尿液干化學(xué)分析原理及影響因素

1、尿液干化學(xué)分析原理及影響因素尿液的干化學(xué)分析在各級(jí)醫(yī)院甚至診所的應(yīng)用已經(jīng)十分普遍，各品牌的尿分析儀及其配套試紙雖略有差異，項(xiàng)目代碼也略有不同，但檢測(cè)原理基本相同：一、葡萄糖（GLU)[反應(yīng)原理]：采用酶法測(cè)試，用兩種酶，分別是葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶。主要反應(yīng)過程如下：現(xiàn)在幾乎所有的試紙都是采用酶法，因?yàn)槊阜ň哂刑禺愋詮?qiáng)、靈敏度高、反應(yīng)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。不同型號(hào)的試紙所選用的指示劑有所不同。[臨床意義]：1.生理性糖尿?yàn)橐贿^性糖尿，是暫時(shí)性

2、的，排除生理因素后恢復(fù)正常。主要有三種：①飲食性糖尿，即在短時(shí)間內(nèi)服用大量糖類，引起血糖濃度過大；②應(yīng)急性糖尿，在腦外傷、腦血管意外、情緒激動(dòng)、劇烈運(yùn)動(dòng)周期性四肢麻痹等情況下，延腦糖中樞受刺激，使腎上腺激素或胰島素分泌異常，可出現(xiàn)暫時(shí)性的糖尿；③妊娠中后期多可見糖尿。2.病理性糖尿也可分為三種：①真性糖尿，既胰島素的分泌量相對(duì)或絕對(duì)不足，使血糖濃度超過腎糖閾尿糖檢查不僅可以診斷糖尿病，還可以指導(dǎo)臨床醫(yī)生決定胰島素的用量、判斷療效；②腎性

3、糖尿，即腎小管對(duì)葡萄糖的重吸收功能減退，新生兒的近曲小管功能未完善也能出現(xiàn)糖尿；③其他糖尿，如生長激素過多（肢端肥大癥）、甲狀腺激素過多（甲亢）、腎上腺激素過多（嗜鉻細(xì)胞瘤）、皮質(zhì)醇（Cμshing綜合癥）、胰高血糖素等都可使血糖濃度高過腎糖閾而出現(xiàn)糖尿；另外，肥胖病、高血壓也可能出現(xiàn)糖尿。[注意事項(xiàng)]：1.因?yàn)槟蛱欠治鲈嚰埖暮笠徊椒磻?yīng)是氧化還原反應(yīng)，當(dāng)尿液中含有比色素還原能力更強(qiáng)的物質(zhì)時(shí)，可使測(cè)試結(jié)果偏低甚至出現(xiàn)假陰性。如尿液中含有維

4、生素C時(shí)就能使測(cè)試結(jié)果偏低甚至假陰性。2.抗生素對(duì)班氏法糖定性、糖定量測(cè)定結(jié)果都有一定的影響，而對(duì)干化學(xué)法的測(cè)試結(jié)果無影響。尿液存放時(shí)間過長也能使尿糖被細(xì)菌分解使?jié)舛认陆担锌股貢r(shí)幾乎不下降。3.高濃度的酮體尿可引起假陰性；尿液比重增高，可降低試劑帶對(duì)尿糖的敏感性；服用大量左旋多巴時(shí)，該藥物的代謝產(chǎn)物會(huì)對(duì)測(cè)試反應(yīng)產(chǎn)生抑制作用，使測(cè)試結(jié)果偏低或出現(xiàn)假陰性；尿液被過氧化物或次氯酸鹽等強(qiáng)氧化性物質(zhì)污染的時(shí)候能出現(xiàn)假陽性。4.試劑帶采用的

5、使酶促反應(yīng)，測(cè)定的結(jié)果和溫度及時(shí)間有關(guān)，因此應(yīng)在規(guī)定的溫度和時(shí)間內(nèi)測(cè)定。二、膽紅素(BIL)、尿膽原(URO)[膽紅素反應(yīng)原理]：在酸性條件下，重氮鹽作用于膽紅素的中央，使其斷開并與重氮鹽偶合形成2分子的偶氮膽紅素，從而產(chǎn)生顏色變化。[尿膽原反應(yīng)原理]：尿膽原分析試紙的反應(yīng)原理一般有兩種，一種是尿膽原在酸性條件下與對(duì)二甲氨基苯甲醛發(fā)生醛化反應(yīng)(即尿膽原與醛縮合生成紅色的縮醛化合物，既常見的歐氏試劑)。另一種是重氮鹽法，即尿膽原在酸性條件

