細(xì)胞工程試驗(yàn)技術(shù)操作指南

1、細(xì)胞工程試驗(yàn)技術(shù)操作指南（細(xì)胞育種）細(xì)胞工程基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技術(shù)細(xì)胞工程基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技術(shù)1.器皿洗滌玻璃器皿洗滌玻璃器皿洗滌：新的玻璃器皿上附有游離的堿性物質(zhì)，其洗滌方法是用1%的HCl溶液浸泡一晝夜，再用合成洗滌劑洗刷，然后用清水反復(fù)沖洗，最后用蒸餾水沖洗1～2次，干燥后即可使用。已使用過的試管、燒杯、三角瓶等的洗滌方法是，先將器皿中的殘?jiān)?，用清水洗凈，再用合成洗滌劑洗刷，用清水沖洗干凈，最后用蒸餾水沖洗1～2次。用過的吸管、滴管等內(nèi)徑狹小的

2、玻璃制品，需先放入鉻酸洗滌液中浸泡兩小時(shí)以上，取出后經(jīng)流水沖洗半小時(shí)左右，再用蒸餾水沖洗1～2次，然后烘干或晾干。載玻片和蓋玻片容易破碎，洗滌時(shí)不宜用力擦洗，其洗滌方法是先用清水沖洗，然后放入鉻酸洗滌液中浸泡幾小時(shí)或用稀鉻酸洗滌液煮沸半小時(shí)，取出后用清水沖洗干凈，將其儲(chǔ)藏在95%的酒精中。塑料用品洗滌塑料用品洗滌：塑料用品一般用合成洗滌劑洗滌，因其附著力較強(qiáng)，因此沖洗時(shí)必須反復(fù)多次，最后用蒸餾水沖洗。金屬用品洗滌金屬用品洗滌：金屬用品一

3、般不宜用各種洗滌液洗滌，需要清洗時(shí)，一般用酒精擦洗，并保持干燥。2.培養(yǎng)基配制2.1母液配制為工作方便起見，常用培養(yǎng)基通常先按配方配制成濃度高于實(shí)際使用濃度若干倍的母液，使用時(shí)按按比例稀釋即可。一般大量元素配制成10－20倍母液，微量元素和其它成分配制成100－200倍母液。常用的MS培養(yǎng)基母液配制見附表。配好的母液需貯存于2～4℃的冰箱中，定期檢查有無沉淀和微生物污染，如果出現(xiàn)沉淀或微生物污染，則不能使用。2.2植物激素配制植物激素一

4、般配制成濃度為0.1~1.0mgml的溶液，貯存在2～4℃下備用。由于多數(shù)激素難溶于水，一般按以下方法配制。IAA：先用少量95%乙醇使之充分溶解，再加蒸餾水定容至需要濃度的體積。2.3培養(yǎng)基配制按實(shí)際配制培養(yǎng)基體積，取各母液的需要量加入一適當(dāng)體積的燒杯或其它配制培養(yǎng)基的容器中，加入實(shí)際配制培養(yǎng)基體積約23~34的蒸餾水，然后按每升所用蔗糖的量稱取相應(yīng)量的蔗糖（如1L培養(yǎng)基加20g蔗糖，若只配0.5L培養(yǎng)基，則稱取15g蔗糖）放入培養(yǎng)基