檢測(cè)細(xì)菌β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物耐藥基因芯片研制.pdf

1、背景：隨著抗菌藥物的不斷發(fā)展與應(yīng)用，病原菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性也不斷增加，細(xì)菌對(duì)多種抗菌藥物耐藥，尤其是對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的耐藥已是一個(gè)很?chē)?yán)重的問(wèn)題。 目的 利用多重PCR技術(shù)的寡核苷酸芯片建立高通量的檢測(cè)細(xì)菌β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物耐藥基因的方法，為臨床合理使用β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素提供科學(xué)的依據(jù)。 方法 1、收集、保存、培養(yǎng)細(xì)菌樣本。 2、建立靈敏、特異的細(xì)菌DNA提取方法。 3、從genban

2、k中收集常見(jiàn)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物耐藥基因序列信息，并用相應(yīng)軟件分析比對(duì)，設(shè)計(jì)多重PCR引物，建立多重PCR體系。 4、針對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物耐藥基因，設(shè)計(jì)芯片雜交探針，制作寡核苷酸芯片。 5、Cy3標(biāo)記待測(cè)靶序列，片段化PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，與玻片表面的探針固相雜交。 結(jié)果 1、建立了靈敏、可靠的適于PCR擴(kuò)增的細(xì)菌DNA提取方法。 2、針對(duì)常見(jiàn)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物耐藥基因，設(shè)計(jì)了多重PCR引物，建立了包含13對(duì)