《微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)》課件(新人教版選修1)高二

1、,是一切肉眼看不見(jiàn)或看不清楚的微小生物的總稱(chēng)。,一、微生物,微生物,病毒細(xì)菌放線(xiàn)菌真菌原生動(dòng)物,,,是一切肉眼看不見(jiàn)或看不清楚的微小生物的總稱(chēng)。,一、微生物,?1.分類(lèi),特點(diǎn)：小 簡(jiǎn) 低,病毒的結(jié)構(gòu),?2.病毒,病 毒,,SARS冠狀病毒、 禽流感病毒,,朊病毒（蛋白質(zhì)病毒）,病毒的增殖,,細(xì)菌的外形與大小,?3.細(xì)菌,A. 球菌 B. 桿菌 C. 弧菌 常見(jiàn)的細(xì)菌三種典型形態(tài),

2、,,A,B,C,細(xì)菌的結(jié)構(gòu),,芽孢：細(xì)菌形成的橢圓形的休眠體,芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。　　芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散?！　‘?dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌。,,異養(yǎng)菌：腐生菌寄生菌 　大部分病原菌,,細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型,根據(jù)細(xì)菌所利用的能源和碳源的不同，將細(xì)菌分為兩大營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型?！　∽责B(yǎng)菌：,光能自養(yǎng)型：光合細(xì)菌化能自養(yǎng)型：硝化細(xì)菌，鐵細(xì)菌，硫細(xì)

3、菌,菌　落,單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見(jiàn)的，具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落?！　【涫氰b定菌種的重要依據(jù)。,?4.放線(xiàn)菌,⑴結(jié)構(gòu)：　單細(xì)胞原核生物　分支狀的菌絲（基內(nèi)菌絲、氣生菌絲）,（2）繁殖,孢子絲|孢子,鏈霉素、土霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素、慶大霉素,微生物中發(fā)現(xiàn)了幾千種抗生素，其中2/3是由放線(xiàn)菌產(chǎn)生的,⑶應(yīng)用:,?5.真菌,,酵母菌,酵母菌和霉菌,青霉,生 殖,腐生生活,

4、孢子生殖,微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件：,,（1）合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件,（2）確保其他微生物無(wú)法混入,一. 培養(yǎng)基,1. 概念：,按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。,固體培養(yǎng)基：菌落,液體培養(yǎng)基：,表面生長(zhǎng),均勻混濁生長(zhǎng),沉淀生長(zhǎng),半固體培養(yǎng)基：,2. 種類(lèi)：（按物理形態(tài)分）,液體培養(yǎng)基 增菌、工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基,,應(yīng)用微生物純化（分離）、鑒定、計(jì)數(shù)和菌種保存等方面,按照培養(yǎng)基用途分,選

5、擇性培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基,按照培養(yǎng)基的成分來(lái)分,合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基,,3. 成分：,思考：各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都包括哪些成分？,水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源、（生長(zhǎng)因子）,+滿(mǎn)足微生物對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的要求,C,碳源：如CO2和糖類(lèi)、脂肪酸等有機(jī)物，構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物，自養(yǎng)微生物需無(wú)機(jī)碳，異氧微生物需有機(jī)碳還能提供能量。氮源：如N2、氨鹽、硝酸鹽和牛肉膏、蛋白胨等，主要用來(lái)合成蛋白質(zhì)、核酸及

6、含氮代謝物等，無(wú)機(jī)氮源可為硝化細(xì)菌提供能量。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。,C,二. 無(wú)菌技術(shù),思考：1. 什么是無(wú)菌技術(shù)？包括哪些方面？2. 無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？（P15旁欄思考）3. 消毒和滅菌有何不同？4. 常用的消毒和滅菌方法有哪些？,無(wú)菌技術(shù)：泛指培養(yǎng)微生物操作中，所有防 止雜菌污染的方法。,無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作

7、者自身被微生物感染。,芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力?！　⊙挎哂中∮州p，可以隨風(fēng)飄散。　　當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌。,3. 常用的消毒方法：,煮沸消毒法，巴氏消毒法，紫外線(xiàn)或化學(xué)藥劑消毒法,常用的滅菌方法：,灼燒滅菌干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 ：100kPa 121℃ 15-30min,判斷下列各項(xiàng)是否需要消毒或滅菌。如需要，選擇合適方法。（1）豆?jié){

8、 （2）游泳池 （3）超凈工作臺(tái) （4）玻棒、試管、吸管、錐形瓶 （5）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)皿 （6）無(wú)菌水 （7）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（8）接種環(huán)、接種針（9）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手,牛奶,接種室、接種箱或超凈工作臺(tái),接種工具，接種環(huán)、接種針或其他金屬用具,玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）,三. 實(shí)驗(yàn)操作---大腸桿菌的純化培養(yǎng),（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 計(jì)算－稱(chēng)量－溶化－滅菌－倒平板（二）純化大腸桿菌 最

9、常用的接種方法有：平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法,（冷卻至50℃）,問(wèn)題討論,涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線(xiàn)與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？,應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周?chē)鹊取?菌種的保存,1、臨時(shí)保藏法： 對(duì)象： 溫度： 缺點(diǎn)： 2、甘油管藏法： 對(duì)象：

10、 溫度：,結(jié)果分析與評(píng)價(jià)課題延伸,（P20）,頻繁使用的菌種,4℃（冰箱）,容易被污染或產(chǎn)生變異,長(zhǎng)期保存的菌種,-20℃（冷凍箱）,接種環(huán),接種針,倒平板,討論1，2,討論3，4,,平板劃線(xiàn)法,討論2，3,1.為什么在操作的第一步以及每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？,操作的第一步灼燒接種環(huán)： 每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)：劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒接種環(huán)：,避免接種環(huán)上可

11、能存在的微生物污染培養(yǎng)物；,殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線(xiàn)時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。,及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。,2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線(xiàn)？3.在作第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)？,以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。,劃線(xiàn)后，線(xiàn)條末

12、端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少， 每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落,涂布器,1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 ℃左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？,提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。,通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)

13、基,3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？,平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高， 將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。,不要空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,選擇培養(yǎng)基,不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基: