乳腺癌動物模型的研究現(xiàn)狀

1、,乳腺癌動物模型 研究現(xiàn)狀,,乳腺癌動物模型是研究乳腺癌生物學行為及進行實驗治療的重要工具之一。根據(jù)乳腺癌模型建立方法不同，可分為自發(fā)性、誘發(fā)性、移植性和轉(zhuǎn)基因性四類，所用的動物為大鼠或小鼠。,自發(fā)性乳腺癌模型,自發(fā)性乳腺癌的鼠模是最早被人類使 用的乳腺癌動物模型。已有將近100年的 歷史。最早的研究者Little等通過小鼠選擇 性的近交，發(fā)現(xiàn)了許多有著“自發(fā)性” 的乳 腺癌特性的小鼠。 Heppner

2、 GH et al. Nontransgenic models of breast cancer. Breast Cancer Res.2000.9;2(5):331-4,,現(xiàn)在常用的辦法是，在取得自發(fā)性乳腺癌鼠模后，取瘤組織進行鼠間傳代，其形態(tài)學、生物化學、病理分子生物學及遺傳學均有類似人乳腺癌的生物學的特性，經(jīng)鼠間原位移植各代生物學性能穩(wěn)定。,,天津市腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所實驗腫瘤室，99年8月l7日發(fā)現(xiàn)一只繁育263日齡雌性TA

3、Ⅱ系小鼠左下腹自發(fā)乳腺腫物，伴呼吸困難。在無菌條件下處死荷瘤鼠，見肺部小結(jié)節(jié)，取肺轉(zhuǎn)移瘤結(jié)節(jié)，按常規(guī)制成2mm小塊，分別移植于5只8月齡同系雌性小鼠左下腹乳腺區(qū)域，移植后第5天，5只小鼠移植區(qū)出現(xiàn)瘤結(jié)，除1只荷瘤鼠作為鼠間傳代外，余4只荷瘤鼠第68天觀察發(fā)現(xiàn)有3只伴發(fā)肺轉(zhuǎn)移。病理診斷：乳腺癌A型伴肺轉(zhuǎn)移。,,以后鼠間移植均用原位移植瘤組織進行連續(xù)傳代，移植瘤同原發(fā)瘤形態(tài)學特征，命名為BCML—TAⅡ99。 目前BCML—TAⅡ99

4、已傳至第35代，移植成活率為100％(190／190)，原位移植荷瘤鼠晚期只有肺轉(zhuǎn)移之特性(55．47％．76／137)。 孫慧等。我院發(fā)現(xiàn)并建立近交系TAⅡ鼠乳腺癌肺轉(zhuǎn)移原位模型.中國腫瘤臨床.2019,28(10):799,,自發(fā)性的腫瘤通常比用實驗方法誘發(fā)的腫瘤與人類所患的腫瘤更為相似，有利于將動物實驗結(jié)果用到人。 但腫瘤發(fā)生情況可能參差不齊，不可能在短時間內(nèi)獲得大量腫瘤學材料。 吳細丕等。 實驗動物

5、與腫瘤研究 中國醫(yī)藥科技出版社。2000.4,誘發(fā)性乳腺癌模型,以化學致癌物刺激使大鼠產(chǎn)生乳腺癌的方法，被廣泛地運用于有關影響乳腺癌病程發(fā)展因素的假設檢驗及疾病防治的研究中，二甲基苯蒽（DMBA）是最常用的化學致癌物。 Heppner GH et al. Nontransgenic models of breast cancer. Breast Cancer Res.2000.9;2(5):331-4,,張毅等用健康雌性W

6、ister大鼠30只,50~60天齡,體重90~110g, 以二甲基苯蒽10mg/100g體重右臀部注射,復制大鼠同時性乳腺癌與纖維肉瘤動物模型。24周后取腫瘤及瘤旁組織標本。以組織學觀察乳腺腫瘤均為乳腺癌,與人乳腺癌相似,右后肢腫瘤均為纖維肉瘤,與人纖維肉瘤相似。 張毅等。DMBA誘導大鼠乳腺癌與纖維肉瘤中cyclin D1及p53蛋白的表達及其意義。中國普外基礎與臨床雜志。2019.9；8(5)：285－287,

