病原微生物采集運(yùn)輸要求講義

1、病原微生物采集與運(yùn)送,主要內(nèi)容1、病原微生物的分類2、病原微生物的采集3、病原微生物的運(yùn)送4、高致病性病原微生物的運(yùn)輸要求,1、病原微生物的分類,病原微生物：是指能夠使人或者動(dòng)物致病的微生物。,1.1、病原微生物的分類,我國在《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中按危害程度，將病原微生物分為四類：第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物，是指能

2、夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不夠成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類病原微生物，是指在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病病原微生物。,《人間傳染的病原微生物名錄》介紹,為了規(guī)范

3、人間傳染的病原微生物的實(shí)驗(yàn)室操作，確保實(shí)驗(yàn)室安全衛(wèi)生部制訂了《人間傳染的病原微生物名錄》（以下簡(jiǎn)稱《名錄》），《名錄》已于2006年1月11日下發(fā)。編寫依據(jù)： 中華人民共和國傳染病防治法 《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例（2004 .11.12) 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB19489-2004） 《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》 《危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》VS聯(lián)合國編號(hào) (UN28

4、14 和UN3373),1.2、應(yīng)城市疾控中心病原微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目類別,三類病原微生物： 致瀉性大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌、副溶血弧菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌等6種（實(shí)驗(yàn)活動(dòng)：食品、環(huán)境、可疑樣品病原菌檢測(cè) ）。 甲肝病毒、乙肝病毒、麻疹病毒、風(fēng)疹病毒（實(shí)驗(yàn)活動(dòng)：免疫人群抗體水平檢測(cè) ） 流行性感冒病毒（非H2N2亞型）（實(shí)驗(yàn)活動(dòng)：樣本采集與送檢）,二類病原微生物 結(jié)核桿菌 （實(shí)驗(yàn)活動(dòng)：可疑人

5、群痰檢及結(jié)核菌培養(yǎng) ） 霍亂弧毒（實(shí)驗(yàn)活動(dòng)：疫源地、外環(huán)境及可疑人群病原檢測(cè)） HIV病毒（實(shí)驗(yàn)活動(dòng)：可疑人群血清HIV抗體初篩） 乙腦病毒、脊灰病毒、狂犬病毒（實(shí)驗(yàn)活動(dòng)：免疫人群抗體水平檢測(cè)及相關(guān)流行病學(xué)調(diào)查 ） 口蹄疫病毒 、高致病性禽流感病毒 、SARS冠狀病毒 （實(shí)驗(yàn)活動(dòng)：樣本采集與送檢及相關(guān)流行病學(xué)調(diào)查 ）,2、病原微生物采集,標(biāo)本采集的部位、時(shí)間、質(zhì)量 是決定檢測(cè)

6、結(jié)果第一條件采集標(biāo)本時(shí)：早、快、近（病變部位）、多、凈,樣本采集注意事項(xiàng),1. 生物安全防護(hù)水平設(shè)備（個(gè)人防護(hù)用品、防護(hù)材料、器材和防護(hù)設(shè)施）2．人員:掌握專業(yè)知識(shí)和操作技能3. 措施:有效防止病原微生物擴(kuò)散和感染4. 保證樣本質(zhì)量: 技術(shù)方法、手段5.詳細(xì)記錄：來源、采集過程和方法等,采樣的規(guī)范性 -獲得可靠實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果,方法：正確時(shí)間：合理數(shù)量：足夠品種：多個(gè)（同一病人、環(huán)境）保

7、存：妥善（不同樣品、不同條件）運(yùn)輸：安全,采集的復(fù)雜性,同一個(gè)病人采集多種標(biāo)本 血液/血清 鼻咽拭子 糞便/肛拭子 腦脊液 組織一起疫情多次采樣(回顧性的、新發(fā)病人、恢復(fù)期病人)環(huán)境標(biāo)本 水體、食物、動(dòng)物、媒介,樣本采集注意點(diǎn),生物安全：個(gè)人防護(hù) 容器可靠: 無菌、耐壓、防滲漏防止交叉污染：采樣中、物品使用

