PTEN、VEGF在犬乳腺腫瘤中的表達及藥物治療犬乳腺癌動物模型的研究.pdf

1、乳腺腫瘤在母犬最為常見。抑癌基因PTEN及血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在乳腺腫瘤中的表達人醫(yī)中研究比較多，而在犬乳腺腫瘤中報道很少。為此，我們采用實時熒光定量PCR和免疫組織化學兩種方法檢測了它們在犬乳腺腫瘤組織中的表達情況，以觀察其表達水平的高低是否與惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移相關，并原代培養(yǎng)了一犬乳腺癌細胞系(CMT1211)，將純化好的癌細胞接種裸鼠建立犬乳腺癌模型，進行了相關試驗，具體研究內(nèi)容如下： 1．對從2005年7月到2006

2、年8月收集的50例犬乳腺腫瘤進行組織病理學分類，通過實時熒光定量RT-PCR法對犬乳腺腫瘤病例新鮮腫塊中VEGFmRNA和PTENmRNA的表達進行了檢測。結(jié)果顯示：PTEN mRNA在正常犬乳腺組織中的相對表達量與良性乳腺腫瘤兩者之間差異不顯著(P>0.05)。在惡性乳腺腫瘤組織中PTEN mRNA表達量與正常犬乳腺組織和良性乳腺腫瘤相比較，差異極顯著(P<0.01)。VEGF mRNA在正常犬乳腺組織中的相對表達量與其在良性乳腺腫瘤

3、的表達兩者之間差異不顯著(P>0.05)。惡性乳腺腫瘤組織中VEGF mRNA變化范圍較大，與正常犬乳腺組織和良性乳腺腫瘤相比較，差異極顯著(P<0.001)。發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的犬乳腺腫瘤其VEGF mRNA相對表達量為與其它惡性犬乳腺腫瘤組織比較差異顯著(P<0.01)。 2．采用免疫組織化學SP方法法對犬乳腺腫瘤病例中VEGF、PTEN蛋白進行檢測，并分析VEGF‘、PTEN表達與臨床病理特征之間的關系。結(jié)果顯示：PTEN染

4、色主要定位于增生的乳腺上皮或癌巢細胞漿，少量可見于核膜染色。乳腺腫瘤組織中PTEN基因表達與犬的年齡、腫瘤大小無關(P>0.05)，而與組織學分級和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(P<0.01)。VEGF。染色定位于腫瘤及周圍血管，少量肌上皮細胞漿，乳腺腫瘤組織中VEGF蛋白表達與患病犬的年齡、腫瘤大小無關(P>005)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關。 3．從臨床收集一犬乳腺癌病例對腫瘤組織其進行原代培養(yǎng)和初步鑒定，將純化好的腫瘤細胞接種裸鼠右側(cè)背部皮下

5、，建立異種腫瘤種植模型，用免疫組化的方法檢測VEGF在犬乳腺癌裸鼠模型中的表達情況。結(jié)果顯示：42天后處死的裸鼠移植腫瘤組中VEGF蛋白呈高表達，與14天和28天處死的裸鼠相比，兩者存在顯著性差異(P<0.05)。 4．將藥物環(huán)磷酰胺(CTx)、長春新堿(VCR)、亞硒酸鈉(Na<,2>SeO<,3>)對CMT1211細胞進行體內(nèi)外試驗，計算不同藥物對腫瘤細胞的抑制率。體外試驗結(jié)果顯示：CTX對腫瘤細胞基本沒有抑制作用，其它兩種