根霉菌的篩選

1、根霉菌的篩選我國是一個農(nóng)業(yè)大國，農(nóng)作物的秸稈是一個十分巨大的潛在可用資源，近年來，利用微生物所產(chǎn)生的纖維素酶將秸稈轉(zhuǎn)化為營養(yǎng)價值較高的蛋白質(zhì)飼料備受人們的青睞。而至今未能大量把纖維素類物質(zhì)作為飼料生產(chǎn)原料，其主要原因之一是生產(chǎn)上缺乏高纖維索酶活的菌。選取優(yōu)良的產(chǎn)纖維素酶菌種是提高纖維素酶活力的關(guān)鍵。不同微生物合成的纖維索酶在組成上有顯著的差異，對纖維素的酶解能力也不大相同。由于放線菌的纖維素酶產(chǎn)量極低，研究很少。細菌的產(chǎn)量也不高，主要是

2、葡聚糖內(nèi)切酶，且大多數(shù)對結(jié)晶纖維素沒有活性，所產(chǎn)生酶是胞內(nèi)酶或吸附在菌壁上，很少能分泌到細胞外，增加提取純化難度，在工業(yè)上很少應(yīng)用。因此，篩選具有高活性纖維素酶的秸稈降解微生物菌株以及相關(guān)研究是當前研究的熱點和難點。本實驗就從腐爛稻草及其附近土壤中如何篩選出可降解菌種進行探討。1.篩選的簡要流程：菌種平板篩CMCNa剛果紅復(fù)篩濾紙失重率固態(tài)酶曲培養(yǎng)2.1纖維素分解茵的分離樣品①自制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl5

3、g，H201000mL，pH值為7.0—7.2，在121℃滅菌20min，將稻草粉加入水和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液在28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。②土壤浸出液。2.2纖維素分解茵的分離、純化培養(yǎng)基①羧甲基纖維素培養(yǎng)基：CMC—Na15g，NH4N031g，酵母膏1g，MgS047H200.5g，KH2P04lg，H201000mL。②纖維素剛果紅培養(yǎng)基：K2HPO405g，CMC—濾紙是木材加工造紙的最終產(chǎn)品之一，植物木質(zhì)部含有大量纖維素、半纖維素和木

4、質(zhì)素，在造紙過程中除去了半纖維素和木質(zhì)素，濾紙是由纖維素構(gòu)成的，而且是一種天然的纖維素。纖維索是由葡萄糖分子以B—1，4糖苷鍵連接而成，因此本試驗用濾紙作為纖維素提供碳源，雖然需要較長的時間才能有結(jié)果，但能準確反映分離菌對纖維素的降解能力。濾紙片在加入纖維素酶溶液后自濾紙邊緣逐漸破壞，最后至全部崩解。其逐漸變化過程為：第2天濾紙邊緣膨脹(圖3一a)，第4天濾紙整齊膨脹并下彎，第6天濾紙不定形(圖3一b)，第8天濾紙全成糊。菌株發(fā)酵液中的