鮑曼不動桿菌的耐藥性分析及AmpCβ-內酰胺酶介導的耐藥機制研究.pdf

1、研究背景：
　　 鮑曼不動桿菌屬于非發(fā)酵革蘭陰性菌，為條件致病菌，是重要的醫(yī)院感染病原菌。[1][2]，尤其是醫(yī)源性肺炎和醫(yī)療侵入性操作相關的感染，在免疫力低下的患者中，可以引起嚴重的、甚至致死性的感染。據美國院內感染監(jiān)測數據(International Nosocomial Infection Control Consortium，NNIS)2003年的報道顯示，在革蘭陰性桿菌中，鮑曼不桿菌在院內感染中占第四位，為僅次于銅綠假

2、單胞菌的又一個重要的非發(fā)酵菌。隨著鮑曼不動桿菌感染及廣譜抗菌藥物應用的增多，其耐藥現(xiàn)象日益突出。鮑曼不動桿菌對青霉素類、一二代頭孢菌素等天然耐藥;ESBL和AmpC酶造成的三代和部分四代頭孢菌素耐藥漸趨嚴重，最近又出現(xiàn)“泛耐藥”的鮑曼不動桿菌(Pan-drug resistant acinetobacter baumanii)。某綜合性醫(yī)院2004年一2008年資料也表明，4種常見非發(fā)酵革蘭陰性菌的分離數呈逐年上升趨勢，鮑曼不動桿菌僅次

3、于銅綠假單胞菌，居第二位，其2004年臨床分離137株，到2008年分離284株，分離率持續(xù)上升。鮑曼不動桿菌耐藥機制復雜，產多種β-內酰胺酶，PBP改變，外膜蛋白缺失，外排泵過度表達等共同作用造成了其多重耐藥，幾種機制的共同作用，造成多重耐藥以及耐藥菌株的廣泛傳播。其中，產多種β-內酰胺酶是鮑曼不動桿菌對β-內酰胺類藥物耐藥的重要機制。
　　 由于不同地區(qū)、不同醫(yī)院流行的β-內酰胺酶基因型各不相同，其耐藥表型也不一樣，深入研究

4、各地區(qū)流行菌株的耐藥性和基因型，有利于治療、預防和控制耐藥菌株的傳播和流行。目前關于耐藥鮑曼不動桿菌產AmpC酶的報道較少，對于多重耐藥的鮑曼不動桿菌，有必要針對相應的耐藥基因區(qū)別對待，合理用藥，延緩各類抗生素的耐藥進程。
　　 目的：
　　 1.了解鮑曼不動桿菌對常見抗生素的耐藥現(xiàn)狀及其耐藥譜特征，以指導臨床合理選用抗生素；
　　 2.明確AmpCβ-內酰胺酶在鮑曼不動桿菌中的流行狀況及其流行亞型，完善AmpC

5、β-內酰胺酶的分子流行病學資料。
　　 方法：
　　 1.采用VITEK-32型全自動細菌分析系統(tǒng)對臨床收集的鮑曼不動桿菌進行重新鑒定并完成藥敏實驗；
　　 2.依據美國臨床和實驗室標準化協(xié)會(CLSI：Clinical and Laboratory Standards Institute)2009年版推薦的方法解釋鮑曼不動桿菌對常見抗生素的最低抑菌濃度(minimal inhibitory concentrat

6、ions，MIC)；
　　 3.設計合成針對blaACC、blaATC、blaCMY、blaMOX、blaDHA，blaADC-1，blaADC-7，blaFOX的引物序列，采用PCR技術對AmpCβ-內酰胺酶耐藥基因進行特異性擴增，并對PCR產物進行DNA測序分析。
　　 結果：
　　 1臨床分離的鮑曼不動桿菌菌株主要來自院內各類監(jiān)護室和老年病區(qū)，標本類型則以呼吸道分泌物為主，人群分布呈現(xiàn)明顯的偏態(tài)型分布，峰值

7、為71-80歲年齡組，在1歲內年齡組分布略高。
　　 2410株鮑曼不動桿菌對常用抗生素耐藥率均較高，25種受試抗生素中，所有菌株對第一、二代頭孢菌素完全耐藥，青霉素，第三代頭孢菌素，單環(huán)類，喹諾酮類，氨基糖苷類的耐藥均超過50％(最低為49.8％)，碳青霉烯類，第四代頭孢菌素及β-內酰胺/β-內酰胺酶抑制劑復合物耐藥率為15％-65.8％。
　　 3.本次研究中進行AmpCβ-內酰胺酶耐藥基因檢測的菌株中共檢出blaA

8、DC-1基因86株(占77％)，blaADC-7基因86株(占77％)，同時攜帶二種基因的78株(占69.6％)。
　　 4.觀察納入本次研究的菌株，同時擁有blaADC-1和blaADC-7基因的菌株在藥物頭孢曲松，頭孢吡肟，哌拉西林/他唑巴坦，亞胺培南，慶大霉素，環(huán)丙沙星的耐藥率上與單獨攜帶blaADC-1/blaADC-7或者未檢出blaADC基因的組別相比具統(tǒng)計學意義。在藥物頭孢唑肟，四環(huán)素，替卡西林上顯示了攜帶有bla