2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、分類號(hào)密級(jí)≥▲,^單位代碼:學(xué)號(hào):紊鼻孥碩士學(xué)位論文ShandongUniversityMaster’SThesis10422200210884灰色鏈霉菌RX17溶菌酶基因文庫的構(gòu)建及篩選作者姓名藍(lán)瞳丕專業(yè)堂生物堂指導(dǎo)教師姓名強(qiáng)垂壁專業(yè)技術(shù)職務(wù)熬援2Q逝年上月j亙_日山東大學(xué)碩士學(xué)位論文灰色鏈霉菌RX17溶菌酶基因文庫的構(gòu)建及篩選摘要:灰色鏈霉菌(Streptomycesgriseus)Rx17所產(chǎn)的溶菌酶系,不僅具有B一1,4一^L乙

2、酰胞壁質(zhì)酶活力,還具有pl,4一心6一伊二乙酰胞壁質(zhì)酶活力。前期研究發(fā)現(xiàn)本菌株產(chǎn)生溶菌酶含有多個(gè)組分。Rl、R2和R3,對(duì)金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)及變形鏈球菌(StreptococcusmumnsIn【曲ritt)有溶解作用。本文采用隨機(jī)鳥槍法構(gòu)建基因文庫,篩選溶菌酶基因,為今后溶菌酶基因組的研究奠定基礎(chǔ)。限制性內(nèi)切酶Sad3AI對(duì)灰色鏈霉菌(Sgriseus)RX一17基因組DNA進(jìn)行不完全酶切,回收

3、210kb的DNA片段;回收片段與經(jīng)毖蒯I酶切、CIAP去磷酸化處理后的pUCl9連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化昱coliDH5a感受態(tài)細(xì)胞;通過Amp抗性及a互補(bǔ)原理進(jìn)行初篩,構(gòu)建基因文庫?;疑溍咕?Sgriseus)溶菌酶對(duì)變形鏈球菌(&m“細(xì)堪Ingbrift)有著顯著的溶解作用,因此我們用變形鏈球菌(Smumn$hlgbdu)作底物用酶活測(cè)定的方法對(duì)文庫進(jìn)行篩選。25℃低溫誘導(dǎo)對(duì)文庫進(jìn)行篩選,得到兩株具有酶活的重組子。破碎細(xì)胞,20

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