鮑曼不動桿菌β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥基因及轉(zhuǎn)座子、插入序列遺傳標記的初步研究.pdf

1、研究背景：
　　 鮑曼不動桿菌作為一種條件致病菌，是醫(yī)院感染的主要病原菌之一。近年來，隨著廣譜抗生素的大量應用，鮑曼不動桿菌在臨床的分離率呈增加趨勢，多重耐藥甚至泛耐藥的鮑曼不動桿菌比例不斷上升，并在全球多處發(fā)生爆發(fā)流行，已成為臨床抗感染治療的棘手問題。
　　 不動桿菌屬的耐藥機制比較復雜，包括：
　　 1）產(chǎn)生多種滅活酶和改變代謝途徑，使抗菌藥物失活;
　　 2）改變外膜孔蛋白結(jié)構(gòu)和數(shù)量（如外膜蛋白的丟

2、失或膜孔蛋白的缺損），進而降低細菌外膜藥物的通透性;
　　 3）改變藥物對細菌的作用靶部位，從而逃避抗菌藥物的作用;
　　 4）激活外排泵出系統(tǒng)，從而降低細菌內(nèi)抗菌藥物的濃度等。因此，鮑曼不動桿菌耐藥性及其耐藥機制的研究，對于指導臨床用藥及控制其傳播具有重要意義。
　　 目的：
　　 通過研究鮑曼不動桿菌的耐藥機制，為鮑曼不動桿菌臨床用藥提供實驗依據(jù)。主要從以下兩方面進行研究:一方面研究鮑曼不動桿菌對臨床

3、常用的7類抗生素耐藥性，分析調(diào)查其攜帶β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥基因的現(xiàn)狀，探討鮑曼不動桿菌ADC型β-內(nèi)酰胺酶基因構(gòu)成以及其基因進化分析;另一方面對多藥耐藥鮑曼不動桿菌耐藥性和轉(zhuǎn)座子、插入序列遺傳標記的關系進行分析。
　　 方法：
　　 (1)采用K-B法進行細菌藥物敏感試驗:檢測鮑曼不動桿菌對21種常用的β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、喹諾酮類、氯霉素、四環(huán)素、利福平和磺胺類等抗菌藥物的耐藥情況。
　　 (2)PCR檢測

4、攜帶β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥基因的存在狀況。
　　 (3)PCR檢測鮑曼不動桿菌ADC型β-內(nèi)酰胺酶基因存在狀況，以及采用MEGA4.1軟件作基因進化分析。
　　 (4)PCR檢測耐藥細菌轉(zhuǎn)座子、插入序列遺傳標記并作DNA測序。
　　 結(jié)果:
　　 (1)10株MDR-Ab對21種抗菌藥物均為耐藥，共檢出TEM、OXA-2、ADC、CTX-M-1、CTX-M-2、IMP、OXA-24等耐藥基因。
　　

5、 (2)92株鮑曼不動桿菌對頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢吡肟、亞胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星、米渃環(huán)素、復方新諾明的耐藥率分別為:91.3％、91.3％、91.3％、89.1％、89.1％、90.2％、67.4％、83.7％、58.7％、84.7％;ADC型β-內(nèi)酰胺酶的陽性率為93.5％;ADC型β-內(nèi)酰胺酶基因分子進化顯示，可歸為4個簇群。
　　 (3)轉(zhuǎn)座子tnp513和插入序列遺傳標記ISaba