8、記錄與編號(hào) ：及時(shí)、準(zhǔn)確,溫度對(duì)病毒的影響,病毒對(duì)熱不穩(wěn)定 55～60 ℃數(shù)分鐘，病毒的衣殼蛋白質(zhì)就發(fā)生變性，使病毒失去感染力。離體以后，甚至體溫也會(huì)使一些病毒喪失活性。4℃ 幾天 (凍干，長期） - 70 ℃ 幾個(gè)月～幾年-196 ℃ 長期病毒必須低溫儲(chǔ)藏。,短期保存 運(yùn)輸,保持低溫避免反復(fù)凍融到實(shí)驗(yàn)室前 4 ℃ 24hr

9、-70 ℃ days,離子環(huán)境和PH,所有的病毒都應(yīng)放在等滲和生理PH環(huán)境中，對(duì)離子環(huán)境和PH的允許界限相當(dāng)寬，但不同的病毒有差異。,輻 射,用電離輻射(X線、丙種射線、非電離輻射如紫外線)能對(duì)病毒滅活。幾乎所有的電離輻射都引起多核苷酸鏈致命的毀壞，雙股核苷酸鏈的某一個(gè)部分?jǐn)嗔卸寄苁共《局滤馈?紫外線: DNA的損害是使核苷酸相鄰的嘧啶鹼基二聚物 RNA病毒形成尿嘧啶二聚物所致死。,禽流感標(biāo)本采集,下呼吸道

10、標(biāo)本－灌洗液、痰上呼吸道標(biāo)本－鼻咽拭子、抽取液血清－雙份(溶血）其他－消化道/尸檢標(biāo)本,SARS標(biāo)本采集,呼吸道標(biāo)本－鼻咽拭子 血標(biāo)本－全血，血清（雙份)消化道標(biāo)本－糞便其他－尿液/尸檢標(biāo)本,手足口病,皰疹液腦脊液血清 咽拭子糞便,AFP(急性遲緩性麻痹）,雙份糞便（48hr內(nèi)采集）質(zhì)量：≧5g病人年齡≦15歲帶冰運(yùn)輸資料：送檢單， 個(gè)案表，,3、病原微生物運(yùn)輸?shù)囊?運(yùn)輸實(shí)施,陸路運(yùn)輸水路運(yùn)輸

11、民用航空運(yùn)輸：申請(qǐng)單位應(yīng)當(dāng)憑省級(jí)以上衛(wèi)生行政部門或中國疾病預(yù)防控制中心核發(fā)的《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準(zhǔn)運(yùn)證書》到民航等相關(guān)部門辦理手續(xù)。,分類,《名錄》中第三類病原微生物運(yùn)輸包裝分類為Ｂ類的病原微生物菌（毒）種或樣本?！睹洝分械谒念惒≡⑸?。,包裝的要求,基本要求要有三層包裝： 1、主容器：采樣管內(nèi)裝標(biāo)本，材質(zhì)為無菌塑料管、螺口、密封性能完好。 其外包裹有的吸收材料。 2、輔助容器：

12、要求要防水、防泄漏。（專用塑料袋） 3、外包裝：樣本運(yùn)送箱,其他,送檢單要隨身攜帶，不要跟樣品放在一起。樣本保存溫度的要求。（常溫、低溫）。,運(yùn)送要求,按國家運(yùn)輸規(guī)定中應(yīng)由兩名專業(yè)的技術(shù)人員運(yùn)送。,4、高致病性病原微生物的運(yùn)輸要求,衛(wèi)生部第45號(hào)令 《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》 2006年2月1日起施行,高致病性病原微生物樣本分類,國際民航組織《危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)

13、則》分類包裝要求，將相關(guān)病原和樣本分為A、B 兩類。聯(lián)合國編號(hào)分別為UN2814（UN2900動(dòng)物）和UN3373。,A類感染性物質(zhì),一類在運(yùn)輸中，一旦有暴露發(fā)生，即能夠在所有人類和動(dòng)物中引起永久性殘疾、導(dǎo)致威脅生命或致命疾病的傳染性物質(zhì)。 達(dá)到該標(biāo)準(zhǔn)的能引起人體疾病或引起人與動(dòng)物疾病的感染性物質(zhì)的聯(lián)合國編號(hào)為UN2814，而只能引起動(dòng)物疾病的該類感染性物質(zhì)則為UN2900 。,B類感染性物質(zhì),沒有達(dá)到歸屬為A類標(biāo)準(zhǔn)的感染性

