多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥基因檢測(cè)及分布研究.pdf

1、目的：
　　對(duì)十堰地區(qū)近三年來(lái)鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥現(xiàn)狀進(jìn)行分析，指導(dǎo)臨床用藥;了解多重耐藥菌株的β-內(nèi)酰胺酶基因、氨基糖苷類(lèi)修飾酶基因、消毒劑與磺胺類(lèi)等抗菌藥物耐藥相關(guān)基因存在狀況和菌株的親緣性，揭示鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥機(jī)制。
　　方法：
　　第一部分:回顧性分析2007年1月到2009年12月自臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌菌株，采用K-B法進(jìn)行抗菌藥物藥敏試驗(yàn)。按CLSI2007版判斷結(jié)果，分析多重耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌的檢出率

2、。
　　第二部分:聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction，PCR)檢測(cè)20株多重耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌的β-內(nèi)酰胺酶基因，用多個(gè)分子標(biāo)志分型法，以13種基因?yàn)榉肿訕?biāo)志作檢測(cè)結(jié)果的樣本聚類(lèi)分析，檢測(cè)菌株的親緣性。
　　第三部分:PCR法分別檢測(cè)慶大霉素、阿米卡星敏感株和耐藥株的鮑曼不動(dòng)桿菌的氨基糖苷類(lèi)修飾酶基因。
　　第四部分:瓊脂稀釋法測(cè)定多重耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)醫(yī)院常用消毒劑的MIC，并用PCR

3、法檢測(cè)Ⅰ類(lèi)整合子標(biāo)志物之一的消毒劑耐藥基因qacE△1-sul1。
　　結(jié)果：
　　第一部分:2007年1月到2009年12月分離到鮑曼不動(dòng)桿菌367株。鮑曼不動(dòng)桿菌的檢出率有逐年上升的趨勢(shì)。鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥率在2008年以后除頭孢哌酮/舒巴坦的耐藥率在18％左右以外，對(duì)其它抗生素的耐藥率均在90％左右。多重耐藥菌株數(shù)分離率每年有上升的趨勢(shì)，多重耐藥菌株數(shù)2009年達(dá)到了58.54％之多。三年來(lái)，鮑曼不動(dòng)桿菌的分離數(shù)及多重

4、耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的分離率均有上升的趨勢(shì)。多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的分離率自2007年以來(lái)分別達(dá)到39.13％(18/46)、49.07％(79/161)、58.54％(120/205)。
　　第二部分:20株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌通過(guò)PCR共檢出:bla TEM基因陽(yáng)性率為50％，bla PER基因陽(yáng)性率70％，bla VEB基因陽(yáng)性率10％，bla GIM基因陽(yáng)性率5％，bla CARB基因陽(yáng)性率10％，bla DHA基因陽(yáng)性率15％

5、;未檢出bla SHV、bla OXA、bla GES、bla SPM、bla VIM、bla IMP、oprD2基因。
　　第三部分:18株耐藥株的氨基糖苷類(lèi)修飾酶(AMEs)基因檢測(cè)結(jié)果，aac(6')-Ⅰ基因陽(yáng)性率27.78％，aac(6')-Ⅱ基因陽(yáng)性率33.33％，ant(3")-Ⅰ基因陽(yáng)性率77.78％，ant(2")-Ⅰ基因陽(yáng)性率27.78％;10株慶大霉素、阿米卡星敏感株未檢出AMEs基因。
　　第四部分:2

6、0株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)醫(yī)院常用消毒劑苯扎溴銨和二氯異氰尿酸鈉的MIC均在8～32ug/ml之間，高于對(duì)照菌的MIC;基因(qacE△1-sul1)基因陽(yáng)性率100％。
　　結(jié)論：
　　1、近三年來(lái)，十堰地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌的分離率和耐藥率呈上升趨勢(shì)，且多重耐藥株的分離率很高，目前分離株對(duì)粘菌素全部敏感，對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦的敏感性相對(duì)較高，對(duì)碳青酶烯類(lèi)的敏感性較低。臨床應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗生素。
　　2、多重耐藥鮑曼

7、不動(dòng)桿菌攜帶:bla TEM、bla PER、bla VEB、bla CARB、bla GIM、bla DHA等多種β-內(nèi)酰胺酶基因;膜孔蛋白基因oprD2缺失率很高。
　　3、用多個(gè)分子標(biāo)志分型法，以13種耐藥基因?yàn)榉肿訕?biāo)志作檢測(cè)結(jié)果的樣本聚類(lèi)分析，結(jié)果提示本院鮑曼不動(dòng)桿菌存在院內(nèi)感染傳播且存在暴發(fā)性流行
　　4、18株慶大霉素、阿米卡星敏感耐藥株均檢出氨基糖苷類(lèi)修飾酶(AMEs)基因，本地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌以攜帶ant(3"

8、)-Ⅰ基因?yàn)橹鳌?br>　　5、多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)醫(yī)院常用消毒劑苯扎溴銨和二氯異氰尿酸鈉表現(xiàn)為耐藥;Ⅰ類(lèi)整合子標(biāo)志物之一的消毒劑與磺胺類(lèi)等抗菌藥物耐藥相關(guān)基因(qacE△1-sul1)檢出率極高，這與消毒劑和復(fù)方新諾明耐藥表現(xiàn)一致，說(shuō)明細(xì)菌攜帶qacE△1-sul1基因是消毒劑和復(fù)方新諾明耐藥的主要因素。
　　6、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)，指導(dǎo)臨床合理用藥，及時(shí)發(fā)現(xiàn)耐藥菌株及其流行趨勢(shì)，為延緩細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生，有效控制耐藥菌株