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1、SDS軟件基本操作方法軟件基本操作方法1、啟動(dòng)設(shè)備啟動(dòng)設(shè)備先開電腦,再開定量先開電腦,再開定量PCR儀主機(jī)電源,最后啟動(dòng)儀主機(jī)電源,最后啟動(dòng)SDS軟件。軟件。2、新建文件新建文件菜單菜單File→New,assay選擇選擇AbsoluteQuantification(實(shí)時(shí)定量模式)(實(shí)時(shí)定量模式),打開一個(gè)空白文件。,打開一個(gè)空白文件。3、探針設(shè)置探針設(shè)置雙擊任意一個(gè)孔打開雙擊任意一個(gè)孔打開Wellinspect窗口。點(diǎn)擊窗口。點(diǎn)擊Ad
2、dDetect按鈕,打開按鈕,打開DetectManager窗口。點(diǎn)擊窗口。點(diǎn)擊File→New,新建探針(,新建探針(探針名稱建議使用“基因探針名稱建議使用“基因_熒光”格式,如熒光”格式,如GAPDH_FAM、ACTIN_VIC等)等)。設(shè)置報(bào)告基團(tuán)。設(shè)置報(bào)告基團(tuán)(FAM或者或者VIC)和淬滅基團(tuán)淬滅基團(tuán)(TaqMan探針選探針選TAMRA;MGB探針和探針和SYBRGreen染料選染料選None)等。完成后點(diǎn)等。完成后點(diǎn)OK。在。
3、在DetectManager窗口選擇相關(guān)窗口選擇相關(guān)探針,點(diǎn)擊探針,點(diǎn)擊AddtoPlateDocument按鈕。點(diǎn)擊按鈕。點(diǎn)擊Done關(guān)閉關(guān)閉DetectManager。4、填樣品表填樣品表在96孔表中選定樣品孔,在孔表中選定樣品孔,在Wellinspect頁(yè)面頁(yè)面的SampleName欄中填入樣品名稱;在探針列表的欄中填入樣品名稱;在探針列表的Use選項(xiàng)選項(xiàng)下的方框中打鉤選擇探針;在下的方框中打鉤選擇探針;在Task欄中選定樣品類型
4、欄中選定樣品類型(陰性對(duì)(陰性對(duì)照選照選NTC;未知樣品選;未知樣品選Unknown;標(biāo)準(zhǔn)品選;標(biāo)準(zhǔn)品選Stard。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)品。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)品Stard,還要在,還要在Quantity欄中輸入濃度或者拷貝數(shù)。參比熒光(欄中輸入濃度或者拷貝數(shù)。參比熒光(PassiveReference)選)選ROX)。關(guān)閉。關(guān)閉Wellinspect窗口。窗口。5、循環(huán)參數(shù)循環(huán)參數(shù)切換到切換到Instrument頁(yè)面,循環(huán)參數(shù)不需要修改,頁(yè)面,循環(huán)參數(shù)不需要
5、修改,定量定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)反映體積是的標(biāo)準(zhǔn)反映體積是50μL。6、啟動(dòng)擴(kuò)增啟動(dòng)擴(kuò)增點(diǎn)Save按鈕保存文件。確認(rèn)按鈕保存文件。確認(rèn)96孔板在主機(jī)內(nèi)放孔板在主機(jī)內(nèi)放置妥當(dāng)后,點(diǎn)擊置妥當(dāng)后,點(diǎn)擊Start按鈕開始按鈕開始PCR循環(huán)。循環(huán)。7、保存結(jié)果保存結(jié)果程序結(jié)束后,點(diǎn)程序結(jié)束后,點(diǎn)Disconnect按鈕,然后按鈕,然后File→Save保存實(shí)驗(yàn)結(jié)果。保存實(shí)驗(yàn)結(jié)果。8、數(shù)據(jù)分析數(shù)據(jù)分析點(diǎn)擊自動(dòng)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。切換到點(diǎn)擊自動(dòng)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。切換
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