7、,張毅等又以同樣的實驗方法，探討聯(lián)合應用三苯氧胺及全反式維甲酸對實驗性大鼠乳腺癌發(fā)生促進期的化學預防作用。利用DMBA誘導大鼠乳腺癌發(fā)生。在給藥后第8周應用三苯氧胺(TAM)和全反式維甲酸(RA)。在第24周觀察大鼠乳腺腫瘤發(fā)生情況及乳腺發(fā)育情況。結(jié)果 對照組大鼠乳腺癌發(fā)生率為70—58％；TAM組與RA組發(fā)生率分別為22.02％和15．79％，明顯低于對照組； TAM + RA 組無乳腺腫瘤發(fā)生。 張毅等。三苯氧胺聯(lián)

8、合全反式維甲酸對大鼠乳腺癌的預防作用 。第三軍醫(yī)大學學報。 2019.8； 23(8):910-912,,林輝等進行槲皮素抑制乳腺癌發(fā)生及增殖的實驗研究。將79只SD大鼠適應性喂養(yǎng)5天后隨機分為4組 ： A組（DMBA）、B組（DMBA+TAM）、C組（DMBA+槲皮素）、D組（空白對照）。 28周后, A組乳腺癌發(fā)生率為76.2%,明顯高于B組和C組。,,各組大鼠乳腺癌發(fā)生情況 組別 n 發(fā)生乳腺癌的

9、動物數(shù) 乳腺癌發(fā)生率（%） A 21 16 76.2* B 22 9 40.9 C 22 10 4

10、5.5 D 10 0 0 與B、C組比較 *P<0.05 林輝等。槲皮素抑制乳腺癌發(fā)生及增殖的實驗研究。中國普外基礎與臨床雜志。2019.9.8(5):288-

11、291,,,,,楊筍等研究去氫表雄酮抗始發(fā)突變的作用，取21天齡剛離乳的雌性大白鼠60只，隨機分為四組，每組15只，持續(xù)給藥12周，第3周將DMBA(溶于花生油中)以70mg／kg劑量灌胃給藥攻擊。對照組SD雌性大鼠自口服DMBA后的第8周起，開始發(fā)生乳腺腫瘤，此后腫瘤誘發(fā)率、每只大鼠荷瘤數(shù)及荷瘤體積均呈逐漸上升起勢，至第15周實驗結(jié)束時，對照組腫瘤誘發(fā)率為73．0％。 楊筍等.去氫表雄酮抗始發(fā)突變作用的研究. 中華腫瘤

12、雜志。2019.3.24(2):137-140,,總之誘發(fā)性乳腺癌模型操作簡單，已使用多年。 但致癌的誘癌過程需要較長的時間，成功率多數(shù)達不到100％，且常誘發(fā)多部位腫瘤，故不常用于藥物篩選。,移植性乳腺癌模型,60年代，先天性免疫缺失的裸鼠的出現(xiàn)為異種移植模型提供了良好的條件。人乳腺癌細胞株MCF-7,SHZ-88等相應荷瘤鼠模型的建立，為研究人乳腺腫瘤細胞的生物學性狀、抗腫瘤藥物的篩選及作用機理的研究提供了可靠

13、的研究基礎。 Heppner GH et al. Nontransgenic models of breast cancer. Breast Cancer Res.2000.9;2(5):331-4,,甄林林等用激素受體陽性的MCF-7人乳腺癌細胞株，接種于20只裸小鼠右側(cè)胸壁乳墊下，腫瘤移植成功率（成瘤率）為95％，病理學檢查為浸潤性導管癌。該方法建立的人乳腺癌裸鼠移植模型，成功率高，腫瘤可部分保持人乳腺癌生物學

14、特性。 甄林林等。人乳腺癌裸鼠移植模型的建立。南京醫(yī)科大學學報。 2019.11；21(6)：509-510,,孫慧等將人乳腺癌細胞系MCF-7培養(yǎng)后的細胞懸液于SCID鼠下腹左側(cè)乳腺原位皮下注射，待腫瘤長至1cm3時，行SCID鼠間原位傳代。后取鼠間傳第三代原位移植瘤組織，無菌剪切成1mm3左右小塊，分別移植于10只小鼠下腹左乳腺區(qū)域。初代細胞懸液接種5天后可見腫瘤生長，第2－5代行組織塊接種，3天后