14、物質(zhì)。B類感染性物質(zhì)的編號(hào)為UN3373。生物制品，B類” （Biological substance, Category B）,包裝要求,運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的容器或包裝材料應(yīng)當(dāng)達(dá)到國際民航組織《危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則》（Doc9284包裝說明PI602）規(guī)定的A類包裝標(biāo)準(zhǔn)，符合防水、防破損、防外泄、耐高溫、耐高壓的要求，并應(yīng)當(dāng)印有衛(wèi)生部規(guī)定的生物危險(xiǎn)標(biāo)簽、標(biāo)識(shí)、運(yùn)輸?shù)怯洷?、警告用語和提示用語。,基本三層包

15、裝系統(tǒng),可以應(yīng)用于所有的感染性物質(zhì):主容器。初級(jí)容器防水、防滲漏，內(nèi)裝標(biāo)本。其外包裹有的吸收材料。次級(jí)包裝。次級(jí)包裝為第二層持久的、防水、防滲漏的包裝，它封閉和保護(hù)初級(jí)容器。多個(gè)包有緩沖材料的初級(jí)容器可放于同一個(gè)次級(jí)包裝中，但是，這要求同時(shí)也放入足夠的吸收材料以確保一旦發(fā)生泄漏后所有液體都可被吸收。外層包裝。次級(jí)包裝包裹有合適的緩沖材料后，即可被裝入外層運(yùn)輸包裝。外層運(yùn)輸包裝保護(hù)其內(nèi)容物免受外界影響，如運(yùn)輸過程中的物理損壞。最小的

16、外部總尺寸應(yīng)為10x10 cm。,主容器包裝要求,病原微生物菌（毒）種或者樣本應(yīng)正確盛放在主容器內(nèi)，主容器要求無菌、不透水、防泄漏。主容器可以采用金屬或塑料等材料，必須采用可靠的防漏封口。主容器外面要包裹有足夠的樣本吸收材料，一旦有泄漏可以將所有樣本完全吸收。主容器的表面貼上標(biāo)簽，標(biāo)明標(biāo)本類別、編號(hào)、名稱、樣本量等信息。,輔助容器,輔助容器是在主容器之外的結(jié)實(shí)、防水和防泄漏的第二層容器，它的作用是包裝及保護(hù)主容器。多個(gè)主容器裝入一

17、個(gè)輔助容器時(shí)，必須將它們分別包裹，防止彼此接觸，并在多個(gè)主容器外面襯以足夠的吸收材料。相關(guān)文件（例如樣品數(shù)量表格、危險(xiǎn)性申明、信件、樣品鑒定資料、發(fā)送者和接收者信息）應(yīng)該放入一個(gè)防水的袋中，并貼在輔助容器的外面。輔助容器必須用適當(dāng)?shù)囊r墊材料固定在外包裝內(nèi)，在運(yùn)輸過程中使其免受外界影響，如破損、浸水等。,冷凍劑的使用,在使用冰、干冰或其他冷凍劑進(jìn)行冷藏運(yùn)輸時(shí)，冷凍劑必須放在輔助容器和外包裝之間，內(nèi)部要有支撐物固定，當(dāng)冰或干冰消耗以后，仍

18、可以把輔助容器固定在原位置上。如使用冰，外包裝必須不透水。如果使用干冰，外包裝必須能夠排放二氧化碳?xì)怏w，防止壓力增加造成容器破裂。在使用冷凍劑的溫度下，主容器和輔助容器必須能保持良好性能，在冷凍劑消耗完以后，仍能承受運(yùn)輸中的溫度和壓力。當(dāng)使用液氮對(duì)樣品進(jìn)行冷藏時(shí)，必須保證主容器和輔助容器能適應(yīng)極低的溫度。此外，還必須符合其他有關(guān)液氮的運(yùn)輸要求。主容器和輔助容器須在使用制冷劑的溫度下，以及在失去制冷后可能出現(xiàn)的溫度和壓力下保持完好無損

