《豬肉中卡拉膠的檢測》（征求意見稿）編制說明

1、農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《豬肉中卡拉膠的檢測》農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《豬肉中卡拉膠的檢測》（征求意見（征求意見稿）編制說明稿）編制說明一、工作簡況（一）任務(wù)來源（一）任務(wù)來源近年來，生豬屠宰前注膠保水增重的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生。注膠豬肉是注水豬肉的升級(jí)版。不法分子在生豬宰前利用卡拉膠作為粘稠劑、保水劑，用于增加動(dòng)物機(jī)體含水量，獲取非法收益。為改善“賣相”，不法商販還往往在灌膠的水中摻雜防腐劑、血水、工業(yè)色素等物質(zhì)，使豬肉顏色變得更加鮮艷，注膠肉不僅會(huì)改變?nèi)馄方M成，還

2、會(huì)增加致病微生物污染、細(xì)菌毒素中毒、重金屬超標(biāo)和致癌的風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重影響肉品的質(zhì)量安全。對(duì)于“注膠肉”的檢測，目前我國尚沒有相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)方法，文獻(xiàn)報(bào)道的方法主要為定性方法，并且檢出限較高，很難滿足行業(yè)監(jiān)管定量檢測的目的。因此，為保障豬肉產(chǎn)品的質(zhì)量安全，亟需制定敏感性高、準(zhǔn)確性好、檢測結(jié)果可靠的標(biāo)準(zhǔn)方法，用于豬肉產(chǎn)品中摻假卡拉膠的痕量檢測。該標(biāo)準(zhǔn)制定任務(wù)為全國屠宰加工標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)批復(fù)的2018年度農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目之一，是受農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)

3、產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管局委托，由中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心、山東信諾檢測技術(shù)有限公司等共同承擔(dān)完成。項(xiàng)目編號(hào)為：181821301092371064。（二）起草單位（二）起草單位本項(xiàng)目起草單位為：標(biāo)準(zhǔn)制定中的具體人員分工概況如下：（三）主要工作過程（三）主要工作過程1起草階段起草階段本標(biāo)準(zhǔn)任務(wù)于2018年5月30日下達(dá)。任務(wù)下達(dá)后，承擔(dān)單位成立了由方案設(shè)計(jì)、方法研究、樣品收集、技術(shù)驗(yàn)證和復(fù)核以及文稿撰寫等多方參與的標(biāo)準(zhǔn)起草研制小組，并針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)

4、內(nèi)容進(jìn)行了分工安排。標(biāo)準(zhǔn)研制組通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)及標(biāo)準(zhǔn)，收集了大量資料并進(jìn)行了梳理分析和方法技術(shù)路線確認(rèn)。之后，陸續(xù)開始了標(biāo)準(zhǔn)品配制、摸索配制方法、優(yōu)化儀器條件、確定線性范圍和儀器靈敏度。進(jìn)一步選取豬肉為基體，進(jìn)行前處理實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化，完善實(shí)驗(yàn)方案。方法初步建立后，再次對(duì)檢出限、定量限、線性范圍、校正曲線R2、回收率、精密度等指標(biāo)進(jìn)行確定、反復(fù)考查和驗(yàn)證。最后，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行匯總分析整理，形成標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿。2征求意見階段征求意見階段于8

5、0℃水浴中20min，每10min取出振搖一次。取出冷卻后，4000rpm離心5min，取上清液1mL，用乙腈1:1稀釋后，過濾膜（0.22m，有機(jī)相），待測。與BJS201804相比，本方法對(duì)前處理方法進(jìn)行了優(yōu)化，提高了方法回收率。3.測定測定與BJS201804相比，本方法優(yōu)化了儀器條件，包含流動(dòng)相種類和梯度、進(jìn)樣體積、質(zhì)譜參數(shù)等，進(jìn)樣體積由5L減少為1L，流動(dòng)相A相由10mM甲酸銨水溶液優(yōu)化為0.005molL乙酸銨水溶液，梯度洗

6、脫程序和質(zhì)譜參數(shù)也進(jìn)行了優(yōu)化，優(yōu)化后峰形尖銳，響應(yīng)高，無拖尾和前延現(xiàn)象；靈敏度更高，LOQ有明顯降低。4.計(jì)算公式計(jì)算公式計(jì)算公式直接影響了結(jié)果的準(zhǔn)確性。BJS201804中對(duì)豬肉中卡拉膠含量的計(jì)算公式進(jìn)行了規(guī)定，具體如下：10001000Mm?X式中：X—試樣中卡拉膠的含量，單位為克每千克（gkg）；m—由基質(zhì)加標(biāo)工作曲線計(jì)算出的供試品溶液中卡拉膠的含量，單位為毫克（mg）；M—試樣的質(zhì)量，單位為克（g）。以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立

7、測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。5.有關(guān)校正曲線有關(guān)校正曲線R2、方法回收率和精密度的依據(jù)、方法回收率和精密度的依據(jù)校正曲線R2、方法回收率和精密度均符合《GBT274042008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測》的要求。三、主要試驗(yàn)或驗(yàn)證的分析、綜述報(bào)告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果（一）主要試驗(yàn)或驗(yàn)證的分析、綜述報(bào)告（一）主要試驗(yàn)或驗(yàn)證的分析、綜述報(bào)告1.質(zhì)譜條件優(yōu)化：scan掃描母離子，優(yōu)化Fragment，碰撞電壓

8、、毛細(xì)管電壓、干燥氣溫度和流量等參數(shù)；2.空白加標(biāo)曲線配制：配制時(shí)要把握合適的溫度，保證標(biāo)準(zhǔn)品不凝固且能完全溶解；3.前處理反應(yīng)時(shí)間優(yōu)化：比較了80℃下反應(yīng)20min、1h、100min、2h時(shí)的回收率，確定最優(yōu)反應(yīng)時(shí)間；4.前處理凈化方式：比較了前處理方式有無沉淀劑的回收率、過C18固相萃取柱的回收率，最終確定最優(yōu)前處理凈化方式，保證方法的簡便易行及高回收率；5.進(jìn)樣體積：在其它色譜條件一致的條件下，通過減少進(jìn)樣體積，改善峰形；6.流