15、可見腫瘤生長，共計鼠間傳代5次，成瘤率100％。最長荷瘤鼠生存時間60天。 孫慧等。人乳腺癌細胞系MCF-7原位移植血管生成超微結(jié)構觀察及相關因子表達。 中國腫瘤臨床。2019.5.20;28(5):368-371,,劉勝等研究溫腎活血中藥對體內(nèi)移植瘤的影響作用。選用BALB/c裸小鼠，雌性，將MCF—7細胞5×107接種于BALC/c裸小鼠皮下，建成人乳腺癌MCF—7裸小鼠移植瘤。連續(xù)傳3代后，取生長旺

16、盛期的瘤組織剪塊，無菌條件下接種于裸小鼠右側(cè)腋窩皮下。接種后24h隨機分籠。溫腎活血法組按高、中、低劑量每日灌胃給藥，陽性對照CTX組隔天腹腔給藥，空白對照組口服給等量生理鹽水。3周后處死動物，計算各組平均瘤重。 劉勝等. 溫腎活血法中藥對人乳腺癌MCF—7細胞株體內(nèi)外生長的影響。 中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志。 2019；7(1):54-57,,王烈等將乳腺癌細胞SHZ-88培養(yǎng)擴增后，以5×106細胞

17、數(shù)接種于SD大鼠右腋皮下，2周后腫瘤平均直徑達0.9±0.3cm,以此模型來研究乳腺癌的基因治療。 王烈等。HSV-TK,B7聯(lián)合基因治療誘發(fā)乳腺癌細胞調(diào)亡及增強免疫作用的觀察。中華實驗外科雜志。2000.07.08；17（4）：326－327）,,華西醫(yī)科大學白紹槐等，將2019年1月獲得的一例乳腺浸潤性導管癌患者的原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)，移植于BALB/c-nu/nu裸小鼠胸部乳墊下，31天

18、后在局部出現(xiàn)腫瘤結(jié)節(jié)，并逐漸長大，以后進行鼠間傳代移植，移植成功率100％，腫瘤保持了原先的生物學特性。 白紹槐等。人乳腺浸潤性導管癌裸鼠移植模型的建立。 華西醫(yī)科大學學報。2019；30（2）：220,,陳大富等將F35代人乳腺侵潤性導管癌-癌塊分成4－6mm3大小，分別接種于16只裸鼠右腋乳墊下，接種55天后，腫瘤大小為2700±872 mm3，平均瘤重達1.25±0.24g。

19、 陳大富等。人參皂甙Rg3與化療藥物聯(lián)合應用時對裸鼠原位種植人乳腺癌的影響。中國普外基礎與臨床雜志。2019.9；9（5）：301－303,,邵志敏等建立了炎性乳腺癌移植腫瘤模型。他們將經(jīng)病理診斷證實的女性炎性乳腺癌標本移植至雌性裸鼠（BALB/c）皮下，當移植腫瘤直徑長至1cm時進行傳代移植，迄今已成功傳了10代。并證實該動物模型表現(xiàn)為人類炎性乳腺癌的生物學特征，同時也發(fā)現(xiàn)該腫瘤動物模型有肺部的遠處轉(zhuǎn)移。 此動物模型為研究腫瘤

20、轉(zhuǎn)移機制提供了很好的研究模型。 邵志敏等。 人類炎性乳腺癌移植腫瘤裸鼠動物模型的建立和生物學特性的研究。 中華外科雜志。2019.10;39(10):796-798,轉(zhuǎn)基因乳腺癌模型,轉(zhuǎn)基因技術促使了轉(zhuǎn)基因乳腺癌鼠模的出現(xiàn)。在國內(nèi)，此種方法 還剛剛起步。,,孫強等用引種的MMTV-Wnt-1陽性雄鼠，目的基因為雜合子（M/+）與正常雌性FVB(+/+)配種，即每一代都是同背景品系的回交。得到MMTV-Wnt-

21、1轉(zhuǎn)基因小鼠，最早從7周齡開始出現(xiàn)乳腺瘤。將瘤組織移植裸鼠后，腫瘤可在裸鼠皮下生長，移植腫瘤病理學形態(tài)與原發(fā)瘤一致，未出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。從而認為MMTV-Wnt-1轉(zhuǎn)基因小鼠可穩(wěn)定自發(fā)乳腺腫瘤，可作為研究乳腺癌動物模型。 孫強等。MMTV-Wnt-1轉(zhuǎn)基因小鼠作為高發(fā)乳腺癌動物模型的觀察 中國實驗動物學報。2019.9；10（3）,,所有的這些模型都有其優(yōu)點和缺點。由于人類發(fā)