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1、0第一章細(xì)胞基本知識(shí)1cellthey(細(xì)胞學(xué)說)細(xì)胞學(xué)說是1838~1839年間由德國(guó)的植物學(xué)家施萊登和動(dòng)物學(xué)家施旺所提出直到1858年才較完善。它是關(guān)于生物有機(jī)體組成的學(xué)說,主要內(nèi)容有:①細(xì)胞是有機(jī)體,一切動(dòng)植物都是由單細(xì)胞發(fā)育而來,即生物是由細(xì)胞和細(xì)胞的產(chǎn)物所組成;②所有細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和組成上基本相似;③新細(xì)胞是由已存在的細(xì)胞分裂而來;④生物的疾病是因?yàn)槠浼?xì)胞機(jī)能失常。2prokaryoticcell(原核細(xì)胞)組成原核生物的細(xì)胞。這
2、類細(xì)胞主要特征是沒有明顯可見的細(xì)胞核同時(shí)也沒有核膜和核仁只有擬核,進(jìn)化地位較低。由原核細(xì)胞構(gòu)成的生物稱為原核生物3eukaryoticcell(真核細(xì)胞)構(gòu)成真核生物的細(xì)胞稱為真核細(xì)胞,具有典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有明顯的細(xì)胞核、核膜、核仁和核基質(zhì)遺傳信息量大,并且有特化的膜相結(jié)構(gòu)。真核細(xì)胞的種類繁多既包括大量的單細(xì)胞生物和原生生物(如原生動(dòng)物和一些藻類細(xì)胞)又包括全部的多細(xì)胞生物(一切動(dòng)植物)的細(xì)胞。4cellplasma(細(xì)胞質(zhì))是細(xì)胞內(nèi)除核
3、以外的原生質(zhì)即細(xì)胞中細(xì)胞核以外和細(xì)胞膜以內(nèi)的原生質(zhì)部分包括透明的粘液狀的胞質(zhì)溶膠及懸浮于其中的細(xì)胞器。5.protoplasm(原生質(zhì))生活細(xì)胞中所有的生活物質(zhì)包括細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)。6.protoplast(原生質(zhì)體)脫去細(xì)胞壁的細(xì)胞叫原生質(zhì)體是一生物工程學(xué)的概念。如植物細(xì)胞和細(xì)菌(或其它有細(xì)胞壁的細(xì)胞)通過酶解使細(xì)胞壁溶解而得到的具有質(zhì)膜的原生質(zhì)球狀體。動(dòng)物細(xì)胞就相當(dāng)于原生質(zhì)體。7.mycoplasma(支原體)是最簡(jiǎn)單的原核細(xì)胞,支原
4、體的大小介于細(xì)菌與病毒之間直徑為0.1~0.3um約為細(xì)菌的十分之一能夠通過濾菌器。支原體形態(tài)多變有圓形、絲狀或梨形,光鏡下難以看清其結(jié)構(gòu)。支原體具有細(xì)胞膜,但沒有細(xì)胞壁。它有一環(huán)狀雙螺旋DNA,沒有類似細(xì)菌的核區(qū)(擬核)能指導(dǎo)合成700多種蛋白質(zhì)。支原體細(xì)胞中惟一可見的細(xì)胞器是核糖體,每個(gè)細(xì)胞中約有800~1500個(gè)。支原體可以在培養(yǎng)基上培養(yǎng),也能在寄主細(xì)胞中繁殖。8.archaebacteria(古細(xì)菌)一類特殊細(xì)菌,在系統(tǒng)發(fā)育上既
5、不屬真核生物,也不屬原核生物。它們具有原核生物的某些特征(如無(wú)細(xì)胞核及細(xì)胞器),也有真核生物的特征(如以甲硫氨酸起始蛋白質(zhì)的合成,核糖體對(duì)氯霉素不敏感),還具有它們獨(dú)有的一些特征(如細(xì)胞壁的組成,膜脂質(zhì)的類型)。因之有人認(rèn)為古細(xì)菌代表由一共同祖先傳來的第三界生物(古細(xì)菌,原核生物,真核生物)。它們包括酸性嗜熱菌,極端嗜鹽菌及甲烷微生物。可能代表了活細(xì)胞的某些最早期的形式。9.Bacteriaeubacteria(真細(xì)菌)除古細(xì)菌以外的所
6、有細(xì)菌均稱為真細(xì)菌。最初用于表示“真”細(xì)菌的名詞主要是為了與其他細(xì)菌相區(qū)別。10.mesosome(中膜體)中膜體又稱間體或質(zhì)膜體是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)膜向細(xì)胞質(zhì)內(nèi)陷折皺形成的。每個(gè)細(xì)胞有一個(gè)或數(shù)個(gè)中膜體,其中含有細(xì)胞色素和琥珀酸脫氫酶為細(xì)胞提供呼吸酶具有類似線粒體的作用故又稱為擬線粒體。11.centroplasm(中心質(zhì))在光鏡下觀察到的藍(lán)藻細(xì)胞中央部位較周圍原生質(zhì)明亮,是遺傳物質(zhì)DNA所在部位,它相當(dāng)于細(xì)菌的核區(qū),成為中心質(zhì),也有稱中央質(zhì)。
