動物性食品中泰妙菌素殘留檢測方法的建立.pdf

1、近年來農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題尤為突出，已經(jīng)引起了全社會的廣泛關(guān)注。當前，提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量，保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，不僅是增強農(nóng)產(chǎn)品竟爭力和提高人民生活質(zhì)量的需要，也是增加農(nóng)民收入，提高農(nóng)業(yè)效益的需要。抗生素類藥物因其在防治畜禽疾病方面有特效而被廣泛使用在農(nóng)畜和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)以及動物性食品添加劑中，但是濫用這些抗生素會導(dǎo)致其在動物體內(nèi)大量殘留，直接危害人類的健康。因此，世界各國針對進出口動物組織及相關(guān)產(chǎn)品中的抗生素類獸藥殘留限量作出了嚴格的限定。在食品

2、動物養(yǎng)殖過程中，歐盟已全面禁止使用任何抗生素。我國對抗生素的使用也在《獸藥管理條例》、《動物性食品管理條例》中做出了明確規(guī)定。因此建立適用的抗生素殘留檢測方法是非常重要的。本實驗室對動物性食品中泰妙菌素檢測方法進行了研究，建立了外標法和同位素內(nèi)標液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)來檢測動物性食品中的泰妙菌素，兩個方法經(jīng)比較顯示同位素內(nèi)標法在檢測組織樣品中泰妙菌素殘留時由于外標法。
　　同位素內(nèi)標法定量測定動物性食品中泰妙菌素

3、的方法。首先對樣品處理條件進行了優(yōu)化。試料經(jīng)磷酸鹽緩沖液初步提取后，可將與組織蛋白結(jié)合的泰妙菌素鹽轉(zhuǎn)換成分子態(tài)且易于溶于有機相的泰妙菌素堿，再加入乙酸乙酯提取，于50℃水浴下氮氣吹干。殘余物用2％甲酸溶液溶解，正己烷脫脂離心后，棄去正己烷層，水相經(jīng)MCX固相萃取柱凈化，5％氨化甲醇洗脫，洗脫液于50℃水浴下氮氣吹干，殘余物用流動相溶解，過0.22μm微孔濾膜后，供高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測定，并以同位素內(nèi)標定量。
　　然后采用液相

4、色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)檢測組織樣品中泰妙菌素。結(jié)果顯示該法的檢出限和定量限分別為0.25和0.5μg/kg。泰妙菌素的標準曲線在2.5～100ng/mL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)R2＞0.999。豬肉樣品在0.5、1.0和5.0μg/kg三個添加濃度時的平均回收率為71.0％～95.4％，批內(nèi)RSD為2.9％～7.2％、批間RSD為1.1％～7.5％;豬肝樣品在0.5、1.0和5.0μg/kg三個添加濃度時的平均回

5、收率為72.3％～92.3％，批內(nèi)RSD為4.9％～8.1％、批間RSD為9.2％～12.6％;雞肉樣品在0.5、1.0和5.0μg/kg三個添加濃度時的平均回收率為90.2％～103.4％，批內(nèi)RSD為4.2％～8.1％、批間RSD為2.9％～8.9％;雞肝樣品在0.5、1.0和5.0μg/kg三個添加濃度時的平均回收率為70.9％～101.3％，批內(nèi)RSD為3.1％～8.3％、批間RSD為4.2％～9.4％;雞蛋樣品在0.5、1.0