醫(yī)學(xué)免疫學(xué)補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)(教學(xué))

1、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn),Complement-dependent cytotoxicity,,www.themegallery.com,LOGO,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,,www.themegallery.com,LOGO,實(shí)驗(yàn)原理,,,www.themegallery.com,LOGO,實(shí)驗(yàn)主要材料,,,,,,www.themegallery.com,LOGO,操作步驟,一、小鼠胸腺細(xì)胞懸液的制備 4~6周齡小

2、鼠斷頸處死，取出胸腺放至含有3 mL RPMI 1640培養(yǎng)液的平皿中，以剪刀和鑷子將組織處理成單細(xì)胞懸液，利用移液器取出后放入試管內(nèi)備用。,胸腺,,注意事項(xiàng)： 小鼠斷頸要迅速、徹底，以防小鼠掙扎過程中出血過多，也可事先摘眼球放血。,,,www.themegallery.com,LOGO,操作步驟,?振蕩混勻，置37?C水浴箱，10min?,?振蕩混勻，置37?C水浴箱，20min?,?振蕩混勻，滴片加蓋玻片，

3、鏡檢,Ag+Ab,+ complement,二、細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)： 按下表加樣,,,,PBS,www.themegallery.com,LOGO,結(jié)果觀察,臺(tái)盼藍(lán)染色：如果細(xì)胞膜不完整、破裂，臺(tái)盼藍(lán)染料進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞變藍(lán)。 如果細(xì)胞膜完整，細(xì)胞不為臺(tái)盼藍(lán)染色，則為正常細(xì)胞或凋亡細(xì)胞。此方法對反映細(xì)胞膜的完整性，區(qū)別壞死細(xì)胞有意義。,A,B,A. 對照組 B. 實(shí)驗(yàn)組,注意事項(xiàng)：