19、。主容器和輔助容器必須在無泄漏的情況下能夠承受95kPa的內(nèi)壓，并能保證在－40℃到＋55℃的溫度范圍內(nèi)不被損壞。,A類感染性物質(zhì)的包裝與標(biāo)簽,B類感染性物質(zhì)的包裝與標(biāo)簽,外包裝標(biāo)示提供了所包裝內(nèi)容物的信息，危險(xiǎn)的性質(zhì)和應(yīng)用的包裝標(biāo)準(zhǔn)。包裝或第二層包裝的所有標(biāo)示都應(yīng)清楚可見并且沒有被其他標(biāo)簽或標(biāo)示所覆蓋。每一個(gè)包裹都應(yīng)在其外包裝或第二層包裝上顯示如下信息：－寄件人的姓名和地址－責(zé)任人的電話號(hào)碼和出貨信息－收貨人的姓名和地址－聯(lián)合

20、國編號(hào)緊跟恰當(dāng)?shù)呢浳锩Q（UN2814“感染人類的傳染性物質(zhì)”或者UN2900“影響動(dòng)物的傳染性物質(zhì)”）。專業(yè)名稱不允許出現(xiàn)在外包裝上。－儲(chǔ)藏溫度（選擇）－當(dāng)使用干冰或液氮時(shí)：制冷劑的專業(yè)名稱，正確的聯(lián)聯(lián)合國編號(hào)和凈重,標(biāo) 示,標(biāo)簽名稱： 感染性物質(zhì)最小尺寸： 100 × 100 mm （最小包裝 50 × 50 mm） 每一包裝的標(biāo)簽數(shù)： 1顏色：黑色和白色“感染性物質(zhì)”字樣應(yīng)該標(biāo)明。在一些國家還要求

21、印有“一旦循壞和泄露，立即通知公共衛(wèi)生機(jī)構(gòu)”的語句,有兩種類型的標(biāo)簽：45°角放置的方形（菱形）危險(xiǎn)性標(biāo)簽，絕大多數(shù)的各類危險(xiǎn)性貨物都要求有此標(biāo)簽；具有多種形狀的管理標(biāo)簽，一些危險(xiǎn)性貨物要求有單獨(dú)或附加于危險(xiǎn)性標(biāo)簽的該類標(biāo)簽。 專門的危險(xiǎn)性標(biāo)簽應(yīng)貼于每一運(yùn)輸?shù)奈ｋU(xiǎn)性貨物的外表面（除特殊的例外）。,,,標(biāo) 簽,高致病性病原微生物運(yùn)輸?shù)怯洷?標(biāo) 記· 航空：發(fā)貨人姓名，地址和電話號(hào)碼·

22、 收件人姓名，地址和電話號(hào)碼· 航空：正確的運(yùn)送名稱（生物制品，B類”）,最小尺寸：方框邊線的寬度至少應(yīng)為2mm，字母和數(shù)字至少為6mm高。航空運(yùn)輸時(shí)方框每邊至少長為50mm。 顏色：未特別指定，標(biāo)記于外包裝上最外層，并與底色明顯不同，清晰可讀即可。 水陸運(yùn)輸（公路、鐵路和海路）：無需其他標(biāo)記 航空運(yùn)輸：帖明標(biāo)記，生物制品，B類”,申請(qǐng)單位,從事疾病預(yù)防控制、醫(yī)療、教學(xué)、科研、菌（毒）種保藏以及生物制品生

23、產(chǎn)的單位，因工作需要，可以申請(qǐng)運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本。,申請(qǐng)?jiān)谑?、自治區(qū)、直轄市行政區(qū)域內(nèi)運(yùn)輸,申請(qǐng)?jiān)谑　⒆灾螀^(qū)、直轄市行政區(qū)域內(nèi)運(yùn)輸?shù)?，由省、自治區(qū)、直轄市衛(wèi)生行政部門審批。省級(jí)衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)在5個(gè)工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定；符合法定條件的，頒發(fā)《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準(zhǔn)運(yùn)證書》;不符合法定條件的，應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說明理由。,申請(qǐng)跨省、自治區(qū)、直轄市運(yùn)輸,申請(qǐng)跨省、自治區(qū)、直

