保護：用死扳手夾緊氣嘴后再開總閥。安全：

4、氣瓶內(nèi)的氣體不可用盡。 惰性氣體：應剩余0.05MPa以上壓力的氣體。 可燃氣體：應剩余0.2Mpa以上壓力的氣體。 氫 氣：應剩余2.0MPa以上壓力的氣體。存放：分類分處存放 直立放置時要穩(wěn)妥；氣瓶要遠離熱源；避免曝曬和強烈振動； 一般實驗室內(nèi)存放氣瓶量不得超過兩瓶。

5、 氫氣瓶和氧氣瓶不能同存一處。,,分子生物學實驗安全常識,1.1 實驗室電、氣、水、火,水！,上 水：水龍頭或水管漏水時，應及時向?qū)嶒炇邑撠熑藞蟾?，以便及時維修。下 水：水池內(nèi)不得倒入培養(yǎng)基、瓊脂糖膠等凝膠物質(zhì)；清洗廢液缸時請注意將其中的固體物質(zhì)倒入到垃圾桶后才能沖洗，特別是tip和eppendorf管。下水道排水不暢時，應及時向?qū)嶒炇邑撠熑藞蟾妫员慵皶r疏通。 冷卻水：輸水管必須使用橡膠管，不得使用乳膠管；上

6、水管與水龍頭的連接處及上水管、下水管與儀器或冷凝管的連接處必須用管箍夾緊；下水管必須插入水池的下水管中。純凈水：應按照“操作規(guī)程”進行操作；取水時應注意及時地關閉取水開關，防止溢流。,分子生物學實驗安全常識,1.1 實驗室電、氣、水、火,火,報警：119（說明火源、火情、單位名稱、地理位置，或明顯標志）? 措施：早發(fā)現(xiàn)、早處理、早報告? 滅火： ? 學會使用滅火器（一拔、二握、三瞄、四掃） ? 沉著、冷靜

7、 ? 易燃固體、易燃氣體、易燃液體和帶電物體著火時，可用 干粉滅火器滅火 ； ? 導線或電器著火時，應先斷電，再用干粉滅火器滅火。 切不可用泡沫滅火器，此滅火器導電。 ? 衣服著火時，應盡快地脫掉衣服，并用水滅火?；蚓偷貪L動， 切忌外跑。 防火：火災不能預期、不能杜絕、只能預防 ? 消除火

8、災隱患（電、火、氣、試劑） ? 備逃生四件寶（滅火器、繩、手電筒、防毒面具）,禁止吸煙！,分子生物學實驗安全常識,1.2 化學試劑的安全使用,? 標 識：自配試劑應貼標簽，并注明化合物名稱、濃 度、配制日期，以及配制人姓名。,總原則：藥品狀態(tài)定口徑，瓶塞取決酸堿性；受熱見光易分解，存放低溫棕色瓶；特殊試劑特殊放，互不反應要記清。,分子生物學實驗安全常識,1.2 化學試劑的安全使用

9、,易燃易爆 化學試劑：一般將閃點在25℃以下的化學試劑列入易燃化學試劑，它們多是極易揮發(fā)的液體，遇明火即可燃燒。有毒 化學試劑：以較小劑量進入人體而導致疾病或死亡的才被劃為有毒物質(zhì)。腐蝕性 化學試劑：化學試劑碰到皮膚、粘膜、眼、呼吸器官都有及時清洗，如各種酸和堿、溴、苯酚等。強氧化性 化學試劑：包括過氧化物和含有強氧化能力的含氧酸及其鹽，如硝酸銨、高氯酸及其鹽、重鉻酸及其鹽等。放射性 化學試劑：同位素示蹤技術(shù)的發(fā)展，廣泛應用于生

10、物化學與分子生物學。由于其特殊性，該種試劑不得帶入公共實驗室，在各自實驗室進行專項管理或者由學院進行統(tǒng)一管理。不相容 化學試劑：一些化學試劑在儲存和操作過程中不能與其他物質(zhì)接觸，否則就發(fā)生爆炸，這些化學試劑稱為不相容化學試劑。如：疊氮化物通常用作溶液中的抗菌劑，由于輕微碰撞就可能造成疊氮化銅的爆炸，因此不能與銅接觸（如污水管及管道設施）。,分子生物學實驗安全常識,1.2 化學試劑的安全使用,EB,EB是一種強誘變劑（可能造成遺傳性危害

