豬肉中瘦肉精的檢測(cè)

1、豬肉中瘦肉精的檢測(cè)豬肉中瘦肉精的檢測(cè)豬肉中瘦肉精的檢測(cè)高峰101279012摘要鑒于鹽酸克倫特羅(瘦肉精)在動(dòng)物性食品中的殘留對(duì)人體和國(guó)民經(jīng)濟(jì)造成了巨大的危害，本文介紹了動(dòng)物肌肉組織中殘留鹽酸克倫特羅(瘦肉精)的幾種分析檢測(cè)方法，并對(duì)未來(lái)的發(fā)展方向作了展望。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：瘦肉精GCMSHPLCELISA1引言引言瘦肉精是一類藥物，而不是某一種特定的藥物，任何能夠促進(jìn)瘦肉生長(zhǎng)、抑制肥肉生長(zhǎng)的物質(zhì)都可以叫做“瘦肉精”。在中國(guó)，通常所說的瘦肉

2、精是指克倫特羅(Clenbuterol，CLB)，而普通消費(fèi)者則把此類藥物統(tǒng)稱為瘦肉精。當(dāng)它們以超過治療劑量5—10倍的用量用于家畜飼養(yǎng)時(shí)，即有顯著的營(yíng)養(yǎng)“再分配效應(yīng)”——促進(jìn)動(dòng)物體蛋白質(zhì)沉積、促進(jìn)脂肪分解抑制脂肪沉積，能顯著提高胴體的瘦肉率、增重和提高飼料轉(zhuǎn)化率，因此，β—受體激動(dòng)劑被大量非法用于畜牧生產(chǎn)，其中最常用的有克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇等。長(zhǎng)期食用含有β—受體激動(dòng)劑殘留的食品將對(duì)人體健康產(chǎn)生極大的危害，可誘發(fā)和加重心率失

3、常病人的病情，引起心室早搏，四肢、臉、頸部骨骼肌震顫；另外還能引起代謝紊亂，對(duì)糖尿病人可發(fā)生酸中毒或酮中毒。[1]鹽酸克倫特羅(Clenbuteerol，CLB)，又名克喘素、氨哮素、雙氯醇胺，俗名瘦肉精，化學(xué)名為α—[(叔丁氨基)甲基]—4—氨基—3，5—二氯苯甲醇鹽酸鹽，分子式為C12H18Cl12N2O?HCl，相對(duì)分子質(zhì)量為313.65。目前，檢測(cè)瘦肉精殘留常用的色譜技術(shù)有高效液相色譜(HPLC)、氣相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法(GC—M

4、S)、高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC—MS)、毛細(xì)管電泳法(CE)等。中國(guó)已將高效液相色譜法（HPLC）作為檢測(cè)飼料中鹽酸克倫特羅殘留的半確證法，將GC—MS法定為確證性方法，主要用于最后確認(rèn)和仲裁。對(duì)于動(dòng)物性食品，GBT5009.192—2003“動(dòng)物性食品中克倫特羅殘留量的測(cè)定”規(guī)定的第一法為氣相色譜—質(zhì)譜法，第二法為高效液相色譜法，第三法為酶聯(lián)免疫法。下面將會(huì)對(duì)這三種方法逐一進(jìn)行說明，并簡(jiǎn)單介紹毛細(xì)管電泳法（CE）。豬肉中瘦肉

5、精的檢測(cè)2.1.4結(jié)論結(jié)論該法在樣品提取后，用C18小柱和聚（甲基丙烯酸－乙二醇二甲基丙烯酸酯）整體柱進(jìn)一步富集凈化，經(jīng)N，O—雙三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA)衍生，選擇離子監(jiān)測(cè)方式進(jìn)行氣相色譜質(zhì)譜測(cè)定。該方法具有檢測(cè)限低、重現(xiàn)性好、回收率高、樣品用量少等特點(diǎn)，適合于豬肉樣品中鹽酸克倫特羅的定性、定量測(cè)定。但GC—MS的缺點(diǎn)是檢測(cè)過程煩瑣、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、需貴重儀器、難于操作、價(jià)格昂貴。2.2高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)[2

6、]HPLC適合測(cè)定熱不穩(wěn)定和強(qiáng)極性的β—激動(dòng)劑及其代謝產(chǎn)物，而且HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應(yīng)和質(zhì)譜(MS)等系統(tǒng)聯(lián)用，容易實(shí)現(xiàn)分析過程的自動(dòng)化。HPLC法中常用的檢測(cè)器有電化學(xué)檢測(cè)器、紫外檢測(cè)器。2.2.1材料與儀器材料與儀器甲醇：色譜純；試驗(yàn)用水：均為超純水；其余試劑：均為分析純；鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品：中國(guó)藥品生物制品檢定所；鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液：取鹽酸克倫特羅標(biāo)準(zhǔn)品24.98mg置于25mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀

7、釋至刻度，配成含鹽酸克倫特羅1mgmL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，貯于冰箱中，不同濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋而得；DionexAT330(美國(guó))高效液相色譜儀：由P680四元泵、UVD170U紫外檢測(cè)器和AT330恒溫箱組成；超聲波提取器(SB25200BTD)；離心機(jī)(6000rmin)；DSY22型電熱恒溫水浴鍋。2.2.2色譜條件色譜條件色譜柱采用DiamonsilODS2C18柱(5μm，150mm4.6mmI.D)；檢測(cè)波長(zhǎng)為244

8、nm；流動(dòng)相甲醇∶水=26∶74；流速1.0mLmin；柱溫30℃；進(jìn)樣量20μL。2.2.3樣品制備樣品制備取10g絞碎肉試樣，加0.1molL高氯酸20mL勻漿，超聲提取20min，80℃加熱30min，冷卻后離心(4000rmin)15min。沉淀加0.1molL高氯酸5mL洗滌、離心，將上清液合并，用1molL氫氧化鈉調(diào)pH至11，加入25mL乙醚，振蕩提取20min，回收有機(jī)相，再用20mL乙醚重復(fù)萃取2次，合并有機(jī)相，蒸發(fā)至