實驗4 微生物菌落的觀察

1、實驗四 微生物菌落的觀察,目的要求實驗原理實驗材料實驗程序結果與思考題,目 的 要 求,學會觀察、識別各種不同的微生物菌落的方法。 掌握平板菌落計數的方法，運用所學的知識詳細的描述所分離平板上的各種微生物菌落。學習并掌握斜面接種的操作技術。,實 驗 原 理,,對于一些難區(qū)別的菌落還應該借助顯微鏡來觀察其細胞形態(tài)以進一步做出正確的判斷。,實 驗 材 料,實驗三所作的平板培養(yǎng)物： A，在細菌培養(yǎng)基上

2、生長的各種菌落； B，在霉菌培養(yǎng)基上生長的各種菌落。實驗二所作的試管斜面，酒精燈、接種環(huán)等。菌種：大腸桿菌E.coli枯草桿菌B.subtilis枯草桿菌B.subtilis,實 驗 程 序Ⅰ（觀察描述菌落特征）,運用所掌握的各種微生物菌落的特點，觀察、識別、描述所做樣品的兩個平板上的所有菌落,并將結果填入表1中。,常用的菌落描述詞語： 大?。捍?、中、小、針尖狀 形狀：圓形、隆起、扁平、

3、假根狀、不規(guī)則狀等； 邊緣情況：整齊、波形、裂葉狀、鋸齒狀等 表面情況：干燥、濕潤、光滑、皺褶、顆粒狀、龜裂狀等；,表1 平板菌落特征描述,某些有代表性的菌落圖片：,細菌,酵母菌,啤酒酵母,菌落一般較細菌菌落大且厚，表面濕潤，粘稠，易被挑起，多為乳白色、土黃色，少數呈紅色。,常見的酵母菌的菌落,菌落形態(tài)較大，質地一般比放線菌疏松，外觀干燥，不透明，呈現或緊或松的蛛網狀、絨毛狀或棉絮狀；菌落與培

4、養(yǎng)基的連接緊密，不易挑取，菌落正反面的顏色和邊緣與中心的顏色常不一致等。,霉菌,霉菌的菌落,青霉屬 毛霉屬,定義:根據微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征而設計的計數方法，即一個菌落代表一個單細胞。統計菌落數目，即可計算出樣品中的含菌數。此法所計算的菌數是培養(yǎng)基上長出來的菌落數，故又稱活菌計數。 對土壤中的微生物進行計數

5、,將結果填入表2中。,實 驗 程 序Ⅱ（平板菌落計數）,表2 土壤中微生物計數結果,計數方法: 每克土壤的菌數=同一稀釋度幾次重復的菌落平均數×10×稀釋倍數,計算結果時，常按下列標準從接種后的3個稀釋度中選擇一個合適的稀釋度，求出每克菌劑中的含菌數。    （1）同一稀釋度各個重復的菌數相差不太懸殊。    （2）細菌、放線菌、酵母菌以每

6、皿30—300個菌落為宜，霉菌以每皿10—100個菌落為宜。選擇好計數的稀釋度后，即可統計在平板上長出的菌落數，統計結果按下式計算。,實 驗 程 序Ⅲ（無菌操作技術 ）,在酒精燈火焰旁操作，將所給的兩種菌種無菌操作，轉接到大試管斜面，并貼標簽，培養(yǎng)。,點燃酒精燈左手夾住兩試管：斜面向上，45～0度角。灼燒接種環(huán)右手拔棉塞，管口過火取菌標記培養(yǎng),,,將觀察到的菌落特征填入表1中。將平板菌落計數的結果填入表2中。斜面