11、），直接接觸有中等毒性。EB可以通過皮膚吸收，因此應當避免一切與EB的直接接觸。EB對皮膚，眼睛，口腔和上呼吸道系統(tǒng)有刺激性作用。應將EB安全密封，并密閉存放于干燥避光處。,提取組織和細胞RNA的一種重要試劑，在提取RNA時一定要在通風櫥進行。如皮膚接觸Trizol，請立即用大量去垢劑和水沖洗，廢液埋入地下。,Trizol,分子生物學實驗安全常識,1.2 化學試劑的安全使用,RNA酶的強抑制劑，一種潛在的致癌物質(zhì)。操作時戴口罩，在通風櫥

12、中進行。沾到手上立即沖洗，廢液通過廢液道排泄。,DEPC(Diethylprocarbonate)(二乙基焦碳酸酯),常用于DNA和RNA提取，對皮膚、眼睛、黏膜和呼吸道有強烈的刺激作用和腐蝕性，易損害肝和腎。操作時戴手套在通風櫥里進行，廢液收集后埋入地下。,CHCl3（Chloroform，氯仿）,Acrylamide（丙烯酰胺）,DNA測序、SSR及蛋白質(zhì)分離等技術(shù)中作電泳支持物，具神經(jīng)毒性，聚合后毒性消失。操作時戴手套在通風櫥

13、內(nèi)進行，聚合后的聚丙烯酰胺凝膠沒有毒性，可隨普通垃圾一起扔掉，千萬不要倒入下水道.。,分子生物學實驗安全常識,1.2 化學試劑的安全使用,DMSO（二甲亞砜）,是一種既溶于水又溶于有機溶劑的非質(zhì)子極性溶劑，常用作細胞的凍存液和配制AS。皮膚沾上之后用大量的水洗及1%~5%稀氨水洗滌。,有毒，易損害眼睛。質(zhì)粒提取時作裂解液破壞細胞膜和Southern雜交時的洗膜液中的去垢劑。戴合適的手套和安全護目鏡，不要吸入其粉末。,十二烷基硫酸鈉(SD

14、S),強神經(jīng)毒性，防止誤吸，操作時快速，存放時密封。,TEMED,分子生物學實驗安全常識,1.2 化學試劑的安全使用,很強的還原劑，散發(fā)難聞的氣味。可因吸入、咽下或皮膚吸收而危害健康。當使用固體或高濃度儲存液時，戴手套和護目鏡，在通風櫥中操作。,DTT 二硫蘇糖醇,一種高強度毒性的膽堿酯酶抑制劑。它對呼吸道黏膜、眼睛和皮膚有非常大的破壞性?？梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而致命。戴合適的手套和安全眼鏡，始終在化學通風櫥里使用。在接觸到的情況下，

15、要立即用大量的水沖洗眼睛或皮膚，已污染的工作服作為有害廢物處理。,PMSF 苯甲基磺酰氟,引起嚴重的眼睛刺激和灼傷。可因吸入、咽下或皮膚吸收而受害。戴合適的手套和護目鏡。,Triton X-100,分子生物學實驗安全常識,1.2 化學試劑的安全使用,對黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性。吸入可致命。操作時戴合適的手套、安全眼鏡和防護服。始終在通風櫥里操作，操作完后徹底洗手。,過硫酸銨 (NH4)2S2O8,毒性非常大。它阻斷細胞

16、色素電子運送系統(tǒng)。含有疊氮鈉的溶液要標記清楚?？梢蛭搿⒀氏禄蚱つw吸收而損害健康。戴合適的手套和安全護目鏡，操作時要格外小心。,疊氮鈉（NaN3）,染料咽下可致命或引起眼睛失明，通過吸入和皮膚吸收是有毒的。其可能的危險是不可逆的效應。戴合適的手套和安全護目鏡。在化學通風櫥里操作，不要吸入其粉末。,吉姆薩（Giemsa）,分子生物學實驗安全常識,1.3 微生物的危害及處理,,生物安全,,重點任務：實驗室感染的控制、實驗室對周圍環(huán)境影響的控

17、制以及實驗室和感染性實驗材料的管理控制。,1.3 微生物的危害及處理,分子生物學實驗安全常識,重組核酸技術(shù)和生物安全,方法 121℃ 15-40min：適用于所有污染物的滅菌紫外線照射滅菌 ：空氣、物體表面，無菌室或污染區(qū)域照射，至少30min乙醇，次氯酸鈉 消毒,分子生物學實驗安全常識,,1.4 紫外線輻射的危害和防護,紫外輻射是指波長范圍在100nm—400nm的光輻射，一般把100nm—280nm稱作UVC，把280nm