24、轄市運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的，應(yīng)當(dāng)將申請(qǐng)材料提交運(yùn)輸出發(fā)地省級(jí)衛(wèi)生行政部門進(jìn)行初審；對(duì)符合要求的，省級(jí)衛(wèi)生行政部門應(yīng)當(dāng)在3個(gè)工作日內(nèi)出具初審意見，并將初審意見和申報(bào)材料上報(bào)衛(wèi)生部審批。,衛(wèi)生部應(yīng)當(dāng)自收到申報(bào)材料后3個(gè)工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定。符合法定條件的，頒發(fā)《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本準(zhǔn)運(yùn)證書》；不符合法定條件的，應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說明理由。對(duì)于為控制傳染病暴發(fā)、流行或者突發(fā)公共衛(wèi)生事

25、件應(yīng)急處理的運(yùn)輸申請(qǐng)，省級(jí)衛(wèi)生行政部門與衛(wèi)生部之間可以通過傳真的方式進(jìn)行上報(bào)和審批；需要提交有關(guān)材料原件的，應(yīng)當(dāng)于事后盡快補(bǔ)齊。,運(yùn)輸申請(qǐng),申請(qǐng)單位在運(yùn)輸前應(yīng)當(dāng)向省級(jí)衛(wèi)生行政部門提出申請(qǐng)，并提交以下申請(qǐng)材料（原件一份，復(fù)印件三份）,申請(qǐng)材料,可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸申請(qǐng)表；法人資格證明材料（復(fù)印件）；接收高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的單位(以下簡(jiǎn)稱接收單位)同意接收的證明文件； 第七條第（二）、（三

26、）項(xiàng)所要求的證明文件（復(fù)印件）；容器或包裝材料的批準(zhǔn)文號(hào)、合格證書（復(fù)印件）或者高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸容器或包裝材料承諾書；其它有關(guān)資料。,接收單位應(yīng)具備的條件,具有法人資格；具備從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)資格的實(shí)驗(yàn)室；取得有關(guān)政府主管部門核發(fā)的從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產(chǎn)等的批準(zhǔn)文件。,專人護(hù)送,運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，應(yīng)當(dāng)有專人護(hù)送，護(hù)送人員不得少于兩

27、人。申請(qǐng)單位應(yīng)當(dāng)對(duì)護(hù)送人員進(jìn)行相關(guān)的生物安全知識(shí)培訓(xùn)。在護(hù)送過程中采取相應(yīng)的防護(hù)措施。,運(yùn)輸后續(xù)工作,《規(guī)定》第十六條 在運(yùn)輸結(jié)束后，申請(qǐng)單位應(yīng)當(dāng)將運(yùn)輸情況向原批準(zhǔn)部門書面報(bào)告。,運(yùn)輸審批流程,附:應(yīng)城市疾病預(yù)防控制中心手足口病樣本采集運(yùn)送要求,一、手足口病相關(guān)資料手足口病(Hand foot mouth disease, HFMD) 是由腸道病毒引起的傳染病，多發(fā)生于5歲以下的嬰幼兒，可引起發(fā)熱和手、足、口腔等部位的皮疹、潰瘍

28、，個(gè)別患者可引起心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜腦炎等并發(fā)癥。引發(fā)手足口病的腸道病毒有20多種，其中柯薩奇病毒(Cox Asckievirus) A16 型(Cox A16) 和腸道病毒71型（Enterovirus71.EV 71）最常見。從有關(guān)資料表明，HFMD的病原體經(jīng)歷了較大的變遷。對(duì)藥物具有抗性， 75％酒精，5％來蘇對(duì)腸道病毒沒有作用，對(duì)乙醚，去氯膽酸鹽等不敏感。但對(duì)紫外線及干燥敏感，各種氧化劑(高錳酸鉀、漂白粉等)、甲醛、碘酒

29、都能滅活。病毒在50 ℃可被迅速滅活，但1mol濃度二價(jià)陽離子環(huán)境可提高病毒對(duì)熱滅活的抵抗力，病毒在4 ℃可存活1年，在- 20 ℃可長期保存，在外環(huán)境中病毒可長期存活。,二、標(biāo)本采集對(duì)象,標(biāo)本采集對(duì)象是暴發(fā)疫情出現(xiàn)時(shí)手足口病的臨床診斷病例和病例發(fā)病所在社區(qū)（村）的臨近無病例的社區(qū)（村）或托幼機(jī)構(gòu)的5歲以下的兒童（作為健康對(duì)照人群）。用于病毒分離的標(biāo)本包括糞便、咽拭子和皰疹液，如果患者出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，可以采集腦脊液標(biāo)本。對(duì)于血清學(xué)診

