不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)操作規(guī)程

1、1XXX醫(yī)院不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)操作規(guī)程不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)操作規(guī)程1.目的目的為規(guī)范紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選、鑒定的技術(shù)操作，保證檢查結(jié)果準(zhǔn)確和臨床輸血安全、有效，依據(jù)《輸血實(shí)驗(yàn)室管理程序》有關(guān)條款的要求制定本規(guī)程。2.適用范圍適用范圍本規(guī)程適用于本院紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的篩查。3.職責(zé)職責(zé)輸血科具有專業(yè)技術(shù)資格的人員負(fù)責(zé)紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的篩選和鑒定，但只對(duì)所篩選或鑒定的標(biāo)本負(fù)責(zé)。4.相關(guān)文件相關(guān)文件試劑采購(gòu)、保存和使用管理程序設(shè)備采購(gòu)、使用管理

2、程序消毒與清潔管理程序標(biāo)本采集、運(yùn)輸、保存和報(bào)廢管理程序5.相關(guān)記錄相關(guān)記錄儀器設(shè)備的采購(gòu)、使用和維護(hù)記錄儀器的溫度記錄恒溫水溫箱的換水和消毒記錄消毒液的配置記錄清潔消毒記錄試劑采購(gòu)、使用記錄標(biāo)本交接和報(bào)廢記錄6.實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理采用鹽水介質(zhì)法、凝聚胺法或抗球蛋白法等試驗(yàn)使受檢者血清（血漿）與篩選紅細(xì)胞反應(yīng)，檢測(cè)受檢者血清（血漿）中是否存在紅細(xì)胞不規(guī)則抗體，紅細(xì)胞不規(guī)則抗體陽性者進(jìn)一步與譜紅細(xì)胞反應(yīng)，根據(jù)反應(yīng)格局鑒定抗體特異性。7.儀器

3、設(shè)備和檢測(cè)環(huán)境儀器設(shè)備和檢測(cè)環(huán)境7.1.儀器設(shè)備等：玻璃試管(75X12mm)、玻片、記號(hào)筆、一次性塑料滴管、顯微鏡、交叉配血專用離心機(jī)、試管架、恒溫水溫箱、試劑保存冰箱、標(biāo)本保存冰箱。7.2.檢測(cè)環(huán)境：室溫應(yīng)控制在18~27℃，濕度應(yīng)保持在30~70%。8.試劑試劑①生理鹽水、凝聚胺試劑、直接抗人球蛋白試劑（抗IgGC3d），均為有合格證件的正品。②市售O型篩選紅細(xì)胞：為三支以上不同人份的3%篩選紅細(xì)胞，均為有合格證件的正品?；蜃灾芆

4、型篩選紅細(xì)胞：選擇已確認(rèn)ABO血型為O型的健康者，采集EDTAK2抗凝血標(biāo)本離心，取少許紅細(xì)胞置于試管中，用生理鹽水離心洗滌3次得壓積紅細(xì)胞[3400轉(zhuǎn)3行《直接抗人球蛋白試驗(yàn)操作規(guī)程》。②結(jié)果判讀：同10.2.②。10.4.紅細(xì)胞不規(guī)則抗體特異性鑒定紅細(xì)胞不規(guī)則抗體特異性鑒定對(duì)紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)陽性的血標(biāo)本，建議受檢者到省級(jí)以上三甲醫(yī)院作進(jìn)一步的紅細(xì)胞不規(guī)則抗體特異性鑒定。11.質(zhì)量控制質(zhì)量控制11.1.進(jìn)行紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選

5、試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)至少選擇1種可檢出IgG抗體的方法。11.2.所有試劑均應(yīng)在有效期內(nèi)使用，每批試劑使用前均應(yīng)對(duì)試劑進(jìn)行質(zhì)量控制，以確保質(zhì)量符合要求。11.3.操作時(shí)，應(yīng)同步設(shè)置必要的陰性、陽性和自身對(duì)照。12.注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)12.1.多數(shù)IgG類紅細(xì)胞不規(guī)則抗體比IgM類紅細(xì)胞不規(guī)則抗體更有臨床意義，鹽水介質(zhì)法通常只能檢出IgM類紅細(xì)胞不規(guī)則抗體，不宜單獨(dú)采用鹽水介質(zhì)法檢測(cè)紅細(xì)胞不規(guī)則抗體，可結(jié)合凝聚胺法或抗球蛋白法。12.2.理論上，凝聚

6、胺法除不能檢出抗K外，其它紅細(xì)胞血型抗體均可檢出，但實(shí)際工作中許多紅細(xì)胞血型弱抗體（包括IgM和IgG類）不能被凝聚胺法檢出，對(duì)部分IgM類血型抗體的檢測(cè)，凝聚胺法甚至沒有鹽水介質(zhì)法敏感。12.3.抗球蛋白法對(duì)有臨床意義的IgG類抗體檢測(cè)敏感，且可鑒別多數(shù)無臨床意義的抗體，但本方法操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)，目前尚不能實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，不適合批量血標(biāo)本的檢測(cè)。12.4.紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)檢出自身抗體時(shí)，應(yīng)采用自身吸收試驗(yàn)后，再檢測(cè)血清（血漿）中是否

7、還有同種不規(guī)則抗體。12.5.用于紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)的篩選細(xì)胞，應(yīng)盡可能多地表達(dá)有臨床意義的抗體對(duì)應(yīng)的抗原，而且純合子基因所表達(dá)的抗原更有利于相應(yīng)抗體的檢出。要求篩選細(xì)胞必須表達(dá)D、C、E、c、e、M、N、S、s、P、Lea、Leb、K、k、Fya、Fyb、Jka和Jkb18種抗原。12.6.由于用于紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩選試驗(yàn)的篩選細(xì)胞很難表達(dá)所有有臨床意義的抗體對(duì)應(yīng)的抗原，以往免疫所產(chǎn)生的抗體也可降至難以檢出的水平，故無論采用何種