細(xì)胞工程(宿州學(xué)院的,為師弟師妹們解決一下憂慮)

1、名詞解釋名詞解釋1細(xì)胞工程細(xì)胞工程：利用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)方法以生物細(xì)胞或組織為研究對象，按照人們的意愿進(jìn)行工程學(xué)操作，從而改變生物性狀，或產(chǎn)生新物種貨品系。2植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞全能性：每個植物細(xì)胞都具有該物種的全部遺傳信息，在適宜條件下具有發(fā)育成完整植株的能力。3外植體外植體：把由活植物體上切取下來的進(jìn)行培養(yǎng)的那部分組織或器官叫外植體4愈傷組織：愈傷組織：通常指植物受到機(jī)械、動物或微生物等傷害后，創(chuàng)傷部位的細(xì)胞脫分化而不斷增殖

2、形成松散排列、無特定結(jié)構(gòu)和功能的非器官化組織。5脫分化：脫分化：離體條件下，細(xì)胞脫離原狀態(tài)而回復(fù)到分生狀態(tài)，這一會變過程稱脫分化或去分化。6再分化再分化：脫分化的細(xì)胞在特定條件誘導(dǎo)下，再次開始新的分化發(fā)育過程，最終形成各種組織、器官或胚狀體等，稱再分化。7胚狀體胚狀體：離體培養(yǎng)下沒有經(jīng)過受精過程，但經(jīng)過了胚胎發(fā)育過程所形成的胚的類似物，（不管培養(yǎng)的細(xì)胞是體細(xì)胞還是生殖細(xì)胞），統(tǒng)稱為體細(xì)胞或胚狀體。8人工種子人工種子：通過植物組織培養(yǎng)中所

3、產(chǎn)生的體細(xì)胞胚或珠芽等包埋在“人工胚乳”和“人工種皮”里，制成的具有播種功能、類似天然種子的顆粒。9胚胎培養(yǎng)胚胎培養(yǎng)：是植物組織培養(yǎng)的一個主要領(lǐng)域。植物胚胎培養(yǎng)是指對植物的胚（種胚）及胚器官（如子房、胚珠）進(jìn)行人工離體無菌培養(yǎng)，使其發(fā)育成幼苗的技術(shù)。10原生質(zhì)體培養(yǎng)原生質(zhì)體培養(yǎng)：將植物細(xì)胞游離成原生質(zhì)體，在適宜培養(yǎng)條件下，使其再生細(xì)胞壁，進(jìn)而分裂形成愈傷組織或胚狀體，最后發(fā)育形成完整植株。11體細(xì)胞雜交體細(xì)胞雜交：原生質(zhì)體融合也叫做體細(xì)

4、胞雜交，使分離出來的不同親本的原生質(zhì)體，在人工控制條件下，相互融合成一體，形成雜種細(xì)胞，并進(jìn)一步發(fā)育成雜種植株的技術(shù)。12單細(xì)胞培養(yǎng)單細(xì)胞培養(yǎng)：指從外植體、愈傷組織、群體細(xì)胞或者細(xì)胞團(tuán)中分離得到單細(xì)胞，然后在一定條件下對其進(jìn)行培養(yǎng)的過程。13平板培養(yǎng)法平板培養(yǎng)法：將單個細(xì)胞與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合后平鋪一薄層在培養(yǎng)皿底上的培養(yǎng)法。14看護(hù)培養(yǎng)看護(hù)培養(yǎng)：指用一塊活躍生長的愈傷組織來看護(hù)單個細(xì)胞，并使其生長和增殖的方法。15動物細(xì)胞與組織

5、培養(yǎng)：是從動物體內(nèi)取出細(xì)胞或者組織，模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，在無菌、適溫和豐富的營養(yǎng)條件下，使離體細(xì)胞或者組織生存、生長并維持結(jié)構(gòu)和功能的一門技術(shù)。是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。16接觸性抑制接觸性抑制：由細(xì)胞接觸而抑制細(xì)胞運(yùn)動的現(xiàn)象稱為接觸抑制.接觸抑制是體外培養(yǎng)中某些貼附型細(xì)胞生長特性之一.由于細(xì)胞之間有接觸抑制特性一般的正常細(xì)胞并不互相重疊于其上而生長而是呈單層細(xì)胞生長.但腫瘤細(xì)胞由于無接觸抑制而能夠繼續(xù)移動和增殖導(dǎo)致細(xì)胞向三維空間擴(kuò)展使細(xì)胞

