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1、附錄附錄IIC顯微鑒別法顯微鑒別法顯微鑒別法系指用顯微鏡對(duì)藥材(飲片)切片、粉末、解離組織或表面制片及含飲片粉末的制劑中飲片的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行鑒別的一種方法。鑒別時(shí)選擇具有代表性的供試品,根據(jù)各品種鑒別項(xiàng)的規(guī)定制片。制劑根據(jù)不同劑型適當(dāng)處理后制片。一、藥材(飲片)顯微制片1.橫切片或縱切片制片取供試品欲觀察部位,經(jīng)軟化處理后,用徒手或滑走切片法,切成10~20um的薄片,必要時(shí)可包埋后切片。選取平整的薄片置載玻片上,根據(jù)觀察
2、對(duì)象不同,滴加甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其他試液1~2滴,蓋上蓋玻片。必要時(shí)滴加水合氯醛試液后,在酒精燈上加熱透化,并滴加甘油乙醇試液或稀甘油,蓋上蓋玻片。2.粉末制片供試品粉末過(guò)四號(hào)篩,挑取少許置載玻片上,滴加甘油醋酸試液、水合氯醋試液或其他適宜的試液,蓋上蓋玻片。必要時(shí),按上法加熱透化。3.表面制片將供試品濕潤(rùn)軟化后,剪取欲觀察部位約4mm2一正一反置載玻片上,或撕取表皮,加適宜的試液或加熱透化后,蓋上蓋玻片。4.解離組織制片將供
3、試品切成約5mm、直徑約2mm的段或厚約1mm的片,如供試品中薄壁組織占大部分,木化組織少或分散存在,采用氫氧化鉀法,若供試品質(zhì)地堅(jiān)硬,木化組織較多或集成較大群束,采用硝鉻酸法或氯酸鉀法。(1)氫氧化鉀法將供試品置試管中,加5%氫氧化鉀溶液適量,加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾去堿液,加水洗滌后,取少量置載玻片上,用解剖針?biāo)洪_(kāi),滴加稀甘油,蓋上蓋玻片。(2)硝鉻酸法將供試品置試管中,加硝鉻酸試液適量,放置至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾去酸
4、液,加水洗滌后,照上法裝片。(3)氯酸鉀法將供試品置試管中,加硝酸溶液(1→2)及氯酸鉀少量,緩緩加熱,待產(chǎn)生的氣泡漸少時(shí),再及時(shí)加入氯酸鉀少量,以維持氣泡穩(wěn)定地發(fā)生,至用玻璃棒擠壓能離散為止,傾去酸液,加水洗滌后,,照上法裝片。5.花粉粒與孢子制片取花粉、花藥(或小的花)、孢子或孢子囊群(干(2)用甘油醋酸試液裝片,置偏光顯微鏡下觀察,未糊化的淀粉粒顯偏光現(xiàn)象;已糊化的無(wú)偏光現(xiàn)象。2.糊粉粒(1)加碘試液,顯棕色或黃棕色;(2)加硝酸
5、汞試液,顯磚紅色。材料中如含有多量脂肪油,應(yīng)先用乙醚或石油醚脫脂后進(jìn)行試驗(yàn)。3.脂肪油、揮發(fā)油、樹脂(1)加蘇丹Ⅲ試液,顯橘紅色、紅色或紫紅色。(2)加90%乙醇,脂肪油和樹脂不溶解(蓖麻油及巴豆油例外),揮發(fā)油則溶解。4.菊糖加10%a萘酚乙醇溶液,再加硫酸,顯紫紅色并溶解。5.黏液加釕紅試液,顯紅色。6.草酸鈣結(jié)晶(1)加稀醋酸不溶解,加稀鹽酸溶解而無(wú)氣泡發(fā)生。(2)加硫酸溶液(1→2)逐漸溶解,片刻后析出針狀硫酸鈣結(jié)晶。7.碳酸鈣
6、結(jié)晶(鐘乳體)加稀鹽酸溶解,同時(shí)有氣泡發(fā)生。8.硅質(zhì)加硫酸不溶解。五、顯微測(cè)量系指用目鏡測(cè)微尺,在顯微鏡下測(cè)量細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)含物等的大小。1.目鏡測(cè)微尺放在目鏡筒內(nèi)的一種標(biāo)尺,為一個(gè)直徑18~20mm的圓形玻璃片,中央刻有精確等距離的平等線刻度,常為50格或100格。(如圖1)2.載物臺(tái)測(cè)微尺在特制的載玻片中央粘貼一刻有精細(xì)尺度的圓形玻片。通常將長(zhǎng)1mm(或2mm)精確等分成100(或200)小格,每1小格長(zhǎng)為10um,用以標(biāo)定目鏡測(cè)微尺
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