四環(huán)素族抗生素定向發(fā)酵

1、吉林化工學(xué)院生物工程專業(yè)實驗報告實驗題目：四環(huán)素族抗生素定向發(fā)酵實驗題目：四環(huán)素族抗生素定向發(fā)酵Tetracyclineantibioticsdirectionalfermentation課程類型：課程類型：生物工程專業(yè)實驗生物工程專業(yè)實驗實驗類型：實驗類型：設(shè)計型設(shè)計型專業(yè)班級：專業(yè)班級：學(xué)生姓名：學(xué)生姓名：學(xué)生學(xué)號：學(xué)生學(xué)號：合作者：合作者：指導(dǎo)教師：指導(dǎo)教師：提交日期：提交日期：20152015年1111月2323日吉林化工學(xué)院J

2、ilinInstituteofChemicalTechnology1（1）抑制氯化酶的活力利用硫醇基苯駢噻唑（M促進(jìn)劑）與氯化酶的激活劑－二價銅離子作用，降低銅離子的濃度，從而使氯化酶的活力下降。（2）利用競爭性抑制劑來減少氯化酶的量加入一種基質(zhì)，其能與某一反應(yīng)的酶作用，使此反應(yīng)的酶量減少，從而使此反應(yīng)受到抑制的現(xiàn)象一般稱競爭抑制。本實驗利用溴離子在生物合成中對氯離子有競爭性抑制作用的原理。據(jù)研究四環(huán)素與金霉素有一共同的代謝分叉的間體，

3、此中間體進(jìn)一步的代謝方向取決于不同酶活力的大小，其示意圖見（圖3－1）圖3－1四環(huán)素和金霉素分叉代謝示意圖圖3－1中A為四環(huán)素和金霉素的代謝分叉中間體，在此之前，四環(huán)素和金霉素的代謝途徑相同，A物質(zhì)在E1酶的作用下生成B物質(zhì)，它進(jìn)一步代謝即生成四環(huán)素（TC）。A物質(zhì)在有氯離子存在時，在氯化酶E2的作用下生成ACl，然后再在E1酶的作用下生成BCl，再進(jìn)一步反應(yīng)即生成金霉素(CTC)。因此，A物質(zhì)究竟向那個方向代謝，則取決于系統(tǒng)中氯離子與

4、氯化酶存在的多少，所以若把氯化酶的量減少，反應(yīng)就會較多的向四環(huán)素方向進(jìn)行。現(xiàn)考慮加入溴化物作為競爭性抑制劑，因為氯化酶E2也可以催化溴化物的形成，從而消耗掉一些氯化酶減少金霉素的形成，在反應(yīng)中也形成了一些溴四環(huán)素，但此反應(yīng)速度較慢，整個反應(yīng)還是形成較多四環(huán)素。此反應(yīng)中隨溴離子量的增加四環(huán)素量也有所增加，但隨氯離子的增加四環(huán)素的量會減少。上述兩個作用都有一定的局限性，第一個措施受硫醇苯駢噻唑毒性的影響，第二個措施受溴四環(huán)素的量和氯離子的限