6、堆積.因此接觸抑制可作為區(qū)別正常細(xì)胞與癌細(xì)胞之一.密度抑制密度抑制：當(dāng)細(xì)胞密度進(jìn)一步增大，培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少，代謝產(chǎn)物增多時，細(xì)胞因營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響，則發(fā)生密度抑制，導(dǎo)致細(xì)胞分裂停止的現(xiàn)象。17有限細(xì)胞系有限細(xì)胞系：原代細(xì)胞經(jīng)過一次傳代后，形成的細(xì)胞系。如果不能繼續(xù)傳代或傳代有限，稱為“有限細(xì)胞系”無限細(xì)胞系無限細(xì)胞系：原代細(xì)胞經(jīng)過一次傳代后，形成的細(xì)胞系。如果可以連續(xù)傳代則稱為“連續(xù)細(xì)胞系”，細(xì)胞獲得不死性（持久增殖能力）。

7、18飼養(yǎng)細(xì)胞飼養(yǎng)細(xì)胞：即滋養(yǎng)細(xì)胞，一層經(jīng)過特殊處理的用做克隆細(xì)胞底物的細(xì)胞層。19干細(xì)胞干細(xì)胞：是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。20胚胎工程胚胎工程：指以動植物胚胎為研究對象而產(chǎn)生的一系列技術(shù)操作，如胚胎移植、胚胎冷凍保存、胚胎分割、體外胚胎生產(chǎn)、動物克隆、性別控制及基因?qū)氲取?1：胚胎移植胚胎移植：指對優(yōu)秀雌性動物進(jìn)行超數(shù)排卵處理，在其發(fā)情配種后一定時間內(nèi)從其生殖道取出早期胚胎，移植到同期發(fā)情的普通雌性動物生殖道的相應(yīng)部位，讓其

8、生產(chǎn)后代的技術(shù)。22：超數(shù)排卵超數(shù)排卵：在動物發(fā)情周期的適當(dāng)時期，用促性腺激素進(jìn)行處理，誘發(fā)其卵巢上大量卵泡同時發(fā)育并排卵的技術(shù)，簡稱超排。23固定化培養(yǎng)固定化培養(yǎng)：將游離的細(xì)胞包埋或吸附在多糖或多聚化合物制備成的網(wǎng)狀支持物中或表面，培養(yǎng)液呈流動狀態(tài)進(jìn)行無菌培養(yǎng)。種單細(xì)胞中所占的比例。植板率=（每個平板形成的細(xì)胞團(tuán)數(shù)）(每個平板接種的細(xì)胞總數(shù))31.植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)主要有懸浮培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)和固定化培養(yǎng)固定化培養(yǎng)32.成批培養(yǎng)分批培養(yǎng)：將

9、一定量細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)接種到一定容積的密閉容器中進(jìn)行培養(yǎng)。它是進(jìn)行細(xì)胞生長和細(xì)胞分裂的生理生化研究常用的培養(yǎng)方法。特點(diǎn)：（1）除氣體交換外，培養(yǎng)系統(tǒng)不與外部進(jìn)行物質(zhì)交換。培養(yǎng)基體積固定；（2）必須適當(dāng)攪拌；（3）培養(yǎng)過程中，細(xì)胞生長，其數(shù)目不斷發(fā)生變化，呈S增長；（4）當(dāng)營養(yǎng)耗盡時，細(xì)胞停止分裂生長，完成培養(yǎng)過程，細(xì)胞和產(chǎn)物一次性收獲。但要進(jìn)行下一批培養(yǎng)，則需要繼代轉(zhuǎn)移。半連續(xù)培養(yǎng)：每隔一定時間倒出一定量的懸浮液，同時補(bǔ)充加入等量的新鮮培養(yǎng)