7、12.nucleoid(擬核)細(xì)菌細(xì)胞具有原始的核沒有核膜更沒有核仁結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單為了與真核細(xì)胞中典型的細(xì)胞核有所區(qū)別稱為核區(qū)(nuclearregion)、擬核(nucleoid)或原始核(primitivefmnucleus),亦稱細(xì)菌染色體。13.symplast(共質(zhì)體)植物原生質(zhì)體間通過胞間連絲相連接,使整個(gè)植物體的原生質(zhì)連成為的一個(gè)整體。(2)多核的合胞體。14.syncytiumsyncytia(合胞體)含有由一層細(xì)胞膜包繞的多
8、個(gè)核的細(xì)胞質(zhì)團(tuán)。通常是由于兩個(gè)以上細(xì)胞發(fā)生融合或一個(gè)細(xì)胞分裂不完全所致,后者來自于核發(fā)生了分裂,而未發(fā)生細(xì)胞質(zhì)分裂。15.genethey(基因?qū)W說)關(guān)于基因和性狀之間存在確定的因果關(guān)系的學(xué)說。主要內(nèi)容:①種質(zhì)(基因)是連續(xù)的遺傳物質(zhì);②基因是染色體上的遺傳單位,有很高穩(wěn)定性能自我復(fù)制和發(fā)生變異;③在個(gè)體發(fā)育中,基因在一定條件下,控制著一定的代謝過程表現(xiàn)相應(yīng)的遺傳特性和特征;④生物進(jìn)化主要是基因及其突變等。這是對(duì)孟德爾遺傳學(xué)說的重大發(fā)展
9、,也是這一歷史時(shí)期的巨大成就。16ultrastructure(submicroscopicstructure)超微結(jié)構(gòu)(亞細(xì)胞結(jié)構(gòu))又稱為亞顯微結(jié)構(gòu)。指在普通光學(xué)顯微鏡下觀察不能分辨清楚,但在電子顯微鏡下能觀測(cè)到的細(xì)胞內(nèi)各種微細(xì)結(jié)構(gòu),如各種細(xì)胞器。第二章細(xì)胞生物研究方法2光并通過掃描裝置對(duì)標(biāo)本進(jìn)行連續(xù)掃描,并通過空間共軛光闌(針孔)阻擋離焦平面光線而成像的一種顯微鏡。是當(dāng)今世界最先進(jìn)的細(xì)胞生物學(xué)分析儀器。17.immunoelectr
10、onmicroscopy(免疫電鏡)將抗體進(jìn)行特殊標(biāo)記后用電子顯微鏡觀察免疫反應(yīng)的結(jié)果。根據(jù)標(biāo)記方法的不同,分為免疫鐵蛋白技術(shù)、免疫酶標(biāo)技術(shù)和免疫膠體金技術(shù)。18.immunoblotting(免疫印跡)又稱蛋白質(zhì)印跡(Westernblotting),是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測(cè)復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測(cè)定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。19.immunofluescenttechniquei
11、mmunofluescencetechnique(免疫熒光技術(shù))將免疫學(xué)方法(抗原抗體特異結(jié)合)與熒光標(biāo)記技術(shù)結(jié)合起來研究特異蛋白抗原在細(xì)胞內(nèi)分布的方法。由于熒光素所發(fā)的熒光可在熒光顯微鏡下檢出,從而可對(duì)抗原進(jìn)行細(xì)胞定位。20.radioimmunoprecipitationassayRIPAradioimmunoprecipitation(放射免疫沉淀)以放射性標(biāo)記的抗原或抗體進(jìn)行的免疫沉淀法。能大大提高檢測(cè)抗原抗體復(fù)合體的靈敏度。2
12、1.differentialcentrifugation(差速離心)利用不同物質(zhì)沉降速率的差異,在不同離心速度下分離和收集不同顆粒的離心技術(shù)。常用于分離細(xì)胞勻漿中的各種細(xì)胞器。22.isodensitycentrifugationisopycniccentrifugation(等密度離心)將要分離的樣本放在密度梯度液表面或混懸于梯度液中,通過離心不同密度的顆粒或上浮或下沉到與其各自密度相同的介質(zhì)區(qū)帶時(shí),顆粒不再移動(dòng)形成一系列區(qū)帶,然后停
