peg化5-fu納米粒制備表征及其在大鼠體內(nèi)的初步藥動學(xué)研究論文答辯ppt

1、,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,藥學(xué)院第三屆“藥苑之星”結(jié)題匯報(bào),PEG化5-Fu納米粒制備表征及其在大鼠體內(nèi)的初步藥動學(xué)研究,,,,匯報(bào)人：姚夢雪班級：12藥劑指導(dǎo)老師：孫黎 陳衛(wèi)東,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,目 錄,CONTENTS,研究目的及意義,研究內(nèi)容,研究結(jié)果,致謝,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,目 錄,CONTEN

2、TS,研究目的及意義,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,1,研究目的及意義,,,,,目前臨床治療消化系統(tǒng)腫瘤的首選藥物,在殺滅腫瘤細(xì)胞的同時(shí)對人體正常細(xì)胞也具有殺傷作用,毒副作用大，消除半衰期很短(6～21 min),嘧啶拮抗劑，屬于細(xì)胞周期特異性藥物,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,在納米粒表面引入聚乙二醇（PEG）長鏈能對納米粒表面進(jìn)行改造，達(dá)到逃避單核細(xì)胞吞噬系統(tǒng)(

3、MPS)的識別、吞噬作用而延長納米粒在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間,卵磷脂是一種天然磷脂脂質(zhì)混合物,經(jīng)常用于制備各種納米給藥系統(tǒng)，如脂質(zhì)納米粒、脂質(zhì)體、膠束、納米粒等，被認(rèn)為是一種安全的、具有生物相容性的輔料,聚乙二醇,卵磷脂,,1,研究目的及意義,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,1,研究目的及意義,,針對5-Fu在臨床應(yīng)用中存在的問題，預(yù)期將其制備成能在一定程度上彌補(bǔ)其缺陷且易于口服的納米粒，并加以PEG進(jìn)行修飾，

4、制得PEG修飾5-Fu納米粒（PEG-5-Fu-NPS），旨在提高藥物的體內(nèi)滯留時(shí)間和生物利用度，以期提高5-Fu的臨床應(yīng)用價(jià)值，最終為惡性腫瘤的治療提供有價(jià)值的參考,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,目 錄,CONTENTS,研究內(nèi)容,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,5-Fu處方前研究,色譜柱：WondaSil C18柱（4.6×250mm,5μ

5、m）流動相：甲醇：水（10:90）流速：1.0mL/min檢測波長：265nm柱溫：30℃進(jìn)樣量：20μL,,1.色譜條件,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,5-Fu處方前研究,,2.溶液配制,精密稱取1mg5-Fu原料藥于10mL容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，即得100μg/mL的5-Fu儲備液,分別精密吸取儲備液適量，配制成濃度為0.25、0.5、1、2、4、8、16μg/m

6、L的系列溶液,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,精密量取濃度為 0.25、0.5、1、2、4、8、16μg/mL對照品溶液進(jìn)樣,以(C) 對峰面積(A) 作線性回歸得標(biāo)準(zhǔn)曲線。得標(biāo)準(zhǔn)曲線：A=70893C+528.08，R2=0.9999,表明5-Fu在0.25-16μg/mL范圍內(nèi)，與峰面積呈良好的線性關(guān)系,5-Fu處方前研究,,3.標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

7、,,,,,,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,5-Fu處方前研究,,精密量取質(zhì)量濃度為 0.5、2、16μg/mL的對照品溶液，于1d 內(nèi)每隔3h進(jìn)樣一次，共測定3次，計(jì)算日內(nèi)精密度；每 1d進(jìn)樣 1次，連續(xù)進(jìn)樣測定3d，計(jì)算日間精密度。低，中，高濃度的日內(nèi)精密度和日間精密度（RSD） 均小于 2%，符合要求,4.精密度實(shí)驗(yàn),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,分別精密量取濃度為 0.5、2、16μ

8、g/mL的對照品溶液5mL ,各3份于10mL量瓶中，加入空白納米粒0.5mL，以甲醇5mL 破乳后流動相定容至刻度，搖勻，進(jìn)樣測定加樣回收率,5-Fu處方前研究,,分別取對照品溶液、5-Fu納米粒破乳液及空白納米粒破乳液各20μL注入高效液相色譜儀，所得色譜中可知5-Fu達(dá)到基線分離且峰形良好，保留時(shí)間4.5min左右，溶劑及其輔料不干擾5-Fu的測定,5.專屬性實(shí)驗(yàn),6.回收率實(shí)驗(yàn),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,

9、,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,5-Fu納米粒的制備,,將藥物分散在與水不相溶且沸點(diǎn)比水低的溶媒中，形成W/O型乳劑，另配一個(gè)含有穩(wěn)定劑的水溶液并與W/O乳劑混合，形成W/O/W型復(fù)乳,復(fù)乳法,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,,含藥物的內(nèi)水相 (5-Fu+PEG-SA),,有機(jī)溶劑 （二氯甲烷+磷脂）,,油包水初乳 W/O,,復(fù)乳（W/O/W）,,納米粒,,含乳

10、化劑的外水相 (F68+水),,,,,超聲,超聲,磁力攪拌,5-Fu納米粒的制備,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,采用超濾離心法分離載藥納米粒，高效液相色譜法（HPLC）測定游離藥物的含量。取制備出的5-Fu納米粒1mL于超濾離心管中，3000r/min離心，分離沉淀，取上清液用甲醇稀釋至一定倍數(shù)，過0.45μm微孔濾膜后進(jìn)行HPLC分析，測定峰面積，根據(jù)峰面積計(jì)算游離的藥物含

11、量,根據(jù)公式計(jì)算納米粒的包封率和載藥量。,5-Fu納米粒的制備,,包封率載藥量的測定,包封率=（投藥量-游離藥物量)/投藥量×100％載藥量=（投藥量-游離藥物量)/納米粒的重量×100％,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,2,研究內(nèi)容,5-Fu: 2mL 2.5mL 3mLPEG-SA：25mg 50mg 75mg F-68: 0.1% 0.3% 0.5%

12、,溫度： 30℃ 40℃ 50℃ 攪拌時(shí)間： 1h 1.5h 2h攪拌速度: 500r/min 800r/min 1000 r/min,單因素考察,5-Fu納米粒的制備,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,目 錄,CONTENTS,研究結(jié)果,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,3,研究結(jié)果,將所制得PEG化5-Fu納米粒對光觀察，有輕微藍(lán)色乳光粒徑

13、測定結(jié)果表明，5-Fu納米粒粒徑基本呈正態(tài)分布，其平均粒徑為378.5nm將所制得的5-Fu納米粒于4℃條件下放置7天，形態(tài)較穩(wěn)定，無絮凝現(xiàn)象出現(xiàn),PEG化5-Fu納米粒的質(zhì)量評價(jià),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,目 錄,CONTENTS,致謝,,致謝,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,4,感謝指導(dǎo)老師孫黎老師，陳衛(wèi)東老師的悉心指導(dǎo)，使得實(shí)驗(yàn)得以進(jìn)行,感謝實(shí)驗(yàn)室?guī)熜謳熃憬o