6、下，與重氮鹽偶聯(lián)生成紫紅色的偶氮化合物。[臨床意義]：1.膽紅素的檢測(cè)對(duì)肝膽系統(tǒng)疾病的診斷有重要價(jià)值。尿膽原更加靈敏的反映肝功能。2.膽紅素的檢測(cè)有助于診斷黃疸。在敗血癥、蠶豆病、異型輸血等情況下使紅細(xì)胞大量破壞，產(chǎn)生溶血性黃疸，此時(shí)雖然膽紅素大量增加，但大部分是間接膽紅素，因此，尿中的出汗等因素的影響，故多次測(cè)定比單次測(cè)定更能反映腎臟濃縮功能。[注意事項(xiàng)]：1.尿液標(biāo)本必須新鮮，不能含有強(qiáng)堿、強(qiáng)酸等物質(zhì)（如奎寧、嘧啶等藥物），這些物質(zhì)

7、的存在都會(huì)影響尿液比重的測(cè)定。當(dāng)尿液pH大于7時(shí)，應(yīng)在測(cè)定結(jié)果上加上0.005作為強(qiáng)堿尿的校正。在尿液分析儀上一般都有自動(dòng)校正功能。2.尿液分析試紙實(shí)際上測(cè)定是尿液中的離子濃度，尿液中的非離子化合物（如葡萄糖、造影劑等）對(duì)測(cè)定結(jié)果必然有一定的影響。五、潛血（BLD）[反應(yīng)原理]：尿液潛血分析試紙的反應(yīng)原理是利用血紅蛋白中的亞鐵血紅素的假過氧化物酶活性催化分解過氧化物，產(chǎn)生新生態(tài)的氧，氧化指示劑，使指示劑顯色，從顯色的強(qiáng)度可以得知尿液中血

8、的濃度。[臨床意義]：1.尿液中混有0.1%以上的血液時(shí)，便呈肉眼血尿的特征，血量在此以下便只能用潛血反應(yīng)或尿沉渣鏡檢才能證明。血尿常見于尿路炎癥（急性腎炎、腎結(jié)核、尿道炎等）、結(jié)核、腫瘤有白細(xì)胞時(shí)則表示有炎癥；蛋白陽性、尿沉渣中有腎上皮細(xì)胞、管型等時(shí)，應(yīng)考慮腎炎；特別是有紅細(xì)胞管型時(shí)，是腎實(shí)質(zhì)出血的佐證。2.血紅蛋白尿見于發(fā)作性血紅蛋白尿癥，還見于各種中毒、感染、鏈球菌敗血癥、瘧疾（黑水熱）、灼傷、溶血性輸血反應(yīng)等情況。[注意事項(xiàng)]：

9、1.成年女性的經(jīng)血?？梢饻y(cè)試結(jié)果出現(xiàn)假陽性，因此應(yīng)采取必要的采尿措施以減少污染。2.分析試紙不僅可以測(cè)試紅細(xì)胞，還能測(cè)試血紅蛋白，因此，當(dāng)血紅蛋白破裂時(shí)，可引起試紙測(cè)試結(jié)果與鏡檢結(jié)果的不一致，應(yīng)加以區(qū)別。3.尿液中含有對(duì)熱不穩(wěn)定酶、肌紅蛋白或菌尿，可引起假陽性；尿液中含有大量維生素C時(shí)，可以抑制后一步反應(yīng)的進(jìn)行，使測(cè)試結(jié)果偏低甚至出現(xiàn)假陰性，因此，測(cè)試時(shí)應(yīng)使用具有抗維生素C干擾能力的分析試紙。六、酸堿度（pH）[反應(yīng)原理]：pH試紙的

10、應(yīng)用是非常廣泛的，pH的反應(yīng)原理是基于pH指示劑法，目前，一般的尿液pH分析試紙中含有甲基紅[pH4.2(紅)～6.2(黃)]，溴甲酚綠[pH3.6（黃）～5.4（綠）]溴百里香酚藍(lán)[pH6.7(黃)～7.5(藍(lán))]，這些混合的酸堿指示劑適量配合可以反映尿液pH4.5～9.0的變異范圍。[臨床意義]：正常尿液呈弱酸性，約為6.0，因食物的不同，pH的變化范圍為4.5～8.0。pH測(cè)定結(jié)果的判斷比其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷要難一些，因?yàn)槟蛞簆H的

11、波動(dòng)幅度大而快，而正常尿和病人的尿的pH沒有明顯的差別，所以pH單獨(dú)使用的意義不大。但與其他臨床資料配合起來分析，則可成為重要的資料。[注意事項(xiàng)]：1.檢測(cè)時(shí)尿標(biāo)本必須新鮮，放置過久細(xì)菌分解尿液成分可導(dǎo)致尿液pH改變。大多數(shù)情況下，細(xì)菌分解尿素產(chǎn)生氨，使尿液呈堿性；少數(shù)情況下，細(xì)菌也分解尿液成分產(chǎn)生酸性物質(zhì)，使尿液pH偏酸。2.當(dāng)腎臟分泌的尿液含有過多的碳酸氫鹽和碳酸緩沖對(duì)時(shí)，放置時(shí)間過長，使尿液中的二氧化碳自然擴(kuò)散到空氣中，使尿液pH