伯勞特-培訓(xùn)資料hp

1、幽門螺桿菌免疫印跡試劑盒,簡(jiǎn)要介紹及實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程,幽門螺桿菌免疫印跡試劑盒,簡(jiǎn)要介紹及實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,醫(yī)療器械注冊(cè)證,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,醫(yī)療器械產(chǎn)品生產(chǎn)制造認(rèn)可表,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,生物制品檢定報(bào)告書(shū),2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,前　言,20世紀(jì)醫(yī)學(xué)界的一個(gè)重要事件，一個(gè)醫(yī)學(xué)工作者懷疑和尋求了一個(gè)多世紀(jì)的微生物——幽門螺

2、桿菌終于被發(fā)現(xiàn)了！幽門螺桿菌的發(fā)現(xiàn)和分離培養(yǎng)成功是科學(xué)敏銳性和勤奮、幸運(yùn)相結(jié)合的結(jié)果。這一事件成為胃腸病研究史上的一次革命，一個(gè)里程碑。從此以后，胃腸病學(xué)進(jìn)入了一個(gè)新紀(jì)元。,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,幽門螺桿菌的發(fā)現(xiàn),幽門螺桿菌（Helicobacter pylori,簡(jiǎn)稱HP）HP是一種需氧菌，弧形、革蘭氏陰性菌，菌體寬0.5～1.0um，長(zhǎng)2.5～4.0um，有4～7條鞭毛。是1983年由Barry Marsha

3、ll和Rodin Warrem在澳大利亞首先分離出來(lái)的。大量臨床研究證明：HP感染是慢性胃炎、胃十二指腸潰瘍和胃癌的重要致病因素，1994年世界衛(wèi)生組織（WHO）已將其列為第一類（即肯定）的生物致癌因子。,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,在臨床上HP可分為兩種類型：Ⅰ型,為產(chǎn)細(xì)胞毒素HP菌株，其檢出率約占總HP的50％～60％，應(yīng)用免疫印跡技術(shù)，顯示其免疫活性蛋白區(qū)帶有128、116、110、95、91、66、60、5

4、4、50、33和30KD等。其中細(xì)胞毒（Cag A）蛋白與128、116和110KD區(qū)帶有關(guān)，空泡毒素(Vac A)蛋白與95和91KD區(qū)帶有關(guān)，尿素酶蛋白與66、60、33和30KD區(qū)帶有關(guān)，鞭毛蛋白與54和50KD區(qū)帶有關(guān)。這類菌株能使胃上皮細(xì)胞出現(xiàn)空泡、變形和損害，易引起潰瘍和誘發(fā)癌變。Ⅱ型，是不產(chǎn)生細(xì)胞毒素的HP，即Cag A(-)和Vac A(-)株，這一類HP菌株毒性較小，感染后一般只是引起慢性淺表性胃炎而無(wú)臨床癥狀。

5、世界上超過(guò)半數(shù)的人感染HP，但并不是所有的HP都產(chǎn)生空泡毒素，只有50%—60%具有空泡毒素活性的HP才是產(chǎn)毒菌株。因此對(duì)指導(dǎo)HP感染的治療具有重要的意義。,HP分型的意義,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,HP與慢性胃炎的關(guān)系,HP與慢性胃炎的關(guān)系,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,HP的致病作用,HP感染與胃、十二指腸潰瘍之間有密切關(guān)系,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,胃癌與萎縮性胃炎和腸上皮

6、化生有密切關(guān)系，這種病理學(xué)變化一直認(rèn)為是癌前病變。 Eurogast研究小組認(rèn)為，100%伴有HP感染的人群中胃癌的危險(xiǎn)性比無(wú)HP感染的人群增加近6倍。 1994年，世界衛(wèi)生組織（WHO）已將HP列為第一類生物致癌因子。,HP的致病作用,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,臨床常用HP檢測(cè)方法比較,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,免疫印跡簡(jiǎn)介 印跡技術(shù)是本世紀(jì)分子生物學(xué)領(lǐng)域三大發(fā)現(xiàn)之

7、一。它與內(nèi)切酶的發(fā)現(xiàn)和PCR基因擴(kuò)增技術(shù)，給人類生物工程帶來(lái)了革命性進(jìn)展。它的基本原理是將凝膠電泳與固相免疫結(jié)合起來(lái)，主要有三個(gè)工序： 將蛋白質(zhì)經(jīng)凝膠電泳按分子量大小不同依次分離； 將分離的組分轉(zhuǎn)印到印跡膜上； 對(duì)轉(zhuǎn)印到印跡膜的蛋白成分進(jìn)行免疫學(xué)檢測(cè)。,免疫印跡簡(jiǎn)介,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,HP抗體免疫印跡檢測(cè)之基本原理 本試驗(yàn)是將標(biāo)準(zhǔn)的HP產(chǎn)毒株【CagA(+)和VacA(+)】的各種抗原成分提取

