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文檔簡介
1、動物源性食品與人們的生活息息相關(guān),其質(zhì)量安全問題更是受到各國政府和食品安全機構(gòu)的廣泛關(guān)注,而獸藥殘留是導(dǎo)致動物源性食品安全性下降的重要因素之一。因此,獸藥殘留分析成為亟待解決的重要課題。
動物源性食品中獸藥殘留的分析主要包括獸藥的提取和檢測,當代分析儀器已經(jīng)能夠滿足各類化合物的測定要求,因此制約動物源性食品中獸藥殘留檢測的關(guān)鍵是樣品前處理技術(shù)。論文對現(xiàn)有動物源性食品中獸藥的提取技術(shù)進行了綜述,并期望探索新的環(huán)境友好前處理技術(shù)。
2、以分子熒光光譜法和平衡透析法分別詳細研究了二苯乙烯類激素與牛血清白蛋白(BSA)、二苯乙烯類激素與實際樣品之間的結(jié)合作用,闡明了待測藥物在實際樣品中的存在狀態(tài),為食品中獸藥殘留的提取提供了理論依據(jù)。結(jié)合乙醇-K2HPO4-水雙水相體系、有機水溶液提取法、弱酸水溶液提取法與高效液相色譜(HPLC)檢測技術(shù),建立了檢測動物源性食品中二苯乙烯類激素、喹諾酮類抗生素(QNs)和四環(huán)素類抗生素(TCs)的方法。
論文主要分為五部分:
3、r> 第一部分:綜述了動物源性食品的安全狀況及獸藥殘留的危害,概述了動物源性食品獸藥殘留的檢測方法和常用的前處理技術(shù),闡明了本論文的研究意義和內(nèi)容。
第二部分:應(yīng)用分子熒光光譜法研究了二苯乙烯類激素(己烷雌酚、己烯雌酚和雙烯雌酚)與BSA的結(jié)合作用,進一步利用平衡透析法研究了二苯乙烯類激素與實際牛奶樣品的結(jié)合率,同時詳細討論了蛋白質(zhì)對提取牛奶樣品中二苯乙烯類激素殘留的影響。結(jié)果表明,二苯乙烯類激素與牛奶樣品具有較強結(jié)合作用,
4、而體積分數(shù)為70%的乙醇水溶液可引起蛋白質(zhì)緩慢變性、伸展,充分離解與其結(jié)合的二苯乙烯類激素,向上述體系中加入適量 K2HPO4鹽后形成雙水相體系,脂溶性的二苯乙烯類激素殘留可進入雙水相體系上相,實現(xiàn)藥物殘留的均相高效萃取與基質(zhì)去除。由于體積分數(shù)為70%的乙醇水溶液的極性較大,萃取液中的脂溶性雜質(zhì)比常用的疏水溶劑液液萃取體系中少,所以本實驗無需后續(xù)凈化步驟,應(yīng)用高效液相色譜(HPLC)測定。實驗提出的樣品前處理方法用于牛奶中三種二苯乙烯類
5、激素的快速測定,取得滿意結(jié)果,回收率為83.2%~93.8%,相對標準偏差低于4.5%,檢出限為11.7~20.7 ng·g-1,樣品前處理方法步驟簡單,高效,經(jīng)濟,綠色環(huán)保,為藥物檢測提供了一個新的有效方法。
第三部分:結(jié)合液相色譜檢測技術(shù),建立了一種環(huán)境友好型檢測牛肉、豬肉、魚肉中三種二苯乙烯類激素的方法。運用平衡透析法研究了藥物與肉樣之間的強結(jié)合作用,同時運用瑞利散射光譜和HPLC研究了蛋白質(zhì)對提取三種二苯乙烯類激素的影
6、響。實驗結(jié)果表明,藥物與蛋白質(zhì)之間的強結(jié)合作用可以降低從肉樣中提取二苯乙烯類激素的提取率。以體積分數(shù)為80%的乙醇水溶液作為提取試劑時,肉樣中的蛋白質(zhì)會發(fā)生緩慢且完全的變性,釋放出與蛋白質(zhì)結(jié)合的二苯乙烯類激素藥物,進而得到較高的提取率。由于80%的乙醇水溶液極性較大,提取液中的脂溶性雜質(zhì)很少,在提取液中加入少量的PSA(N-丙基乙二胺修飾的硅膠)粉末即可達到滿意的凈化效果,大大簡化了樣品溶液的后續(xù)凈化步驟。實驗提出的樣品前處理方法簡單高
7、效,環(huán)境友好,通過減慢蛋白質(zhì)的變性速度,使與蛋白質(zhì)結(jié)合的藥物充分釋放到提取液中,達到提高藥物提取率的效果。本法應(yīng)用于牛肉、豬肉、魚肉中二苯乙烯類激素的測定,結(jié)果令人滿意,回收率均在81.4%~98.1%之間,RSD值為1.3%~4.8%。
第四部分:建立了一種環(huán)境友好型、同時分離、檢測牛奶中六種喹諾酮類藥物(依諾沙星,諾氟沙星,環(huán)丙沙星,洛美沙星,恩諾沙星,加替沙星)的高效液相色譜分析法。方法采用反相Chromatorex C
8、18色譜柱,二極管陣列檢測器,檢測波長為280 nm。實驗表明,適當濃度的檸檬酸和硫酸銨溶液作為提取液時可使牛奶中的蛋白質(zhì)發(fā)生緩慢而徹底的變性,釋放出與其結(jié)合的喹諾酮類藥物,從而提高了從牛奶中提取喹諾酮類藥物的提取效率。然后通過對提取液進行加熱沉淀蛋白質(zhì)、加入PSA凈化,即可實現(xiàn)樣品的快速前處理。該方法用于牛奶中六種喹諾酮類抗生素殘留的測定,回收率均在82.0%~117.8%之間,方法檢出限為34.5~85.0 ng·g-1,實驗提出的
9、樣品前處理方法可靠、快速、環(huán)保、易于操作。
第五部分:實驗詳細探討了蛋白質(zhì)對于從牛奶中提取三種四環(huán)素類藥物(金霉素、美他環(huán)素和強力霉素)提取率的影響,并選擇合適的弱酸溶液作為提取試劑,同時用HPLC法考察了三種藥物在不同弱酸濃度下的提取率。結(jié)果表明,合適濃度的弱酸溶液可以破壞四環(huán)素類藥物與蛋白質(zhì)之間的強結(jié)合作用,使牛奶中的蛋白質(zhì)緩慢變性并充分釋放與其結(jié)合的四環(huán)素類藥物,從而提高了從牛奶中提取四環(huán)素類藥物的提取效率。加入PSA粉
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