實(shí)驗(yàn)1 葉綠體的分離與熒光分析

1、中國(guó)海洋大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告姓名：常天易系年級(jí)：海洋生命學(xué)院2012級(jí)專業(yè)：生物科學(xué)科目：分子細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)學(xué)號(hào)：12050011006一、一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模海?）、通過(guò)對(duì)植物葉綠體的分離，了解細(xì)胞器分離的一般原理和方法（2）、觀察葉綠體的間接熒光，并了解熒光顯微鏡的使用方法二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理顆粒在離心場(chǎng)中的沉降速率取決于顆粒的大小、形狀和密度，也同離心力以及懸浮介質(zhì)的黏度有關(guān)。在一定的離心場(chǎng)中，同一時(shí)間內(nèi)，密度和大小不同的顆粒其沉

2、降速率不同，一次增加離心力和離心時(shí)間，就能使非均一懸浮液中的顆粒按其大小。密度的先后分批沉降在離心管的底部分批收集，即可獲得各個(gè)亞細(xì)胞的組分。葉綠體的分離應(yīng)該在等滲溶液中進(jìn)行，以免滲透壓影響葉綠體，對(duì)其造成損傷。在熒光顯微鏡下可以觀察葉綠體的自發(fā)熒光和間接熒光。三、實(shí)驗(yàn)材料三、實(shí)驗(yàn)材料新鮮菠菜。等滲溶液：0.35molL氯化鈉溶液，試劑：0.01%吖啶橙(acridineange)②、上表皮因柵欄組織較致密，可以用刀片將下表皮刮掉，在顯

3、微鏡下觀察上表皮的細(xì)胞和氣孔。3、菠菜的葉綠體的觀察、菠菜的葉綠體的觀察在普通光學(xué)顯微鏡下，將制得的手撕片放在載玻片的等滲溶液中，游離的葉綠體懸濁液點(diǎn)在在載玻片上，輕輕地蓋上蓋玻片（防止氣泡產(chǎn)生），即可觀察。在熒光顯微鏡下，將游離葉綠體懸濁液的的標(biāo)本放在熒光顯微鏡下，先后用綠光、藍(lán)光對(duì)其進(jìn)行照射，在電腦上觀察其產(chǎn)生的自發(fā)熒光。向手撕片的標(biāo)本、游離葉綠體懸濁液的的標(biāo)本中加入12滴0.01%吖啶橙染液，先后用綠光、藍(lán)光對(duì)其進(jìn)行照射，在電腦上