四溴雙酚A在小鼠體內(nèi)的分布和代謝研究.pdf

1、目的：四溴雙酚A具有疏水性和持久性，是一種離子型有機(jī)污染物，為灰白色的粉末，工業(yè)用途廣泛，常用于高分子聚合物的添加劑、貴金屬的催化劑、化學(xué)藥物、阻燃劑等。隨著TBBPA的全球使用量的迅猛增加，其在環(huán)境中的含量也日益提升。近年來(lái)，有關(guān)TBBPA在環(huán)境中的轉(zhuǎn)化和生物體內(nèi)的代謝研究，也越來(lái)越受人們關(guān)注。通過(guò)對(duì)小鼠樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和討論。研究TBBPA在小鼠體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄，有利于了解實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)的生理狀態(tài)和新陳代謝情況。

2、>　　方法：⑴實(shí)驗(yàn)樣品來(lái)源。以TBBPA為本體毒物，對(duì)處于“斷奶期”即出生21天的ICR小鼠進(jìn)行TBBPA灌胃暴毒。每天同一時(shí)間收集每只小鼠的糞便樣品后，進(jìn)行5、0.5和0mg/kg/d三種不同劑量TBBPA的急性毒理實(shí)驗(yàn)。⑵生物樣品（血液、肝臟、睪丸和糞便）的收集存放、消解與凈化、回收提取方法及標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立和優(yōu)化。根據(jù) TBBPA的分子結(jié)構(gòu)、溶解度等理化特性，設(shè)計(jì)多種有機(jī)溶劑的添加比例和次序，保證TBBPA有較高回收率。以迅速檢測(cè)出

3、樣品中TBBPA含量，且較少地影響樣品中代謝物質(zhì)鑒定為目的，探索微波萃取、固相萃取、超聲萃取、液-液萃取等相互結(jié)合的方法。⑶儀器檢測(cè)和數(shù)據(jù)分析。利用GC/MS儀器的SIM模式檢測(cè)TBBPA在ICR小鼠體“關(guān)鍵時(shí)段”的含量和比例。Full Scan模式檢測(cè)TBBPA及對(duì)應(yīng)的關(guān)鍵代謝產(chǎn)物，在不同時(shí)期的各組實(shí)驗(yàn)小鼠樣品中的差異。GC/MS工作站可以對(duì)色譜峰進(jìn)行解卷積，保留時(shí)間歸一化等數(shù)據(jù)預(yù)處理分析，也是本文選擇利用 GC/MS等相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，

4、測(cè)量TBBPA及其脫溴代謝產(chǎn)物的原因之一。
　　結(jié)果：①建立的樣品前處理結(jié)合GC/MS的檢測(cè)方法，對(duì)TBBPA定量準(zhǔn)確，同時(shí)，TBBPA體內(nèi)相互代謝產(chǎn)物的全掃描TIC圖譜有較為理想色譜峰分辨率。檢測(cè)時(shí)間短，增加了結(jié)果可信度；②通過(guò)使用不同的GC/MS儀器檢測(cè)方法，在小鼠肝臟、睪丸、血液和糞便樣品中均有檢測(cè)到 TBBPA的存在。糞便中TBBPA的濃度水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于在其它樣品中的濃度，在肝臟中也有較高的濃度。研究結(jié)果顯示通過(guò)灌胃的方式進(jìn)

5、入小鼠體內(nèi)的TBBPA很容易被胃腸吸收，并在短時(shí)間內(nèi)由肝臟和膽臟代謝后，大部分通過(guò)糞便以原型的形式排出體外，少量可以在體內(nèi)蓄積；③不同暴毒組的糞便樣品中TBBPA的濃度順序?yàn)椋?mg/kg/d組>0.5mg/kg/d組>0mg/kg/d組（高劑量組>低劑量組>對(duì)照組）；即實(shí)驗(yàn)小鼠糞便中TBBPA的排泄量與暴毒劑量之間存在正相關(guān)關(guān)系；④在脫毒期間，TBBPA在肝臟、血液和睪丸樣品中的濃度大小，有出現(xiàn)低劑量組等于甚至大于高劑量組的情況，說(shuō)明

6、灌胃劑量5mg/kg/d的TBBPA可能會(huì)激發(fā)小鼠機(jī)體對(duì)TBBPA代謝加速的機(jī)制，0.5mg/kg/d的TBBPA劑量下則沒(méi)有出現(xiàn)這種結(jié)果；⑤利用MS的NIST.11數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)照，在幼年小鼠處理組和對(duì)照組樣品匹配到明顯的差異性代謝物質(zhì)。與蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪和糖類分解代謝相關(guān)化合物，如賴氨酰呋喃糖基、硬脂酸、軟脂酸、葡萄糖胺等；有與機(jī)體的免疫反應(yīng)、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)等相關(guān)的類激素化合物，如花生四烯酸、孕酮激素、膽甾烯酮、睪丸激素等。這些化合物的代