動物源性食品中棉酚及其代謝產(chǎn)物gossypolone檢測技術(shù)研究.pdf

1、本文以棉酚為研究對象，初步研究了棉酚在土雞及鯽魚體內(nèi)的代謝產(chǎn)物;制備了棉酚代謝產(chǎn)物gossypolone;建立了雞肝中游離棉酚、氧化產(chǎn)物gossypolone、(+)-棉酚及(-)-棉酚LC-MS/MS定量分析方法;開展了對動物源性食品中游離棉酚及棉酚氧化產(chǎn)物gossypolone、(+)-棉酚及（-）-棉酚含量測定的市場抽樣調(diào)查。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)采用ESI-QTOF/MS對土雞、鯽魚的血漿、肝臟樣品進行分析，尋找到

2、主要代謝產(chǎn)物，即棉酚的氧化產(chǎn)物gossypolone，分子式為C30O26H11，結(jié)構(gòu)式為6，6'，7，7'-四羥基-5，5'-二異丙基-3，3'-二甲基-[2,2']-聯(lián)萘-1，1'，4，4'-四酮基-[8，8]-二甲醛，分子量為546.1526。
　　(2)用化學(xué)合成的方法，制備得到棉酚氧化產(chǎn)物gossypolone。同時，采用LC-MS/MS和ESI-QTOF/MS飛行時間質(zhì)譜對產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)進行驗證，使用HPLC對產(chǎn)物的純度進

3、行分析。分析結(jié)果顯示，試驗中所制備的產(chǎn)物分子量、分子式、結(jié)構(gòu)式均與棉酚氧化產(chǎn)物gossypolone一致，可以推測此產(chǎn)物為棉酚氧化產(chǎn)物gossypolone;產(chǎn)物純度≧95％。
　　(3)采用LC-MS/MS方法測定雞肝中棉酚及其氧化產(chǎn)物gossypolone的含量。通過方法學(xué)驗證及再驗證，樣品定量分析過程中不會受到生物樣品中內(nèi)源性基質(zhì)的干擾，線性良好，被分析生物樣品各方法學(xué)驗證指標基本滿足指導(dǎo)原則中的定量分析要求，可以用于雞肝、

4、雞肉、魚肝、魚肉等生物樣品中游離棉酚及其氧化產(chǎn)物gossypolone的定量分析。
　　(4)建立雞肝中(+)-棉酚和（-）-棉酚LC-MS/MS定量分析方法，樣品定量分析過程中不會受到生物樣品中內(nèi)源性基質(zhì)的干擾，線性良好，被分析生物樣品各方法學(xué)驗證指標均符合指導(dǎo)原則中的定量分析要求，可以用于雞肝、雞肉、魚肝、魚肉等生物樣品中(+)-棉酚、(-)-棉酚的定量分析。
　　(5)從烏魯木齊市三個農(nóng)貿(mào)市場及阜康市、昌吉市各兩個農(nóng)貿(mào)

5、市場上購買動物源性食品90份，其中雞肝、豬肝，魚肝、雞肉、豬肉，魚肉樣品各15份。采用LC-MS/MS對動物源性食品中游離棉酚、棉酚氧化產(chǎn)物gossypolone、(+)-棉酚、（-）-棉酚等成分進行含量測定。檢測結(jié)果:肝臟樣品中，游離棉酚含量為0.2231～1.5463μg/g，檢出率為82.2％;(+)-棉酚含量為0.2143～0.7420μg/g，檢出率為71.1％;(-)-棉酚含量為0.2045～0.7372μg/g，檢出率為6