18、—315nm稱作UVB，把315nm—400nm稱作UVA。其中我們觀察膠體用的最多的就是280nm—315nm的紫外線。 紫外線的有害效應主要是由于紫外線對脫氧核糖核酸（DNA）的作用造成的。最有害的效應是細胞致死，其它的效應則包括致突、致癌、干擾DNA、核糖核酸（RNA）和蛋白質(zhì)的合成、細胞分裂的延遲、以及在通透性和能動性上的變化等。1.紫外光對眼睛的損傷 白內(nèi)障被認為過量紫外光輻射的主要原因，經(jīng)紫外光照射后，射

19、線大部分被角膜上皮細胞核蛋白吸收，導致細胞核膨脹，碎裂和細胞死亡，以至損傷眼角膜和晶狀體，導致渾濁。總的說來，紫外光輻射增加，人類的白內(nèi)障患者增加。,分子生物學實驗安全常識,,1.4 紫外線輻射的危害和防護,2、紫外光對人皮膚的損傷 紫外光的影響有積累作用，它的主要機理：蛋白質(zhì)受紫外光照射后，形成光解產(chǎn)物，此外，其溶解度和粘度，對熱變性的敏感性及熒光等物理化學和光學性質(zhì)均有顯著的改變。紫外光對皮膚的作用分為急性作用和慢性

20、作用。急性作用表現(xiàn)為紅斑效應其癥狀為水腫脫皮，全身癥狀有寒戰(zhàn)，發(fā)燒，惡心，罕見循環(huán)衰竭。慢性作用如致皮膚老化，色素沉著，加速老化，甚至引起腫瘤。輕者皮膚出現(xiàn)水腫性紅斑，重者會出現(xiàn)水皰或大皰，還可伴有休克，發(fā)熱，畏寒，惡心，心悸和頭昏等癥狀。3、紫外光對其他部位的損傷 紫外光輻射對免疫系統(tǒng)的影響，免疫系統(tǒng)的一些成分存在于皮膚中，皮膚暴露在紫外光下，使得免疫系統(tǒng)受紫外光輻射，使其功能受到干擾。研究表明，紫外光輻射的免疫抑

21、制作用可導致皮膚癌，同時引起一些傳染病和其他一些疾病。,分子生物學實驗安全常識,1.4 紫外線輻射的危害和防護,在實驗室里常用的紫外光源包括手提式紫外燈和紫外透射儀、凝膠成像系統(tǒng)。只能通過吸收有害波長的濾片或安全玻璃片才能觀察。在紫外光下操作時要戴合適的預防性手套。應佩戴具有紫外線防護功能的護目鏡和/或防護面罩，并遮蔽暴露的皮膚。 紫外照射消毒后由于空氣中臭氧富集，不宜立即開始工作，應在停止紫外照射30 min后開始工作，

22、有條件的實驗室，可安裝無臭氧紫外燈。 超凈工作臺中進行紫外照射消毒后，也應用強風進行吹掃后再進行工作，以免臭氧危害身體健康。,膠房EB清除方案,ＥB除污劑：4.2克亞硝酸鈉（NaNO2和20毫升 的次磷酸 (H3PO2)(50％)，加入300毫升水。用紙巾蘸取去污劑擦洗被污染的區(qū)域，再用紙巾加自來水清洗5次，每次實用的紙巾都必須是干凈未污染的。,實驗室安全守則,不要在實驗室吃東西、喝水和抽煙不要穿漏腳趾的鞋或短褲

23、在實驗過程穿實驗服不在試驗區(qū)域以外的區(qū)域穿實驗服事先了解你所接觸的每個藥品的組分,實驗室工作禮節(jié),公用試劑剩下或快用完時，多配置或訂購備用不要移動物品或儀器在試驗區(qū)域內(nèi)的位置不要到處亂放東西、實驗完畢臺面收拾干凈沒有許可不要使用別人的專用試劑或緩沖液設備的破損及時報告或提出警告請問，而不是命令；他人是合作伙伴實驗室資源外借務必通過老板！?。。。?,建議膠房UV護目鏡購置畢業(yè)生請開始整理自己的重要質(zhì)粒、菌種、重