8、出來(lái)，用聚丙烯酰胺凝膠電泳按分子量大小不同依次分開(kāi)，再將其轉(zhuǎn)印至印跡膜上，如果被檢者血清有相應(yīng)抗體，應(yīng)用酶聯(lián)免疫反應(yīng)，就會(huì)在抗原的相應(yīng)位置出現(xiàn)顯色區(qū)帶，據(jù)此可判斷出被檢血清中各種HP抗體。根據(jù)抗體的不同可推斷HP類型，根據(jù)顯色帶的強(qiáng)弱、消長(zhǎng)可觀察治療效果，預(yù)測(cè)潰瘍有無(wú)復(fù)發(fā)的可能性。,HP免疫印跡檢測(cè)的基本原理,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,各種胃、十二指腸疾病：包括胃、十二指腸潰瘍、慢性胃炎、胃癌和胃淋巴瘤等；非潰瘍性

9、消化不良；缺鐵性貧血口服鐵劑治療效果不佳者；兒童消化不良或不明原因的生長(zhǎng)發(fā)育遲緩者。,適應(yīng)癥,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,本檢查無(wú)任何禁忌癥，不需要空腹可隨進(jìn)采血檢測(cè)。,禁忌癥,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,本檢查安全可靠，無(wú)任何副作用，尤其適用于兒童、孕婦HP感染的檢測(cè)。,實(shí)驗(yàn)安全性,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,HP抗體免疫印跡試劑盒特點(diǎn),非創(chuàng)傷性HP檢測(cè)技術(shù)；

10、 能直接觀察HP血清學(xué)反應(yīng)全貌，包括了CagA、VacA和尿素酶亞單位；國(guó)際上公認(rèn)的HP標(biāo)準(zhǔn)株和質(zhì)控血清確保了檢測(cè)的可靠性；方法簡(jiǎn)單，不需任何輔助設(shè)備；檢測(cè)快速，整個(gè)時(shí)間僅需2小時(shí)；標(biāo)本需要量少，僅需10微升被檢血清；特異性強(qiáng)（96.0%）；敏感性高（98.4%）。,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,試劑盒組成（按40人份計(jì)）,,濃縮洗滌液

11、 2×25ml酶聯(lián)試劑 0.5ml顯色劑A液 25ml顯色劑B液 25ml終止液 25ml印跡薄膜(置反應(yīng)槽內(nèi)) 5

12、5;8條說(shuō)明書(shū)(含《標(biāo)準(zhǔn)帶》) 一份,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,幽門螺桿菌試劑盒的操作步驟,實(shí)驗(yàn)要準(zhǔn)備的材料：蒸餾水若干；1000ul可調(diào)加樣槍一支、10ul加樣槍一支及相應(yīng)的加樣槍吸嘴若干；500ml量杯一個(gè)、500ml量筒一個(gè)；搖床或溫箱一臺(tái)；廢物桶一個(gè)等。,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,1 在量杯中將濃縮洗滌液用蒸餾水按 1：10 的比例稀釋成洗滌應(yīng)用液

13、。 2 每槽加入洗滌應(yīng)用液1ml， 再加入待測(cè)血清或全血10ul， 放在搖床上搖動(dòng)30分鐘。（或搖動(dòng)混勻1分鐘后，置37℃溫箱中孵育30分鐘） 3 取出反應(yīng)槽，棄去槽中液體，并在平鋪的紙巾上將其倒置經(jīng)磕以拍干剩余液體，每槽加入洗滌液1ml，搖動(dòng)洗滌1分鐘，棄去槽中液體，并在平鋪的紙巾上將其倒置經(jīng)磕以拍干剩余液體，重復(fù)洗滌3—4次；,幽門螺桿菌試劑盒的操作步驟,幽門螺桿菌試劑盒的操作步驟,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品

14、公司,4 每槽加入洗滌應(yīng)用液500ul，再加入酶聯(lián)試劑10ul，放在搖床上搖動(dòng)30分鐘。（或搖動(dòng)混勻1分鐘后，置37℃溫箱中孵育30分鐘） 5 同（ 3 ）洗滌。 6 加入顯色劑 A 和 B 各0.5ml， 5—10分鐘觀察結(jié)果。 7 待陽(yáng)性帶顯色清晰，即加終止液0.5ml，2分鐘后棄去液體，用自來(lái)水沖洗后取出印跡膜，等干后對(duì)比《標(biāo)準(zhǔn)帶》判斷結(jié)果。,幽門螺桿菌試劑盒的操作步驟,2024/3/21,深圳市伯勞特生物制品公司,