10、液33.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的生物反應(yīng)器有機(jī)械攪拌式生物反應(yīng)器、氣升式生物反應(yīng)器機(jī)械攪拌式生物反應(yīng)器、氣升式生物反應(yīng)器34.常用的超低溫保存方法可分為兩類，即冷凍誘導(dǎo)保護(hù)性脫水的超低溫保存冷凍誘導(dǎo)保護(hù)性脫水的超低溫保存和玻璃化處理的超低溫保存玻璃化處理的超低溫保存。超低溫保存植物種質(zhì)資源的程序包括培養(yǎng)材料的準(zhǔn)備、預(yù)處理、降溫冰凍及保存降溫冰凍及保存、解凍處理解凍處理、細(xì)胞活力和變異的評價、植株再生等幾個步聚。傳統(tǒng)的降溫冷凍方法：快速冰凍法、

11、慢速冰凍法、兩步法、逐級冰凍法解凍一般采用快速化凍方法，即將液氮保存后的材料在35?C－40?C溫水浴中化凍35.體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞依據(jù)它們是否貼附在支持物表面生長而分為兩大類型，即：貼附型細(xì)胞和懸浮型細(xì)胞。貼附型細(xì)胞和懸浮型細(xì)胞。體外貼附型細(xì)胞形態(tài)大致可以分為：成纖維型細(xì)胞、上皮型細(xì)胞、游走型細(xì)胞、多形型細(xì)胞36.培養(yǎng)細(xì)胞生命周期有三個階段：原代培養(yǎng)期、傳代期、衰退期37.冷凍保存細(xì)胞應(yīng)選擇原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)早期原代培養(yǎng)及傳代培養(yǎng)早期

12、的細(xì)胞。進(jìn)行各種實驗的每一代中最好階段是對數(shù)期對數(shù)期38.培養(yǎng)基和各種培養(yǎng)用液有平衡鹽溶液衡鹽溶液PBS、消化液、消化液。最常用的消化液有胰蛋白酶、胰蛋白酶、EDTA39.動物細(xì)胞培養(yǎng)基可分為天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基及合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基兩大類40.大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)適宜溫度：37℃，最適pH為7.27.4之間41.實驗室中動物細(xì)胞的培養(yǎng)方法有：懸滴培養(yǎng)法、培養(yǎng)瓶培養(yǎng)法、旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法、灌注小室培養(yǎng)法、培養(yǎng)板培養(yǎng)法、懸滴培養(yǎng)法、培養(yǎng)瓶培

13、養(yǎng)法、旋轉(zhuǎn)管培養(yǎng)法、灌注小室培養(yǎng)法、培養(yǎng)板培養(yǎng)法、克隆培養(yǎng)法（單細(xì)胞分離培養(yǎng)法）克隆培養(yǎng)法（單細(xì)胞分離培養(yǎng)法）42.細(xì)胞克?。▎渭?xì)胞分離培養(yǎng)），即把一個單細(xì)胞從一個群體中分離出來單獨(dú)培養(yǎng)，使之重新繁衍成為一個新的細(xì)胞群體的培養(yǎng)技術(shù)。最常用的克隆培養(yǎng)法是稀釋鋪板法。稀釋鋪板法。43.細(xì)胞轉(zhuǎn)化及惡性程度檢查一般利用軟瓊脂培養(yǎng)法軟瓊脂培養(yǎng)法檢測44.細(xì)胞生長狀況?①細(xì)胞計數(shù)，血球計數(shù)板和電子細(xì)胞計數(shù)儀?②生長曲線：（潛伏期，對數(shù)生長期，水平靜

14、止期）由于細(xì)胞基數(shù)和生長進(jìn)度不同，生長曲線不一致。?③細(xì)胞分裂指數(shù)，分裂細(xì)胞占全部細(xì)胞的比例?④細(xì)胞貼壁率=貼壁存活細(xì)胞接種細(xì)胞100%?⑤細(xì)胞周期時間測定：用同位素標(biāo)記，流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞同期?⑥細(xì)胞活力檢測：MTT45.動植物細(xì)胞融合的方法：仙臺病毒法、PEG誘導(dǎo)融合法、電融合法46.干細(xì)胞按分化潛能大小來分類：全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、單能干細(xì)胞；全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞、單能干細(xì)胞；根據(jù)來源來分：來源于胚胎來源于胚胎胚胎干細(xì)胚胎干細(xì)