三聚氰胺(酸)對(duì)腎臟毒性的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及干預(yù)研究.pdf

1、三聚氰胺（Melamine）是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化合物，是重要的有機(jī)化工原料。2007年3月至今，美國(guó)發(fā)生4000多起貓、狗等寵物中毒死亡事件。美國(guó)食品藥品管理局調(diào)查顯示，在回收的寵物食品、死亡動(dòng)物的尿液結(jié)晶和腎臟細(xì)胞中都發(fā)現(xiàn)有三聚氰胺和三聚氰酸。加拿大安大略省圭爾夫大學(xué)（University of Guelph）的研究發(fā)現(xiàn)，三聚氰胺和三聚氰酸反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生影響腎臟功能的結(jié)晶。2008年我國(guó)三聚氰胺污染奶粉導(dǎo)致重大公共衛(wèi)生安全事件，引起

2、國(guó)內(nèi)外廣泛關(guān)注；嬰幼兒進(jìn)食污染奶粉后發(fā)生泌尿系統(tǒng)結(jié)石，并導(dǎo)致腎功能損害，嚴(yán)重病例最終導(dǎo)致腎衰或死亡。除了奶粉外，糖果、餅干、雞蛋等食品也受到三聚氰胺污染的報(bào)道。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)三聚氰胺遇強(qiáng)酸或強(qiáng)堿時(shí)水解，胺基逐步被羥基取代，首先生成三聚氰酸二酰胺，再水解生成三聚氰酸一酰胺，最后水解成三聚氰酸。三聚氰酸也屬于三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化合物，結(jié)構(gòu)與三聚氰胺相似，是三聚氰胺的衍生物；常用于除草劑、染料、樹脂、水池消毒劑等，滲透于人們?nèi)粘Ｉ詈凸ぷ?。?/p>

3、前，有關(guān)三聚氰胺、三聚氰酸、三聚氰胺.三聚氰酸對(duì)腎臟的毒性作用和可能的遠(yuǎn)期并發(fā)癥尚無(wú)深入研究，亦缺乏安全有效的干預(yù)措施。
　　 目的：研究三聚氰胺（酸）作用于新生SD大鼠和成年SD大鼠后急、慢性毒性反應(yīng)，探討三聚氰胺（酸）對(duì)幼年SD大鼠和成年SD大鼠腎臟的損害情況，并對(duì)其損害作用進(jìn)行干預(yù)研究。
　　 方法：選取21窩7日齡新生SD大鼠、8窩20日齡幼年SD大鼠和132只成年SD大鼠。將21窩7日齡新生SD大鼠和84只成年

4、大鼠分別隨機(jī)分為三聚氰胺高劑量組（NM，M），三聚氰胺低劑量組（Nm，m），三聚氰酸高劑量組（NA，A），三聚氰酸低劑量組（Na，a），三聚氰胺.三聚氰酸高劑量組（NMA，MA），三聚氰胺-三聚氰酸低劑量組（Nma，ma）和正常對(duì)照組（NN，N）；每天給予相應(yīng)劑量三聚氰胺（酸）灌胃。8窩20日齡幼年SD大鼠和48只成年大鼠分別分為：三聚氰胺-三聚氰酸加金錢草干預(yù)組（a，A），三聚氰胺-三聚氰酸加枸櫞酸干預(yù)組（b，B），三聚氰胺-三聚氰酸

5、加碳酸氫鈉干預(yù)組（c，C），三聚氰胺-三聚氰酸加自來(lái)水組（d，D），三聚氰胺-三聚氰酸自然恢復(fù)組（e，E），正常對(duì)照組（f，F(xiàn)），其中自然恢復(fù)新生組大鼠3窩，自然恢復(fù)成年組大鼠18只，a組、A組、b組、B組、c組、C組、d組、D組、f組和F組隨機(jī)均分。
　　 各實(shí)驗(yàn)組分別于灌胃第3天，15天，60天隨機(jī)處死各劑量組相同數(shù)量的大鼠，稱取體重、肝、腎重量，并檢測(cè)血液常規(guī)生化指標(biāo)；觀察肝腎臟組織學(xué)變化。各干預(yù)組于灌胃第30天處死，自然

6、恢復(fù)組分別于灌胃后第15天、30天、60天處死相同數(shù)量的大鼠；稱取體重、腎重量，檢測(cè)血液常規(guī)生化指標(biāo)；觀測(cè)腎臟組織學(xué)變化。腎臟晶體沉積程度分為陰性（-），弱陽(yáng)性（+），陽(yáng)性（++），強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。電鏡觀察各組腎單位表現(xiàn)。
　　 結(jié)果：NN組、Nm組、NM組、Na組、NA組新生鼠體重逐漸增加；NMA組和Nma組體重先增加，然后減輕。N、m、M、a、A組成年鼠體重先增加，然后維持在一個(gè)水平，其中M組在近60天時(shí)體重逐漸下降；MA

7、組和ma組體重持續(xù)減輕。解剖顯微鏡顯示腎臟晶體沉積程度：NM組在60天時(shí)為（+）；Nm組、NA組、Na組在3天、15天和60天均為（-）；NMA組在3天為（+），15天為（++），40天（+++）；Nma組在3天和15天均為（-），60天為（++）；M組3天為（-），15天為（+），60天為（+++）；m組3天和15天均為（-），60天為（+）；A組3天和15天均為（-），60天為（++）；a組3天和15天均為（-），60天為（+）；M

8、A組3天和15天均為（+++）；ma組3天為（++），15天為（+++）；N組3天、15天和60天均為（-）。電鏡觀察到含結(jié)石的腎小管出現(xiàn)微絨毛減少或消失、粒細(xì)胞浸潤(rùn)等炎性反應(yīng)。NM組、MA組、NMA組、Nma組、M組、A組和ma組隨著灌胃時(shí)間的延長(zhǎng)，腎體重比、尿素氮、肌酐、尿酸值增加；Nm組、NA組、Na組、m組、a組與對(duì)照組無(wú)差異。各組肝臟HE染色、肝體重比、血谷丙轉(zhuǎn)氨酶值和谷草轉(zhuǎn)氨酶值均無(wú)明顯異常。
　　 a組、b組、c組

9、、d組、e組、f組、F組體重逐漸增加；A組、B組、C組、D組體重逐漸減少；E組體重先減少后增加。干預(yù)組和自然恢復(fù)組解剖顯微鏡顯示腎臟晶體程度：b組，c組，d組，e組，f組，F(xiàn)組均為（-）；A組為（++）；B組為（++）；C組為（-）；D組為（+）；a組為（+）；E組15天為（+++），E組30天為（+++），E組60天為（++）。干預(yù)組中A組、B組、E組腎體重比明顯高于C、D、F組，其中E組隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，腎體重比減小。