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1、崇州醫(yī)院細(xì)胞治療中心標(biāo)準(zhǔn)操作程序CIK細(xì)胞制備SOPTC001第1頁(yè)共12頁(yè)CIKCIK細(xì)胞制備標(biāo)準(zhǔn)操作程序細(xì)胞制備標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的和范圍:1.1目的:規(guī)范CIK細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程,保證操作準(zhǔn)確,避免人為操作誤差導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)效果不良或失敗。1.2范圍:該規(guī)程適用于實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)人員CIK細(xì)胞培養(yǎng)操作的全過(guò)程。2原理:2.1外周血單核細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞刺激因子誘導(dǎo)后分分化為CIK細(xì)胞。3相關(guān)文件:3.14物料:4.1試劑:75%酒精,碘伏,生理鹽水,
2、淋巴細(xì)胞分離液(Ficoll),GTT551培養(yǎng)基CIK條件培養(yǎng)基1、CIK條件培養(yǎng)基2。4.2儀器設(shè)備:生物安全柜,離心機(jī),水浴鍋,二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱,電動(dòng)移液槍?zhuān)?0ul移液槍?zhuān)?00ul移液槍?zhuān)t(yī)用剪崇州醫(yī)院細(xì)胞治療中心標(biāo)準(zhǔn)操作程序CIK細(xì)胞制備SOPTC001第3頁(yè)共12頁(yè)后放入生物安全柜中備用。7.1.3單核細(xì)胞分離液(Ficoll)提前30min從4℃冰箱取出待用。7.1.4單核細(xì)胞分離液(Ficoll),GTT551培養(yǎng)基
3、,血清,在實(shí)驗(yàn)前需提前準(zhǔn)備好放入生物安全柜中,以便其恢復(fù)常溫,否則將會(huì)影響實(shí)驗(yàn)效果。7.2分離7.2.1制備血漿:7.2.1.1將樣本從醫(yī)療器械盒中小心地取出,用酒精擦拭消毒后放入生物安全柜。7.2.1.2打開(kāi)器械盒(注意手不得從打開(kāi)的器械盒上方通過(guò)),用生物安全柜中的止血鉗從器械盒中取出滅菌指示卡,確認(rèn)已滅菌。取出器械盒中止血鉗,用其夾緊血袋軟管下方。7.2.1.3用浸泡過(guò)碘伏和酒精的棉簽對(duì)軟管中上部交替消毒兩次,(先碘伏,后酒精,如
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