游離棉酚及其代謝產物棉酚酮在動物體內殘留和組織分布研究.pdf

1、目的：1.本實驗通過對實驗大鼠、鯽魚、雞喂食含有棉酚的自制棉籽飼料，模擬動物進食過程，實驗周期內定期取實驗動物各組織、器官，建立 HPLC檢測實驗樣品中游離棉酚及其代謝產物（棉酚酮）殘留的方法。并采用高靈敏度的UPLC-MS/MS分析游離棉酚及其代謝產物在大鼠體內的組織分布。2.建立牛乳中游離棉酚及其旋光異構體的HPLC檢測方法。并根據上述方法對市售的動物源性食品進行游離棉酚及其代謝產物殘留的檢測。
　　方法：1.用自制的含定量棉

2、酚的棉籽飼料飼養(yǎng)實驗動物一定周期，定期取實驗動物各組織器官（心、肝、脾、肺、腎、肉、血漿），將各樣品勻漿，加入提取劑（0.2％甲酸乙腈溶液）及甘草次酸內標液，經除蛋白、離心等前處理方法后，采用HPLC及UPLC-MS/MS法確定動物體內各個組織器官中游離棉酚及其代謝產物的殘留和組織分布。2.采用以（R）-（-）-2-胺基-1-丙醇為手性拆分試劑、甘草次酸為內標物的柱前衍生高效液相色譜法，對牛乳中游離棉酚及其旋光異構體含量進行檢測。

3、>　　結果：1.HPLC及UPLC-MS/MS測定動物體內游離棉酚及其代謝產物的分析方法良好。HPLC法測定大鼠和雞體內各組織器官中游離棉酚及棉酚酮的線性范圍為0.5-20μg/mL，鯽魚為0.1-10μg/mL，檢出限0.03μg/mL。UPLC-MS/MS法檢測大鼠體內各組織器官中游離棉酚及棉酚酮的線性范圍均為0.01-10μg/mL，檢出限為0.002μg/mL。UPLC-MS/MS分析表明大鼠體內游離棉酚及棉酚酮的含量隨飼養(yǎng)時間

4、延長而蓄積增加，體內棉酚含量依次為：肝臟、血漿、脾臟、肺臟、心臟、睪丸（雄性）、腎臟、肌肉，且肝臟中蓄積最多，動物體內代謝物棉酚酮僅在肝臟中發(fā)現。通過對雌、雄大鼠進行對比分析，結果顯示棉酚在雌性大鼠體內的蓄積更高。2.牛乳中棉酚及其旋光異構體濃度線性范圍均為2-10μg/mL。3.運用所建立的檢測方法，對市售動物源性食品中游離棉酚及其代謝產物進行檢測，包括魚、雞、豬、羊（肝、肉）共58份樣品，檢出率為51.7%。
　　結論：本研究