30、斷，需要在急性期和恢復(fù)期采集雙份血清標(biāo)本。臨床標(biāo)本在運(yùn)輸和貯存過程中要避免反復(fù)凍融，如果不能確保-20℃的條件，應(yīng)該在0~8℃運(yùn)輸和保存。標(biāo)本應(yīng)冷凍運(yùn)輸，運(yùn)輸時(shí)要附有必要的信息，如標(biāo)本編號(hào)、發(fā)病日期和標(biāo)本采集日期。,三、標(biāo)本種類及采集、運(yùn)送,（一）糞便標(biāo)本采集病人發(fā)病7日內(nèi)的糞便標(biāo)本，用于病原檢測(cè)。糞便標(biāo)本采集量5~8g/份，采集后立即放入無菌采便管內(nèi)，4℃暫存立即(12h內(nèi))送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，－20℃以下低溫冷凍保藏，需長期保存的標(biāo)本存于

31、－70℃冰箱。（二）咽拭子標(biāo)本采集病人發(fā)病3日內(nèi)的咽拭子標(biāo)本，用于病原檢測(cè)。用專用采樣棉簽，適度用力拭抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部位，應(yīng)避免觸及舌部；迅速將棉簽放入裝有3~5ml保存液（維持液或生理鹽水，推薦使用維持液）的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封，以防干燥。4℃暫存立即（12h內(nèi)）送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，－20℃以下低溫冷凍保藏，需長期保存的標(biāo)本存于－70℃冰箱。,（三）血清標(biāo)本采集急性期（發(fā)病0~3d）和恢復(fù)期（發(fā)病14~

32、30d）雙份配對(duì)血清用于抗體檢測(cè)。靜脈采集3~5ml全血，置于真空無菌采血管中，自凝后，分離血清，將血清置于－20℃以下冰箱中冷凍保存。（四）皰疹液在手足口病的實(shí)驗(yàn)室診斷中，從皰疹液中分離到病毒具有很高的診斷價(jià)值，可同時(shí)采集多個(gè)皰疹作為一份標(biāo)本。先用75%的酒精對(duì)皰疹周圍的皮膚進(jìn)行消毒，然后用消毒針將皰疹挑破用棉簽蘸取皰疹液，迅速將棉簽放入內(nèi)裝有3~5ml保存液（維持液或生理鹽水，推薦使用維持液）的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，

33、旋緊管蓋并密封。所采集標(biāo)本4℃暫存立即（12h內(nèi)）送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，－20℃以下低溫冷凍保藏，需長期保存的標(biāo)本存于－70℃冰箱。,（五）腦脊液標(biāo)本出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的病例，要采集腦脊液標(biāo)本，進(jìn)行病原和抗體檢測(cè)，從腦脊液中分離病毒也具有很高的診斷價(jià)值。采集時(shí)間為出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀后3天內(nèi)，采集量為1.0~2.0ml。采集后立即裝入無菌帶墊圈的凍存管中，4℃暫存立即(12h內(nèi))送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，－20℃以下低溫冷凍保藏，需長期保存的標(biāo)本存于－70℃冰箱。

34、（六）病例密切接觸者的標(biāo)本采集選擇典型病例所在的托幼機(jī)構(gòu)、或所在村，以新發(fā)病例密切接觸者為采樣對(duì)象，采集單份糞便和血清標(biāo)本。（七）健康對(duì)照的標(biāo)本采集選擇患兒發(fā)病所在社區(qū)（村）的臨近無病例的社區(qū)（村）或托幼機(jī)構(gòu)。采集5歲以下的兒童單份糞便和血清標(biāo)本。,三、標(biāo)本采集注意事項(xiàng),在手足口病的實(shí)驗(yàn)室診斷中，從皰疹液或腦脊液中分離病毒具有很高的診斷價(jià)值，但對(duì)于不同血清型的腸道病毒，腦脊液中的病毒分離率是大不相同的。用于采集咽拭子的無菌拭子要