13、止離心,從管底收集不同密度顆粒的分離技術(shù)。23.densitygradientcentrifugation密度梯度離心用一定的介質(zhì)在離心管內(nèi)形成一連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度,將細(xì)胞混懸液或勻漿置于介質(zhì)的頂部,通過重力或離心力場(chǎng)的作用使細(xì)胞分層、分離的方法。密度梯度離心常用的介質(zhì)為氯化銫、蔗糖和多聚蔗糖。24.insituhybridization(原位雜交)用單鏈RNA或DNA探針通過雜交法對(duì)細(xì)胞或組織中的基因或mRNA分子在細(xì)胞涂片或組織
14、切片上進(jìn)行定位的方法。25.radioautography;autadiography(放射自顯影技術(shù))是利用放射性同位素的電離輻射對(duì)乳膠(含AgBr或AgCl)的感光作用,對(duì)細(xì)胞內(nèi)生物大分子進(jìn)行定性、定位與半定量研究的一種細(xì)胞化學(xué)技術(shù)。放射自顯影技術(shù)用于研究標(biāo)記化合物在機(jī)體、組織和細(xì)胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用機(jī)理、作用部位等等。26.flowcytometer(流式細(xì)胞儀)主要應(yīng)用:用于定量測(cè)定細(xì)胞中的DNA、RNA或
15、某一特異蛋白的含量;測(cè)定細(xì)胞群體中不同時(shí)相細(xì)胞的數(shù)量;從細(xì)胞群體中分離某些特異染色的細(xì)胞;分離DNA含量不同的中期染色體。27.microspectrophotometry(細(xì)胞顯微分光光度術(shù))利用細(xì)胞內(nèi)某些物質(zhì)對(duì)特異光譜的吸收,測(cè)定這些物質(zhì)(如核酸與蛋白質(zhì)等)在細(xì)胞內(nèi)的含量。包括:紫外光顯微分光光度測(cè)定法可見光顯微分光光度測(cè)定法。28.cellculture(細(xì)胞培養(yǎng))把機(jī)體內(nèi)的組織取出后經(jīng)過分散(機(jī)械方法或酶消化)為單個(gè)細(xì)胞,在人工
16、培養(yǎng)的條件下,使其生存、生長(zhǎng)、繁殖、傳代,觀察其生長(zhǎng)、繁殖、接觸抑制、衰老等生命現(xiàn)象的過程。29.primaryculturecell(原代培養(yǎng)細(xì)胞)直接從有機(jī)體取出組織,通過組織塊長(zhǎng)出單層細(xì)胞,或者用酶消化或機(jī)械方法將組織分散成單個(gè)細(xì)胞,在體外進(jìn)行培養(yǎng),在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。傳10代以內(nèi)的細(xì)胞稱為原代培養(yǎng)細(xì)胞。30.subculturecell(傳代培養(yǎng)細(xì)胞)原代培養(yǎng)形成的單層培養(yǎng)細(xì)胞匯合以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng)(即將細(xì)胞從一
17、個(gè)培養(yǎng)器皿中以一定的比率移植至另一些培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)),否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或由于細(xì)胞密度過大引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將影響細(xì)胞的生長(zhǎng),這一分離培養(yǎng)稱為傳代細(xì)胞培養(yǎng)。進(jìn)行傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為傳代培養(yǎng)細(xì)胞31.cellstrain(細(xì)胞株)細(xì)胞株:在體外一般可以順利地傳40—50代,并且仍能保持原來二倍體數(shù)量及接觸抑制行為的傳代細(xì)胞。32.cellline(細(xì)胞系)在體外培養(yǎng)的條件下,有的細(xì)胞發(fā)生了遺傳突變,而且?guī)в邪┘?xì)胞特點(diǎn),失去接觸抑制,有可
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