動(dòng)物性食品中β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物及其代謝物檢測(cè)方法的研究.pdf

1、β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素是指含有β-內(nèi)酰胺環(huán)的抗生素，因?yàn)榭咕饔脧?qiáng)，是目前在牲畜疾病醫(yī)藥治療和預(yù)防中應(yīng)用最多的一類(lèi)抗生素，如果使用不當(dāng)，容易殘留在動(dòng)物源性食品中。長(zhǎng)期食用殘留β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的食品，就如同長(zhǎng)期攝入低劑量的抗生素，使對(duì)抗生素過(guò)敏的人產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)，此外，容易使人體產(chǎn)生耐藥菌株，給患者使用此類(lèi)抗生素治療疾病帶來(lái)不良影響。目前，各類(lèi)法規(guī)文件規(guī)定檢測(cè)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素殘留時(shí)，只檢測(cè)母體化合物，甚少涉及代謝物的殘留；而有些高含量的代謝

2、物也會(huì)使對(duì)抗生素過(guò)敏的人產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)。因此，為了保證人們飲食的安全和衛(wèi)生，不僅要檢測(cè)動(dòng)物源性食品中的抗生素原藥，還需要檢測(cè)其代謝產(chǎn)物。
　　 本論文通過(guò)對(duì)動(dòng)物源性食品進(jìn)行樣品前處理優(yōu)化，建立了超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)動(dòng)物源性食品中殘留的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素及其代謝物的方法，并進(jìn)行了方法學(xué)考察。該方法具有快速、靈敏、選擇性高的特點(diǎn)。本論文所作的工作及結(jié)論如下：
　　 1.建立了超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜聯(lián)用

3、檢測(cè)牛奶中羥氨芐青霉素、青霉素G、苯唑青霉素、鄰氯青霉素、雙氯青霉素、頭孢唑啉、頭孢噻肟、頭孢氨芐、頭孢噻呋九種β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素殘留的方法。以WatersAcquityUPLCBEHShieldRP18色譜柱分離，乙腈和0.02％甲酸水溶液作為流動(dòng)相，在優(yōu)化的色譜條件下，所有物質(zhì)在六分鐘內(nèi)達(dá)到完全分離。青霉素V作為內(nèi)標(biāo)，各物質(zhì)的線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)R均大于0.9980，在0.5MRL、1MRL、2MRL三個(gè)濃度的添加回收實(shí)驗(yàn)中，回收率為91％

4、～104％，RSD≤10％，S/N＞3的LODs為0.04～0.2ng·mL-1，LOQs分別設(shè)定為MRLs的一半，且結(jié)果顯示S/N均大于10。應(yīng)用此方法檢測(cè)了北京當(dāng)?shù)爻匈?gòu)買(mǎi)的20份牛奶樣品，結(jié)果表明樣品中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)超標(biāo)的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素殘留。
　　 2.建立了超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)牛奶中羥氨芐青霉素、青霉素G及其五種主要代謝產(chǎn)物殘留。使用WatersAcquity UPLCHSST3為分析柱，乙腈和添加5mm

5、ol·L-1乙酸銨、0.15％甲酸的水溶液作為流動(dòng)相，在優(yōu)化的色譜條件下，七種目標(biāo)物質(zhì)在六分鐘內(nèi)達(dá)到完全分離，且峰形窄，對(duì)稱(chēng)性強(qiáng)。以PENV作為內(nèi)標(biāo)，牛奶的線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)R均大于0.9985，LODs為0.02～1.0ng·mL-1，LOQs為2.5～5.0ng·mL-1，在LOQ、2LOQ、4LOQ三個(gè)濃度的添加水平下，回收率為85％～108％，RSD小于13％。應(yīng)用該方法檢測(cè)北京當(dāng)?shù)爻械?0份牛奶樣品，在部分牛奶中檢出了較高濃度的青

6、霉素G的代謝產(chǎn)物，為國(guó)家有關(guān)部門(mén)完善相關(guān)的代謝物檢測(cè)方法提供參考依據(jù)。
　　 3.建立了超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)牛肉中羥氨芐青霉素、青霉素G及其五種主要代謝產(chǎn)物殘留，使用WatersAcquityUPLCHSST3為分析柱，乙腈和添加5mmol·L-1乙酸銨、0.15％甲酸的水溶液作為流動(dòng)相，在優(yōu)化的色譜條件下，七種目標(biāo)物質(zhì)在六分鐘內(nèi)達(dá)到完全分離，且峰形窄，對(duì)稱(chēng)性強(qiáng)。以PENV作為內(nèi)標(biāo)，線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)R均大于0.99