實驗九 納他霉素的發(fā)酵生產(chǎn)

1、實驗九實驗九納他霉素的發(fā)酵生產(chǎn)、分離純化及檢測納他霉素的發(fā)酵生產(chǎn)、分離純化及檢測1一.實驗?zāi)康模簩嶒災(zāi)康模和ㄟ^搖瓶發(fā)酵生產(chǎn)納他霉素，加深對好氧發(fā)酵過程中菌體生長與次級代謝產(chǎn)物積累的關(guān)系的認(rèn)識，積累代謝調(diào)控發(fā)酵及相關(guān)產(chǎn)品分離純化和分析檢測的經(jīng)驗。二.實驗原理：實驗原理：納他霉素（Natamycin）是一種多烯大環(huán)內(nèi)酯類抗真菌劑，也稱游鏈霉素或匹馬霉素(Pimaricin)。它是由5個多聚乙酰合成酶基因編碼的多酶體系合成。由于它能夠?qū)Ｐ缘匾?/p>

2、制酵母菌和霉菌，被廣泛應(yīng)用于食品防腐和真菌引起的疾病的治療。1.納他霉素的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)圖81納他霉素的分子結(jié)構(gòu)1此實驗為綜合性設(shè)計性實驗，需至少24學(xué)時。以下時間安排供參考。第一周：第一周：老師做好斜面；學(xué)生領(lǐng)取并清洗儀器，接種斜面制備孢子，配制種子培養(yǎng)基。第二周：第二周：學(xué)生在顯微鏡下觀察孢子的形狀；將斜面孢子接種到種子培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)；配制發(fā)酵培養(yǎng)基。24hr后在顯微鏡下觀察檢查種子培養(yǎng)物的形態(tài)，將培養(yǎng)1天的種子接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中搖瓶

3、培養(yǎng)；做標(biāo)準(zhǔn)曲線。第三周：第三周：在顯微鏡下觀察培養(yǎng)物的形態(tài)，測定發(fā)酵48小時后的納他霉素含量、還原糖含量、氨氮含量。并每隔24hr在顯微鏡下觀察培養(yǎng)物的形態(tài)，測定相應(yīng)發(fā)酵時間后的納他霉素含量、還原糖含量、氨氮含量。直到發(fā)酵196小時為止。第四周：第四周：合并所有發(fā)酵液，提取純化納他霉素。第五周：第五周：按正式發(fā)表的科技論文格式完成實驗報告。細(xì)菌的細(xì)胞壁及細(xì)胞質(zhì)膜不存在這些類甾醇化合物，所以納他霉素對細(xì)菌沒有作用。三.藥品及儀器設(shè)備藥品

4、及儀器設(shè)備1.藥品酵母提取粉、麥芽提取粉、葡萄糖、瓊脂、蛋白胨、氯化鈉、大豆分離蛋白、麥芽糊精、酵母提取粉、乙醇、甲醇、20％NaOH、抗氧化劑BHA、1，2丙二醇、納他霉素標(biāo)準(zhǔn)品2.儀器設(shè)備250ml三角瓶、搖床、生化培養(yǎng)箱、離心機、紫外分光光度計四.操作步驟操作步驟1.孢子、種子液的制備和搖瓶發(fā)酵(1)菌種：褐黃孢鏈霉菌（Streptomycesgilvospeus）(2)斜面孢子培養(yǎng)①孢子培養(yǎng)基酵母提取粉4gL麥芽提取粉10gL葡