動物可食性組織中獸藥多殘留檢測關鍵技術研究.pdf

1、為確保動物性食品的安全,開展獸藥殘留分析具有非常重要的意義。目前關于藥物的殘留分析方法較多,但研究重點主要是檢測方法的改進,且研究對象禁錮于單一基質或單組分,所采用的樣品前處理方法都是傳統(tǒng)的液液萃取。樣品前處理是殘留分析的保障,其好壞直接影響到分析的各項指標、成本和效率。
　　 快速溶劑萃取作為一種新的樣品前處理方法,是在一定的壓力和溫度下用溶劑對固體或者半固體樣品進行提取的方法。使用常規(guī)的溶劑、通過提高溫度和增加壓力來提高萃取

2、的效率,其結果大大縮短了萃取的時間并明顯降低萃取溶劑的使用量。
　　 本課題深入探索并建立了動物性食品中多種四環(huán)素類、磺胺類、氟喹諾酮類、環(huán)丙氨嗪及其相關化合物,雙甲脒的藥物殘留分析方法,使用快速溶劑萃取法,節(jié)省樣品前處理時間,提高食品安全檢測的效率,為5類藥物的殘留監(jiān)控提供技術支持和理論依據(jù),對動物源食品安全評價具有指導意義和參考價值。
　　 1.動物可食性組織中四環(huán)素類藥物分析方法研究建立了動物性食品中7種四環(huán)素類殘

3、留檢測的高效液相色譜定量方法和液相色譜串聯(lián)質譜確證方法。動物組織樣品采用三氯乙酸和甲醇溶液提取,萃取的溫度60℃,壓力120 bar時回收率最佳。提取液經(jīng)HLB固相萃取小柱凈化,氮氣流吹干濃縮,流動相溶解殘渣,高效液相色譜和液相色譜串聯(lián)質譜檢測。定量方法中,動物源食品中的7種四環(huán)素類藥物定量限均低于20μ/g,組織添加回收率為75.0％～104.9％,相對標準偏差小于10％；確證方法中,各種動物組織以及牛奶,雞蛋和蜂蜜中的檢測限為0.2

4、μg/kg,定量限為0.5μg/kg。7種四環(huán)素類藥物在組織中添加濃度為0.5～200μg/kg,回收率為78.8～105.2％,相對標準偏差小于11％。該方法的建立,解決了四環(huán)素類分析方法中存在的回收率低,樣品前處理繁瑣的問題。
　　 2.動物可食性組織中磺胺類藥物同時分析方法研究建立了動物性食品中18種磺胺類藥物的高效液相色譜定量方法和20種磺胺類藥物液相色譜串聯(lián)質譜確證方法。當萃取溫度為60℃,壓力65 bar,萃取溶劑為

5、乙腈時,提取回收率最高。提取液經(jīng)減壓旋轉蒸干后,殘渣加入2％的乙酸10mL溶解混勻,過SPE柱凈化,流動相定容,待檢測。定量方法中,組織中的檢測限為5μg/kg,定量限為10μg/kg,在組織中添加回收率為71.1‰～118.3％,變異系數(shù)小于12％。確證方法中,動物性食品中的檢測限為0.5μg/kg,定量限為1μg/kg,在組織中添加回收率為70.5‰～117.5％,變異系數(shù)小于13％。本研究應用快速溶劑萃取技術提取了動物可食性組織中

6、20種磺胺類藥物,為磺胺類藥物多殘留快速分析提供了參考。
　　 3.動物可食性組織中氟喹諾酮類藥物分析方法研究建立了動物性食品中15種氟喹諾酮類藥物的高效液相色譜定量方法和20種氟喹諾酮類藥物殘留的液相色譜串聯(lián)質譜確證分析方法。優(yōu)化了快速溶劑萃取參數(shù),萃取池溫度65℃,壓力100 bar,萃取溶劑為甲醇時,提取效率最佳。提取合并提取液,40℃減壓旋轉蒸干,殘渣加入磷酸鹽緩沖液10 mL溶解混勻,過SPE柱凈化后供測定。定量方法中

7、,動物性食品中的檢測限為5μg/kg,定量限為10μg/kg,在組織中添加回收率為70.6％～111.1％,變異系數(shù)小于13％。確證方法中,動物性食品中的檢測限為0.5μg/kg,定量限為1μg/kg,在組織中添加回收率為73.7％～111.2％,變異系數(shù)小于15％。該方法應用快速溶劑萃取技術提取了動物可食性組織中20種磺胺類藥物。
　　 4.動物可食性組織中環(huán)丙氨嗪,三聚氰胺及其代謝物分析方法研究建立了動物性食品中環(huán)丙氨嗪,三

8、聚氰胺及其代謝物殘留的高效液相色譜定量方法和液相色譜串聯(lián)質譜確證分析方法。優(yōu)化了快速溶劑萃取參數(shù),萃取溶劑為甲醇/水(90/10,v/v),萃取池溫度為70℃,壓力90 bar時,提取效率最佳。提取合并提取液,40℃減壓旋轉蒸干,過膜測定。液相色譜條件中色譜柱為APS-2分析柱,檢測波長230 nm。質譜在正離子模式下,應用選擇反應監(jiān)控。定量方法中,動物性食品中的5種化合物的檢測限為10μg/kg,定量限為40μg/kg,在組織中添加回

9、收率為72.2％～115.4％,變異系數(shù)小于12％。確證方法中,動物性食品中的檢測限為5μg/kg,定量限為10μg/kg,在組織中添加回收率為70.2％～118.4％,變異系數(shù)小于15％。該方法已成功的用于動物性食品中這5種化合物的殘留檢測。
　　 5.動物可食性組織中雙甲脒藥物分析方法研究建立了動物性食品中雙甲脒和2,4-二甲基苯胺殘留的氣相色譜的定量方法和氣相色譜質譜確證分析方法。優(yōu)化了ASE萃取參數(shù),萃取池溫度60℃,壓

10、力120 bar,提取溶劑為正己烷和甲醇時,提取效率最高。提取液濃縮后過固相萃取小柱凈化,氣相色譜質譜分析,對于氣相色譜分析,樣品需要加入HFBA進行衍生。定量方法中,豬、牛、羊的脂肪、肝臟和腎臟的檢測限為5μg/kg,定量限為10μg/kg,在豬、牛、羊的組織中添加回收率為72.4％～101.3％,變異系數(shù)小于11.5％。確證方法中,豬、牛、羊的脂肪、肝臟和腎臟的檢測限為2μg/kg,定量限為5μg/kg,在組織中添加回收率77.4％