納他霉素產(chǎn)生菌基因組重排育種.pdf

1、納他霉素(Natamycin)是一種二十六元多烯大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，主要由納塔爾鏈霉菌(Streptomyces natalensis)、恰塔努加鏈霉菌(Streptomyces chatanoogensis)和褐黃孢鏈霉菌(Streptomyces gilvosporeus)等產(chǎn)生菌經(jīng)發(fā)酵過程生產(chǎn)的。它是一種高效、廣譜的抗真菌抗生素，由于其對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的毒性極低，現(xiàn)己在食品、醫(yī)療等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。本文圍繞如何提高納他霉素發(fā)酵產(chǎn)量，對(duì)

2、褐黃孢鏈霉菌的原生質(zhì)體制備、再生和融合及基因組重排育種等進(jìn)行了研究，主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下： 首先，對(duì)褐黃孢鏈霉菌的原生質(zhì)體制備和再生條件進(jìn)行了研究，考察了種齡、甘氨酸濃度、溶菌酶濃度、溶菌酶作用時(shí)間及溫度對(duì)制備褐黃孢鏈霉菌原生質(zhì)體的影響。同時(shí)對(duì)再生培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化，使原生質(zhì)體再生達(dá)到較佳的再生率和生長(zhǎng)狀態(tài)。總結(jié)出一套褐黃孢鏈霉菌原生質(zhì)體制備和再生培養(yǎng)的方法。 其次，對(duì)原生質(zhì)體融合的條件進(jìn)行了研究。通過紫外線滅活和熱滅活

3、原生質(zhì)體，進(jìn)行滅活雙親原生質(zhì)體融合，建立了一套適合褐黃孢鏈霉菌原生質(zhì)體融合的方法。 再次，以S.gilvosporeus SG-1為出發(fā)菌株，進(jìn)行原生質(zhì)體紫外線誘變育種，并篩選硫酸鏈霉素抗性突變株，獲得了4株高產(chǎn)突變株Strr-69(2364mg/L)、Strr-89(2468 mg/L)、Strr-111(2433 mg/L)、Strr-129(2398 mg/L)。 最后，以以上4株鏈霉素抗性高產(chǎn)菌株作為親本菌株，進(jìn)